一、镉离子诱导BA/F3β细胞发生奇特的细胞凋亡（论文文献综述）
李俊杰[1]（2018）在《氯化汞的急性腹腔毒性作用》文中认为目的重金属汞是常见的环境污染物,对神经系统、消化系统、生殖系统以及免疫系统有毒性作用。目前,关于汞对机体局部毒性作用的报道较少。本文以小鼠为实验动物模型,以腹腔注射的方式染毒氯化汞,探讨了氯化汞对小鼠腹腔内免疫细胞的毒性作用。材料与方法选用昆明种和FVB/N两个不同品系的小鼠,利用寇氏法,分别对雌性和雄性,测定了一次性腹腔注射条件下的氯化汞的半数致死量。雌性FVB/N小鼠,一次性腹腔注射氯化汞,剂量为5mg/kg体重。注射后第1、2、3、5、7和9d后,利用脲酶法和赖氏法,分别测定了血清中尿素氮的含量和谷草转氨酶的活性;用ELISA方法,测定了血清中的IgE的含量;用流式细胞仪,测定了小鼠腹腔内细胞数目、细胞的凋亡率、T和B细胞构成比。结果昆明种雌性和雄性半数致死量分别为8.68mg/kg和8.89mg/kg,FVB/N小鼠雌性和雄性半数致死量分别为8.89mg/kg和13.05mg/kg。注射后第1天,谷草转氨酶的活性以及第2和3d,尿素氮的含量显着地高于对照组;注射后第9d,氯化汞显着地增加了血清中IgE的含量。注射后第1d起,氯化汞显着地降低了腹腔内免疫细胞数目和B细胞的百分比,而增高了 T细胞的百分比。与对照组相比,接触氯化汞第2d起,显着地增高了腹腔内免疫细胞的凋亡率。结论（1）小鼠的腹腔注射氯化汞的半数致死量在8.68和13.05 mg/kg之间,雌性和雄性没有明显的区别。（2）一次性腹腔注射氯化汞也增高了血清中IgE的含量。（3）氯化汞对腹腔内免疫细胞有直接毒性作用,并且改变了免疫细胞的构成比。
刘小红[2]（2016）在《水体镉暴露对稀有鮈鲫肝脏毒性及脂代谢影响的初步研究》文中提出镉是世界上最毒的重金属之一。由于工、农业的发展等因素,自然环境,包括水生态受到严重的镉污染。镉在生物细胞内不被降解,半衰期长,能在各组织累积,并造成极大的损伤。本研究以中国目前常用的环境毒理学研究实验动物稀有鮈鲫（Gobiocypris rarus）性成熟雌鱼为对象,运用组织学、组织化学、透射电镜技术、生理学、分子生物学、转录组学等研究手段和方法,研究水体急、慢性镉暴露对稀有鮈鲫肝脏的形态结构、肝细胞的细胞器、脂滴数量和沉积、有关代谢的生理生化指标、脂滴形成相关基因的表达、有关脂代谢激素及信号通路影响;结合转录组学,分析潜在的机制。其中第一部分实验内容研究了水体2.0 mg/L镉暴露0-96h,2.5、2.8 mg/L镉暴露96 h以及0、5、25、50、75、100μg/L镉暴露5w和12w对实验鱼肝脏的形态结构、细胞器的影响,以及肝组织脂滴沉积情况,以探讨水体镉暴露对稀有鮈鲫的生长和肝脏组织的损伤情况。第二部分实验克隆了稀有鮈鲫自噬相关基因Beclin1的全长cDNA序列,进行了生物信息学分析,检测了该基因的时空表达模式,并研究了该基因在水体急、慢性镉暴露后的各组织中的表达情况,以初步判断镉暴露与自噬的关系。第三部分实验检测了急、慢性镉暴露后稀有鮈鲫血清生理生化指标以及有关脂滴形成、脂质转运和氧化相关基因的表达,以解释脂滴增多原因。第四部分实验检测了急、慢性水体镉暴露对应激和代谢都有重要调节作用的H-P-I轴的激素含量以及信号通路相关的基因的表达水平,探讨了稀有鮈鲫响应于镉暴露的应激反应。第五部分实验通过转录组分析,研究了水体75μg/L镉暴露5w后稀有鮈鲫差异表达的基因,并检测脂代谢相关基因在其它的急、慢性镉暴露样本的表达情况,结合血清GH家族激素以及血清炎症因子的含量和表达,从而分析镉导致的稀有鮈鲫生长干扰、脂代谢紊乱的潜在机制。主要研究结果:1)0-100μg/L镉暴露5w后稀有鮈鲫的死亡率分别为2.56%,0%,27.91%,37.5%,57.5%,68.18%;75μg/L及以上浓度组稀有鮈鲫肥满度系数显着（P<0.05）降低;25μg/L镉暴露12周后实验鱼体重、空壳重、内脏团重显着（P<0.05）降低。2)水体2.0-2.8 mg/L急性镉暴露都会造成肝脏组织严重的损伤,形态上主要表现为细胞肿胀或皱缩、空泡化;5μg/L慢性镉暴露对稀有鮈鲫肝脏形态上无明显影响,25μg/L及以上浓度组实验鱼肝组织内出现不同大小的空泡结构,100μg/L浓度组细胞受损最严重。50和75μg/l浓度组肝脏严重变形,有多个肿瘤。5-100μg/l慢性镉暴露导致稀有鮈鲫肝细胞内不同程度脂滴沉积,无剂量依赖效应。3)急性镉暴露不同时间,表现出不同病理特征。总体上看,稀有鮈鲫肝细胞表现出糖原减少、细胞器坏死、髓样小体增多、粗面内质网（rer）异常增生或减少、线粒体肿胀、桥粒连接打开、枯否氏细胞增多、细胞坏死、细胞膜损伤、红细胞浸润等现象。急性镉暴露72h-96h,肝细胞内脂滴增多,并首次观察到镉诱导的细胞核脂滴。慢性镉暴露后亚显微水平的变化与急性镉暴露相似:肝细胞肿胀,糖原消失、自噬小体增多,低浓度组rer增生,高浓度组滑面内质网（ser）增生,细胞膜消失或细胞间隙增大,细胞内有脂滴沉积。首次观察到镉诱导的rer同心圆小体和指纹状板层小体。4)稀有鮈鲫的beclin1基因全长cdna序列1940bp,与其它鱼类及高等脊椎动物有高度相似性;该基因编码的由447个氨基酸残基组成的蛋白,含bh3、ccd、ecd结构域,但ccd短于人和啮齿类的长度。水体急性镉暴露后,beclin1基因在鳃、肠显着（p<0.05）升高,脑组织降低;水体慢性镉暴露后,在脑组织显着（p<0.05）上升,但在肝脏显着（p<0.05）降低;beclin1在幼鱼响应于5-100μg/l水体镉暴露的表达变化具有时间和剂量依赖性效应。5)水体2.0mg/l镉暴露后,稀有鮈鲫血清中hdl-c、t-cho、tg、atp含量升高;肝脏hdl-c、t-cho、tg、ldh和乳酸含量升高,cs酶活性降低;慢性镉暴露后,hdl-c、t-cho、tg血清含量呈降低趋势,肝脏内tg显着降低,但100μg/l组实验鱼肝脏t-cho升高。6)与组织学所观察到的肝细胞内的脂滴沉积现象相呼应:负责脂质回肝的hdl-c的主要蛋白成员apoai基因,脂滴形成相关基因plin2、cav2、cpti、cptii,脂质代谢相关基因pparr在急性2.0mg/l镉暴露96h稀有鮈鲫肝脏显着（p<0.05）升高;负责脂质出肝的ldl-c主要蛋白成员apob-100基因却显着（p<0.05）降低。慢性镉暴露5w后,血清中各种脂质成分含量降低,但100μg/l镉浓度组鱼肝脏t-cho含量升高;相关基因仅有cptii基因在100μg/l浓度组实验鱼显着（p<0.05）升高。7)急性镉暴露对稀有鮈鲫血清msh、cortisol含量有显着影响。cortisol合成关键基因star、cyp11a1、cyp11b1表达量显着（p<0.05）升高。cortisol代谢关键基因11β-hsd2在多种组织表达量上升,其在肾脏组织的酶活性含量也升高。cortisol受体gr在鳃、肠、肌肉的表达显着（p<0.05）降低,gr调节基因fkbp5在鳃和肠表达显着（p<0.05）上升。h-p-i轴的crh、acth含量无显着变化,相关基因crh、pomc、crhr、mc2r基因在脑或肾脏的表达不受到镉暴露的显着影响。50μg/l以上浓度镉暴露5w,稀有鮈鲫血清crh、acth、msh、cortisol都显着（p<0.05）升高,100μg/l组实验鱼crh、mc2r、star、cyp11a1、cyp11b1表达量显着（p<0.05）升高,gr表达无显着变化,但fkbp5在鳃和肠显着（p<0.05）升高。8)稀有鮈鲫肝脏中表达量最高的60个基因可分为脂质代谢、消化酶、繁殖、铁或钙离子转运、呼吸链和凝血、先天免疫和应激反应、蛋白合成与降解七类。75μg/l镉暴露后,稀有鮈鲫肝脏组织筛选出288个差异表达基因,其中192个下调。运用rt-qpcr验证了部分基因的表达。9)水体75μg/l镉暴露5w后,从肝脏组织筛选出差异表达基因,其中51个与离子结合相关,27个与锌离子有关,8个分别与铁和钙离子有关;33个与脂质消化吸收和代谢相关,包括SCD,PEPC等;与氧化应激相关的18个;与生长相关的基因11个,包括IGF1。10)镉暴露造成编码GH家族激素基因合成和分泌紊乱;血清炎症因子含量发生显着变化。VtgAO1和SCD基因在慢性镉暴露所有浓度组和急性镉暴露的所有时间点都显着（P<0.05）降低。主要研究结论:1)水体慢性镉暴露导致稀有鮈鲫生长停滞、肥满度系数降低,提示镉暴露后实验鱼能量存储减少,代谢发生紊乱。2)镉对稀有鮈鲫的毒性复杂,具有剂量和暴露时间的特异性;急、慢性镉暴露都可造成肝脏组织严重损伤,凋亡、自噬等调节细胞程序性死亡的生命过程紊乱;内质网的动态变化过程提示其在镉应激反应中具有重要功能。肝细胞功能减退,糖、脂代谢紊乱,伴随有炎症发生。一定浓度慢性镉暴露对稀有鮈鲫具有促进肝细胞增生和异变结构产生的作用。3)稀有鮈鲫Beclin1基因与其它脊椎动物相应基因具有高度同源性,该基因在稀有鮈鲫胚胎、胚后的整个生长发育阶段具有重要的作用,可能参与了水体镉暴露导致肝细胞自噬发生。另外,Beclin1可以作为以稀有鮈鲫幼鱼为对象的水环境镉暴露污染辅助生物指标。4)急性镉暴露后稀有鮈鲫脂代谢的紊乱与脂质的转运紊乱有关,并通过PLIN2、CAV2、PPARr、CPTII介导的代谢通路而调节脂滴形成。慢性镉暴露后稀有鮈鲫各器官的脂肪会被氧化分解,导致肥满度系数、内脏团重等显着降低,但肝脏组织T-CHO的含量升高,说明T-CHO的转运紊乱可能与慢性镉暴露脂滴沉积和脂代谢紊乱有关。5)急性镉暴露主要影响稀有鮈鲫H-P-I轴Cortisol的分泌和合成及其下游的GR的表达;并假设镉介导的Cortisol合成不是通过CRH-ACTH信号通路,而以MSH或其它激素介导的信号实现;然而通过FKBP5介导的GR下调和11β-HSD2的表达升高可以作为负反馈调节有利于缓解Cortisol紊乱带来的毒性。慢性镉暴露会影响H-P-I轴的所有激素的分泌,高浓度也会导致其基因表达和激素合成紊乱,并通过ACTH-MC2R的信号通路控制Cortisol的合成;FKBP5可能通过降低GR的活性而非表达而抑制Cortisol效应。6)稀有鮈鲫的肝脏转录组数据显示了肝脏具有调节消化吸收、免疫、生殖、蛋白合成等功能。镉暴露后,肝脏组织的离子平衡、氧化应激水平、脂肪的消化吸收等过程和功能可能受到干扰;慢性镉暴露对稀有鮈鲫生长的抑制可能与GH-IGF信号通路的抑制有关,而SCD-PEPC等的表达可能参与慢性镉暴露诱导的脂代谢紊乱。7)VtgAO1、SCD等基因可作为检测水体镉暴露的分子指标。
周筱轩,陆伟,钟玲盈,钱爱东,周培[3]（2014）在《ROS对氯化镉诱导的人乳腺癌MCF-7细胞凋亡的影响》文中提出为研究活性氧（ROS）对氯化镉（CdCl2）诱导的人乳腺癌MCF-7细胞凋亡的影响,本文采用荧光探针DHR检测CdCl2诱导的MCF-7细胞内ROS的变化水平;分别采用MTT法和DNA Ladder法检测CdCl2对细胞的毒性作用和细胞DNA的凋亡情况;通过加入自由基清除剂LNAC抑制细胞内的ROS水平,从而研究ROS对细胞凋亡的影响。结果显示,1.00×10-3 mol/L的CdCl2处理MCF-7细胞6h,细胞内ROS水平为对照组的2.04倍,细胞存活率为26.54%,DNA出现片段化分解。用CdCl2+LNAC复合处理MCF-7细胞6h,细胞内ROS水平为对照组的1.25倍,细胞存活率为61.17%,DNA不出现凋亡条带。因此,由CdCl2所导致的MCF-7细胞凋亡和DNA片段化分解,与细胞内ROS水平的升高有关。
于立博[4]（2013）在《新疆鹰嘴豆中金属硫蛋白对铅毒性作用的干预研究》文中研究指明目的：鹰嘴豆是新疆地产药食兼用植物，也是维吾尔族居民喜爱食用的食物同时又是用于防治疾病的药物。木垒县是新疆鹰嘴豆的主产区，由于其得天独厚的原始自然环境，使得当地生产的鹰嘴豆品质优良，属天然绿色食品。为了提升鹰嘴豆的附加值以期对其进行功能性食品开发和药物资源利用，我们对其中的营养素及生物活性物金属硫蛋白进行了提取测定。在此基础上利用鹰嘴豆中提取的金属硫蛋白对铅毒性进行干预研究，从体内和体外观察了其防治铅毒性的效果，以期为铅防治提供一种新的方法。方法：1)采用原子吸收测定法对木垒县当年产鹰嘴豆籽粒中的金属元素进行了检测；采用氨基酸测定仪对鹰嘴豆中的氨基酸和蛋白质进行了检测；用硫酸锌水溶液对鹰嘴豆芽进行水培法孵育诱导豆芽中金属硫蛋白的生成；采用低温高速离心法和镉-血红蛋白包合法对鹰嘴豆籽粒及豆芽中的金属硫蛋白进行分离提取并测定含量。用高效液相色谱法对金属硫蛋白提取液进行初步提纯。对提纯的金属硫蛋白采用聚丙烯酰胺凝胶电泳并结合MALDI-TOF-MS质谱分析法对其氨基酸序列进行分析。2)选择昆明种幼鼠，建立铅中毒模型，用鹰嘴豆-金属硫蛋白进行干预研究，通过HE染色观察肝、肾组织的病理改变，使用透射电镜观察了肾脏组织的超微结构改变，用化学显色法及原子吸收法检测了肝、肾、血清中SOD、GSH-Px、MDA的含量及肝、肾、脑、骨骼组织中铅离子的含量，用酶联免疫法检测了组织中金属硫蛋白含量改变。并通过RT-PCR观察了外源性金属硫蛋白对MT1-EmRNA和MT2AmRNA表达的影响。采用单细胞凝胶电泳法观察了外源性金属硫蛋白对铅所致淋巴细胞DNA损伤的修复作用。3)体外培养淋巴细胞、海马神经元细胞和骨髓间充质细胞，通过预实验所得半数抑制浓度，确定染铅浓度，建立细胞铅中毒模型后给予外源性金属硫蛋白干预，观察鹰嘴豆-金属硫蛋白体外拮抗铅毒性的效果。采用酶联免疫法测定了三种细胞培养液中乳酸脱氢酶含量；采用原子吸收法测定了细胞内钾离子，钙离子和铅离子的含量；采用BCA法测定了细胞中总蛋白含量；采用流式细胞术检测了淋巴细胞、海马神经元细胞和骨髓基质细胞凋亡情况；采用Hoechest33258荧光染色观察了淋巴细胞凋亡情况；采用透射电镜观察了淋巴细胞的超微结构改变；采用荧光免疫方法观察了海马神经元细胞和骨髓基质细胞的Bcl-2和Bax表达情况。结果：1)木垒县产鹰嘴豆中含有17种氨基酸，氨基酸总和达到18.8%，其中人体必需氨基酸全部包含在内。含有人体所需的多种矿物质：钾、铬、钙、铁、锌、铜、镁、铬等，其中钾、镁、钙的含量最高，分别达到了9256.5mg/kg、1289mg/kg和1074.0mg/kg，重金属铅含量未检出，镉含量为5.9ug/kg，总汞含量为2.58ug/kg，总砷含量为4.1ug/kg。鹰嘴豆籽粒中金属硫蛋白含量为：0.16mg/g，鹰嘴豆芽中金属硫蛋白含量为：0.356mg/g。鹰嘴豆-金属硫蛋白的分子量约为10KD。对基质辅助激光解吸-飞行时间质谱（MALDI-TOF-MS）分析结果在NCBI BLAST中进行检索，共检索出有匹配肽段的蛋白96个，根据等电点和分子质量范围筛选出符合条件的蛋白两个gi|330253730和gi|355496648，与这两个蛋白质中匹配上的肽段共有17条。2)动物实验结果显示，染铅后幼鼠的进食量、饮水量及活动量明显减少。HE染色后光镜下观察可见，染铅后小鼠肝、肾组织细胞排列紊乱，组织细胞水肿，给予金属硫蛋白干预后明显好转。透射电镜下观察，可见阳性染铅组小鼠肾小管上皮细胞核固缩，细胞边缘化，细胞内线粒体大量空泡变，微绒毛排列紊乱，内质网及溶酶体增加，线粒体基质膜肿胀，干预组尤其是高剂量干预组细胞损伤状况减轻，细胞内空泡减少，微绒毛排列相对整齐。肝脏、肾脏、血清过氧化指标检测结果显示，阳性对照组的GSH-Px和SOD含量降低，干预后GSH-Px和SOD含量升高，差别有统计学意义（P＜0.05）；阳性对照组的MDA含量上升，各干预组MDA含量降低，其差别有统计学意义（P＜0.05）；与阳性对照组比较，高剂量干预组巯基含量增加，其差别有统计学意义（P＜0.05）；与阳性对照组比较，高、中剂量组的肝脏、肾脏、脑、骨骼、全血组织中铅离子含量降低，其差别有统计学意义（P＜0.05）；与阴性对照组比较，各干预组金属硫蛋白含量升高，其差别具有统计学意义（P＜0.05）；单细胞凝胶电泳结果显示，鹰嘴豆-金属硫蛋白对铅所致淋巴细胞DNA损伤有修复作用，使细胞DNA损伤程度减轻，产生彗星细胞数目减少；RT-PCR结果显示，染铅后阳性组小鼠肝脏MT1-EmRNA和MT2AmRNA表达量增加，给予金属硫蛋白干预后各组MT1-EmRNA和MT2AmRNA表达量降低（P＜0.05）；染铅后阳性组小鼠肾脏MT1-EmRNA和MT2AmRNA表达量增加，给予金属硫蛋白干预后各组MT1-EmRNA和MT2AmRNA表达量降低（P＜0.05）。3)细胞实验结果显示，染铅后淋巴细胞、海马神经元细胞和骨髓基质细胞增殖率降低，给予鹰嘴豆-金属硫蛋白干预后，各组细胞的增值率升高。染铅后阳性组淋巴细胞、海马神经元细胞和骨髓基质细胞中铅离子含量增加，给予外源性金属硫蛋白干预后，高、中剂量组细胞中铅离子含量显着降低，差别有统计学意义（P＜0.05）；24小时、48小时和72小时淋巴细胞、海马神经元细胞和骨髓基质细胞的染铅阳性组细胞中钾离子含量升高，给予外源性金属硫蛋白干预后，高剂量干预组细胞中的钾离子含量降低，差别有统计学差异（P＜0.05）；24小时、48小时和72小时淋巴细胞、海马神经元细胞和骨髓基质细胞的染铅阳性组细胞中钙离子含量升高，给予外源性金属硫蛋白干预后，48小时和72小时高、中剂量组细胞的钙离子含量降低，有统计学差异（P＜0.05）；24小时、48小时和72小时染铅后各组细胞培养液中的乳酸脱氢酶含量显着升高，给予金属硫蛋白干预后高、中剂量组细胞中LDH含量降低（P＜0.05）；Hoechest33258荧光染色结果显示染铅阳性组淋巴细胞凋亡率高于各干预组；透射电镜下观察到淋巴细胞染铅后，出现了凋亡小体，细胞间接触消失，细胞表面绒毛消失，当干预后尤其是高剂量干预组细胞损伤程度减轻，细胞表面绒毛又出现，细胞膜结构完整；染铅后海马神经元细胞和骨髓基质细胞的Bax表达量增加，给予金属硫蛋白干预后Bax表达量下降；染铅阳性组细胞的Bcl-2含量降低，给予外源性金属硫蛋白干预后Bcl-2含量上升。海马神经元细胞和骨髓基质细胞染铅阳性组bcl-2/bax降低，高剂量干预组bcl-2/bax升高（P＜0.05）。流式细胞术结果显示，染铅后海马神经元细胞和骨髓基质细胞凋亡率增加，给予金属硫蛋白干预后，细胞凋亡率降低。结论：新疆木垒县产鹰嘴豆中含有人体必需的氨基酸和矿物质，不含有重金属铅，总汞含量远远低于国家规定的食品容许量（0.02mg/kg），镉含量远远低于日本规定的糙米容许含量（1.0mg/kg）和德国规定的酒中镉容许量（0.1mg/kg），总砷含量远远低于国家规定的原粮容许含量（0.7mg/kg）；采用从鹰嘴豆中提取的金属硫蛋白对染铅幼鼠和染铅细胞进行干预实验，综合评价鹰嘴豆-金属硫蛋白拮抗小鼠铅毒性效果，证明鹰嘴豆-金属硫蛋白无论是在体内状态还是体外状态都能够拮抗铅毒性；通过本次研究，为今后进行鹰嘴豆的保健食品及功能食品开发提供了理论依据，同时为防治儿童铅中毒提供了一种新方法。
杨道丽[5]（2013）在《汞与溴苯腈复合污染对赤子爱胜蚓及球肾白线蚓的生态毒理效应研究》文中进行了进一步梳理多种化合物的复合污染在土壤中十分常见。汞是环境中广泛存在的重金属之一，溴苯腈是最常使用的除草剂之一，因此在污灌区及矿区周围土壤中常同时检测到汞与溴苯腈。目前，二者的复合污染效应研究相对较少。本研究从生物学四个层次探讨了汞与溴苯腈暴露对赤子爱胜蚓的毒性效应，筛选出不同暴露剂量的生物标志物,初步探讨了汞与溴苯腈暴露对蚯蚓生态毒性的效应机制。以我国本土化物种球肾白线蚓作为试验生物，研究了汞与溴苯腈暴露对球肾白线蚓的急性毒性效应，并进行了三种场地土壤的毒性评估.探讨了球肾白线蚓为土壤污染试验生物的可行性，并初步建立了球肾白线蚓为试验生物的毒性评估方法。主要研究结果如下：1.个体水平上，研究了汞与溴苯腈暴露对赤子爱胜蚓和球肾白线蚓的急性毒性。（1）汞与溴苯腈对受试生物有急性毒性；污染物与致死率之间存在着剂量-效应关系和时间-效应关系；汞与溴苯腈复合污染的毒性效应关系既有协同作用又有拮抗作用；死亡率可以作为生物标志物来评估致死剂量范围的土壤生态风险；汞与溴苯腈暴露对赤子爱胜蚓的14天LC50分别为143.67mg/kg和41.75mg/kg，对球肾白线蚓的LC50分别为3.87mg/kg和2.41mg/kg；球肾白线蚓比赤子爱胜蚓敏感，在较低低剂量暴露的环境中，球肾白线蚓适合作为监测环境的受试生物。（2）比较了OECD推荐的参比物氯乙酰胺对两种受试生物的毒性效应，球肾白线蚓对氯乙酰胺急性毒性反应更灵敏。2.组织水平上，研究了汞与溴苯腈暴露对赤子爱胜蚓体内抗氧化物酶系的毒性效应。汞与溴苯腈暴露均能诱导SOD、CAT和GST的活力。汞与溴苯腈暴露对酶活力影响随时间变化的规律不同，CAT酶活力随暴露时间的变化规律相似，CAT可作为汞与溴苯腈毒性评估的生物标记物。3.细胞水平上，优化了体腔细胞提取方法，研究了汞与溴苯腈暴露对赤子爱胜蚓体腔细胞溶酶体膜稳定性以及体腔细胞凋亡率的影响。（1）中性红停留时间（NRRT）随着汞与溴苯腈暴露时间的延长、暴露浓度的增加而下降。汞与溴苯腈复合暴露的交互作用体现为协同作用，溴苯腈是复合污染的主效应因子。NRRT作为生物标志物的检测方法重现性好、准确，能够对汞与溴苯腈引起的环境进行早期监测。（2）体腔细胞的早期凋亡率与体腔细胞质膜损伤密切相关。随着汞与溴苯腈暴露浓度的增加，体腔细胞凋亡率上升。溴苯腈是复合污染的主效应因子。蚯蚓体腔细胞早期凋亡率可作为污染早期预警的生物标志物。（3）溶酶体膜稳定性的降低对应着细胞凋亡率的升高，表明溶酶体-线粒体途径是汞与溴苯腈暴露引起蚯蚓体腔细胞凋亡的机制之一。4.分子水平上，运用单细胞凝胶电泳技术（SCGE）研究了汞与溴苯腈暴露对赤子爱胜蚓体腔细胞DNA损伤的遗传毒性。随着汞与溴苯腈暴露浓度的增加，DNA损伤加剧。溴苯腈是复合污染的主效应因子；OTM比TL更适合作为DNA损伤的生物标志物标志。5.以球肾白线蚓作为受试生物，评估了三个场地土壤的生态毒性效应。结果显示，球肾白线蚓的死亡率随暴露时间的延长而增加，随土壤污染物浓度的增加，死亡率上升。球肾白线蚓的死亡率能作为污染场地的评价指标。试验建立了球肾白线蚓作为受试生物的场地毒性评价方法,为场地土壤的毒性评估和生态修复提供了参考。
高艳丽[6]（2012）在《甘草酸—石墨烯复合材料的制备及其在新型靶向药物运输体系中的应用研究》文中认为本论文基于甘草酸（Glycyrrhizin,L）的肝靶向性,制备了新型复合物甘草酸-氧化石墨烯（GL-GO）,并开展了其在肝靶向运载系统中的应用研究,包括甘草酸的分析测试、负载和释放行为以及电化学行为。本论文工作分为三大部分：一、以巯基乙酸为稳定剂,水相法一步合成了CdSe量子点。以此量子点为荧光探针,基于甘草酸对量子点的荧光增强效应,建立了一种简便、快速、灵敏测定甘草酸的分析方法。同时考察了多种因素对甘草酸测定的影响,并对甘草酸与CdSe量子点的反应机理进行了初步探讨。将该方法用于实际样品中甘草酸的测定,与标准药典方法相比,结果满意。二、采用改进的Hummers法制备了氧化石墨烯（Graphene oxide, GO）,将制得的GO在没有添加任何有机溶剂和表面活性剂的环境下和GL复合,得到了更适合应用于药物方面的肝靶向载体GL-GO,并对氧化石墨烯对甘草酸的高效负载及释放行为进行了研究。实验表明,氧化石墨烯对甘草酸的负载量可高达5.19mg/mg,且甘草酸的释放有很强的pH依赖性。此外,对甘草酸和氧化石墨烯之间的相互作用进行了光谱学研究。三、在将GO化学还原的过程中加入甘草酸,得到GL插层修饰的石墨烯（GL-G）,研究了其光学和电学的性能。将得到的GL-G用作玻碳电极的修饰材料,研究了GL-G修饰电极对对硝基苯酚的电化学行为。
王如平,解凯彬,徐楠,徐勤松,施国新[7]（2009）在《Cd2+胁迫下浮萍叶细胞核超微结构、nDNA损伤及抗氧化酶系的变化》文中研究表明以不同浓度Cd2+处理6d的浮萍为材料,从细胞核超微结构损伤、nDNA一级结构变化及抗氧化酶系活性改变等方面分析重金属的植物毒理学效应。透射电镜观察发现,5～7mg/L Cd2+处理的细胞核膜完整,染色质凝聚并趋边化;10mg/L Cd2+处理后则核仁解体,且DNA原位末端标记（TUNEL）检测发现DNA的3′-OH断端可被特异标记,表现出典型的凋亡细胞特征。而20mg/L Cd2+已导致细胞坏死。同时,较低浓度的Cd2+胁迫可刺激抗氧化酶（SOD,POD,CAT）活性升高,以清除体内活性氧,而随金属浓度的进一步增高,三种抗氧化酶活性都急速下降。研究发现,活性氧和抗氧化酶系密切参与了重金属Cd2+诱导的浮萍体细胞凋亡过程。
唐正义,王芳,谢玉华[8]（2009）在《二氯化汞对泥鳅红细胞凋亡的影响》文中研究指明用不同浓度的HgCl2饲喂泥鳅20d,观察血红细胞的凋亡情况.结果表明:汞能诱导泥鳅红细胞的凋亡,凋亡率随Hg+剂量增大而增加,在第7天凋亡率从7%增至61.2%,光镜下实验浓度为0.8,1.0,1.2mg/L组均观察到红细胞凋亡的典型形态变化.结论:汞能诱导泥鳅红细胞凋亡.
王宇飞[9]（2007）在《二苯甲酮对斑点叉尾鮰鱼卵巢细胞生长的影响》文中研究指明二苯甲酮（Benzophenone）作为一种紫外线吸收剂,广泛应用于化工、医药、建材等行业已有三十多年的历史,本文研究二苯甲酮对叉尾鮰鱼卵巢细胞的毒性。实验首先利用斑点叉尾鮰鱼卵巢细胞（CCO）、鲤鱼上皮癌细胞（EPC）、草鱼肾细胞（CIK）探讨经改良后的四噻唑蓝（MTT）比色法在测定污染物对鱼类细胞急性毒性实验中的最佳条件及其使用的普遍性。而后在上述条件下,通过直接、间接两种染毒条件来探讨二苯甲酮（benzophenone）对斑点叉尾鮰鱼卵巢细胞（CCO）生长的影响,结果得到:1、MTT比色法应用于鱼类细胞时,甲瓒溶解液可以选取14%的SDS-DMF（pH=4.7）酸性溶液,并且采用保留培养液直接投加溶解液的办法溶解甲瓒,经讨论这种方法在鱼类体外培养的细胞系的毒性试验中具有一定的普遍性。其最佳实验条件为570nm波长下,MTT作用4小时,MTT终浓度1mg/ml,最佳接种量的确定因每种细胞的特性而不同,生长速度快的细胞接种量较少。2、当二苯甲酮以1μg/mL10μg/mL的浓度直接作用于CCO细胞时,CCO细胞生长在不同阶段均受到抑制作用:在指数增长期细胞生长速率减小,稳定期的存活量约为正常条件下的72—91%,并且随着二苯甲酮浓度的增大,对CCO生长的抑制效应也相应的加剧。3、当1μg/mL浓度的二苯甲酮在经过斑点叉尾鮰鱼原代肝细胞代谢后间接作用于CCO细胞时,其代谢产物对CCO的生长在各阶段又呈现明显的促进作用,稳定期细胞数量约为正常条件下的109%。
白秀娟,卢伙胜,廖春风[10]（2007）在《文昌鱼对几种环境因子及污染物的耐受极限初步研究》文中进行了进一步梳理文昌鱼（Branchiostoma belcheri）隶属脊索动物门头索动物亚门,是全世界现存动物中与脊椎动物关系最近的一类非脊椎动物[1],被称为生物进化的“活化石”。它营养丰富,干品蛋白质含量约达70%左右,还含有较高的磷和碘,脂肪含量低,具有较高的
二、镉离子诱导BA/F3β细胞发生奇特的细胞凋亡（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、镉离子诱导BA/F3β细胞发生奇特的细胞凋亡（论文提纲范文）
（1）氯化汞的急性腹腔毒性作用（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 中英文缩写 |
| 第一章 前言 |
| 第二章 实验材料 |
| 2.1 实验动物 |
| 2.2 实验试剂 |
| 第三章 实验方法 |
| 3.1 氯化汞溶液的配置 |
| 3.2 小鼠半数致死量的测定 |
| 3.3 小鼠腹腔染毒和分组 |
| 3.4 血清和腹腔冲洗液的制备 |
| 3.5 肝、肾、脾脏器重量的测定 |
| 3.6 BUN(尿素氮)的测定 |
| 3.7 GOT(谷草转氨酶)的测定 |
| 3.8 IgE(免疫球蛋白E)的测定 |
| 3.9 腹腔内免疫细胞数目的测定 |
| 3.10 细胞染色 |
| 3.11 腹腔免疫细胞凋亡率的测定 |
| 3.12 统计分析 |
| 第四章 实验结果 |
| 4.1 小鼠的氯化汞LD50值 |
| 4.2 氯化汞对小鼠体重的影响 |
| 4.3 氯化汞对肝、肾、脾重量的影响 |
| 4.4 氯化汞对肝功和肾功的影响 |
| 4.5 氯化汞对腹腔内免疫细胞数目的影响 |
| 4.6 氯化汞对腹腔内免疫细胞凋亡率的影响 |
| 4.7 氯化汞对腹腔内T细胞和B细胞构成比的影响 |
| 4.8 氯化汞对血清中IgE的影响 |
| 第五章 讨论 |
| 第六章 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（2）水体镉暴露对稀有鮈鲫肝脏毒性及脂代谢影响的初步研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第1章 文献综述 |
| 1.1 水体镉污染对鱼类毒性研究进展 |
| 1.1.1 镉在鱼组织中生物累积情况及半致死毒性效应 |
| 1.1.2 镉的环境内分泌干扰属性 |
| 1.1.3 镉对鱼类肝、肾、鳃等器官的损害 |
| 1.1.4 镉对鱼类血液和生理生化指标的影响 |
| 1.1.5 镉暴露对鱼类代谢的影响 |
| 1.1.6 镉对鱼类的生物毒性机制 |
| 1.1.7 镉生物毒性的保护剂 |
| 1.2 脂质代谢研究进展 |
| 1.2.1 脂滴的形成、生长和降解 |
| 1.2.2 脂滴的功能 |
| 1.2.3 相关因子对脂滴形成的影响 |
| 1.2.4 脂滴紊乱与相关疾病 |
| 1.2.5 细胞核脂滴 |
| 1.3 研究目标及意义 |
| 第2章 水体镉暴露对稀有鮈鲫肝脏结构的影响 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.1.1 实验鱼的来源与驯养 |
| 2.1.2 水体镉暴露 |
| 2.1.3 组织结构材料处理 |
| 2.1.4 超微结构材料处理 |
| 2.1.5 生长指标测量及油红O染色 |
| 2.2 结果 |
| 2.2.1 慢性镉处理后雌性稀有鮈鲫的生长 |
| 2.2.2 未经镉暴露雌性稀有鮈鲫肝脏组织学结构 |
| 2.2.3 水体急性镉暴露后雌性稀有鮈鲫肝脏组织学结构 |
| 2.2.4 水体 0-100 μg/L镉暴露 5w雌性稀有鮈鲫肝脏组织学结构 |
| 2.2.5 水体 5-50 μg/L镉暴露 12w雌性稀有鮈鲫肝脏组织学结构 |
| 2.2.6 未经镉暴露雌性稀有鮈鲫肝脏超微结构 |
| 2.2.7 水体急性镉暴露后雌性稀有鮈鲫肝脏超微结构 |
| 2.2.8 水体 5-100 μg/L镉暴露 5w后雌性稀有鮈鲫肝脏超微结构 |
| 2.2.9 水体 5-75 μg/L镉暴露 12w后雌性稀有鮈鲫肝脏超微结构 |
| 2.2.10 水体 0-100 μg/L镉暴露 5w或 12w雌性稀有鮈鲫肝脏脂滴沉积 |
| 2.3 讨论 |
| 2.3.1 水体镉暴露对鱼类生长影响 |
| 2.3.2 稀有鮈鲫肝脏的显微与超微结构特点 |
| 2.3.3 镉暴露对稀有鮈鲫肝脏形态结构以及肝细胞的毒理影响 |
| 小结 |
| 第3章 稀有鮈鲫Beclin1基因分子克隆及水体镉暴露对其表达的影响 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.1.1 实验鱼的来源与驯养 |
| 3.1.2 水体镉暴露及取材 |
| 3.1.3 总RNA提取和cDNA合成 |
| 3.1.4 稀有鮈鲫Beclin1基因（rmBeclin1）的分子克隆 |
| 3.1.5 稀有鮈鲫Beclin1基因序列分析 |
| 3.1.6 稀有鮈鲫Beclin1基因的时空表达模式 |
| 3.1.7 实时荧光定量PCR（RT-qPCR） |
| 3.1.8 数据分析 |
| 3.2 结果 |
| 3.2.1 稀有鮈鲫rmBeclin1基因cDNA序列和氨基酸序列 |
| 3.2.2 序列和进化树分析 |
| 3.2.3 rmBeclin1基因的时空表达 |
| 3.2.4 水体镉暴露后rmBeclin1基因的表达 |
| 3.3 讨论 |
| 3.3.1 rmBeclin1基因的序列结构特点 |
| 3.3.2 rmBeclin1基因的时空表达特点 |
| 3.3.3 水体镉暴露对稀有鮈鲫rmBeclin1基因表达的影响 |
| 小结 |
| 第4章 水体镉暴露对稀有鮈鲫代谢相关生理指标及脂滴形成相关基因表达的影响 |
| 4.1 材料与方法 |
| 4.1.1 实验鱼饲养 |
| 4.1.2 水体镉暴露 |
| 4.1.3 静止代谢率 |
| 4.1.4 组织蛋白提取 |
| 4.1.5 血清分离 |
| 4.1.6 生理指标检测 |
| 4.1.7 总RNA提取与逆转录 |
| 4.1.8 实时荧光定量PCR（RT-qPCR） |
| 4.1.9 SDS-PAGE电泳和Western blot |
| 4.1.10 数据分析 |
| 4.2 结果 |
| 4.2.1 急性镉暴露对血清和肝脏代谢指标的影响 |
| 4.2.2 水体镉暴露 5w对血清和肝脏代谢指标的影响 |
| 4.2.3 水体急性镉暴露后稀有鮈鲫脂滴形成与脂代谢相关基因的转录情况 |
| 4.2.4 水体镉暴露 5w后稀有鮈鲫脂滴形成与脂代谢相关基因的转录情况 |
| 4.3 讨论 |
| 4.3.1 水体镉暴露对稀有鮈鲫肝脏代谢功能的影响 |
| 4.3.2 水体镉暴露对鱼类脂肪代谢及脂滴形成的影响 |
| 小结 |
| 第5章 水体镉暴露对稀有鮈鲫H-P-I轴及下游信号的影响 |
| 5.1 材料与方法 |
| 5.1.1 实验鱼饲养和水体镉暴露处理、取材 |
| 5.1.2 组织总RNA提取及逆转录 |
| 5.1.3 RT-qPCR检测镉暴露后相关基因的表达 |
| 5.1.4 酶联免疫吸附（ELISA） |
| 5.1.5 SDS-PAGE电泳和Western blot |
| 5.1.6 数据处理和统计分析 |
| 5.2 结果 |
| 5.2.1 水体急性镉暴露 |
| 5.2.2 水体慢性镉暴露 |
| 5.3 讨论 |
| 5.3.1 水体急性镉暴露对雌性稀有鮈鲫H-P-I轴激素及信号通路的影响 |
| 5.3.2 水体慢性镉暴露后对稀有鮈鲫H-P-I轴激素及其信号通路的影响 |
| 小结 |
| 第6章 水体镉暴露诱导的稀有鮈鲫肝脏毒性及脂代谢紊乱潜在分子机制研究 |
| 6.1 材料与方法 |
| 6.1.1 实验鱼饲养、水体镉暴露以及取材 |
| 6.1.2 实验鱼肝脏总RNA提取、建库以及RNA测序 |
| 6.1.3 转录组数据分析、组装和注释 |
| 6.1.4 基因表达的定量以及差异表达基因分析 |
| 6.1.5 实时荧光定量PCR（RT-qPCR） |
| 6.1.6 ELISA检测 |
| 6.1.7 数据处理和统计分析 |
| 6.2 结果 |
| 6.2.1 转录组测序、组装和注释 |
| 6.2.2 水体 75 μg/L镉暴露 5w后雌性稀有鮈鲫肝脏差异表达基因 |
| 6.2.3 实时荧光定量PCR验证差异表达基因 |
| 6.2.4 差异表达基因在急性以及其它浓度慢性镉暴露处理组的表达 |
| 6.2.5 急、慢性镉暴露对稀有鮈鲫生长激素家族激素的影响 |
| 6.2.6 急、慢性镉暴露对稀有鮈鲫机体炎症水平的影响 |
| 6.3 讨论 |
| 6.3.1 稀有鮈鲫肝脏转录组 |
| 6.3.2 水体镉暴露对稀有鮈鲫生长的干扰 |
| 6.3.3 水体镉暴露与肝细胞离子平衡及氧化应激 |
| 6.3.4 水体镉暴露与炎症 |
| 6.3.5 水体镉暴露与脂代谢紊乱 |
| 6.3.6 肝脏组织筛选出的用于镉污染检测的生物标记 |
| 小结 |
| 结论与展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 发表文章目录 |
（3）ROS对氯化镉诱导的人乳腺癌MCF-7细胞凋亡的影响（论文提纲范文）
| 1材料与方法 |
| 1.1材料和仪器 |
| 1.2细胞培养 |
| 1.3不同浓度CdCl２诱导的MCF-7细胞存活率的测定 |
| 1.4 CdCl２诱导的MCF-7细胞内ROS水平的检测 |
| 1.5 CdCl２诱导的MCF-7细胞DNA片段化损伤的检测 |
| 1.6 CdCl２诱导的MCF-7细胞存活率的测定 |
| 1.7数据分析 |
| 2结果与分析 |
| 2.1不同浓度CdCl２对MCF-7细胞存活率的影响 |
| 2.2 CdCl２诱导的MCF-7细胞中ROS变化 |
| 2.3 ROS对CdCl２诱导的MCF-7细胞凋亡的影响 |
| 3讨论 |
| 4结论 |
（4）新疆鹰嘴豆中金属硫蛋白对铅毒性作用的干预研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 第一部分 新疆木垒县产鹰嘴豆中营养素及金属硫蛋白提取测定 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.2 实验方法 |
| 1.3 质量控制 |
| 1.4 结果分析 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 第二部分 鹰嘴豆-金属硫蛋白对铅毒性作用的体内干预研究 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 仪器与试剂 |
| 1.2 实验方法 |
| 1.3 质量控制 |
| 1.4 统计分析 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 第三部分 鹰嘴豆-金属硫蛋白对铅毒性作用的体外干预研究 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 仪器与试剂 |
| 1.2 实验方法 |
| 1.3 质量控制 |
| 1.4 统计分析 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 全文总结 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 攻读博士学位期间获得的学术成果 |
| 个人简历 |
| 导师评阅表 |
（5）汞与溴苯腈复合污染对赤子爱胜蚓及球肾白线蚓的生态毒理效应研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 文献综述 |
| 1.1 重金属对土壤环境的生态风险 |
| 1.1.1 重金属及其对土壤质量的影响 |
| 1.1.2 重金属污染对土壤生物的影响 |
| 1.2 农药对土壤环境的生态风险 |
| 1.2.1 农药及其对土壤质量的影响 |
| 1.2.2 除草剂对土壤生物的影响 |
| 1.3 复合污染 |
| 1.3.1 复合污染 |
| 1.3.2 复合污染研究对象及方法 |
| 1.3.3 土壤复合污染研究现状 |
| 1.3.4 土壤复合污染机理研究 |
| 1.4 土壤中汞与溴苯腈 |
| 1.5 土壤生态的指示生物 |
| 1.5.1 指示生物（bioindicator） |
| 1.5.2 蚯蚓作为土壤生态的指示生物 |
| 1.5.3 线蚓科生物在毒理学试验中的运用 |
| 1.6 生物标志物（Biomarker） |
| 1.6.1 生物标志物 |
| 1.6.2 生物标志物的分类 |
| 1.6.3 蚯蚓生态毒理学研究中的生物标志物 |
| 1.7 本论文的研究意义、研究内容和技术路线 |
| 1.7.1 研究意义 |
| 1.7.2 研究内容 |
| 1.7.3 技术路线 |
| 第二章 汞与溴苯腈暴露对赤子爱胜蚓和球肾白线蚓的急性毒性 |
| 2.1. 试验材料 |
| 2.1.1 供试动物 |
| 2.1.2 药品与试剂 |
| 2.1.3 主要仪器 |
| 2.2. 试验方法 |
| 2.2.1 蚯蚓清肠 |
| 2.2.2 受试蚓敏感性试验 |
| 2.2.3 人工土壤试验 |
| 2.2.4 实验结果统计 |
| 2.3. 结果与分析 |
| 2.3.1 人工土壤试验的平均含水率 |
| 2.3.2 赤子爱胜蚓敏感性 |
| 2.3.3 氯乙酰胺暴露对两种受试生物的急性毒性效应 |
| 2.3.4 汞暴露对两种受试生物的急性毒性效应 |
| 2.3.5 溴苯腈暴露对两种受试生物的急性毒性效应 |
| 2.3.6 汞与溴苯腈复合污染对两种受试生物的急性毒性效应 |
| 2.4. 本章小结 |
| 第三章 汞与溴苯腈暴露对赤子爱胜蚓体内抗氧化酶系的影响 |
| 3.1 试验材料 |
| 3.1.1 供试动物 |
| 3.1.2 药品与试剂 |
| 3.1.3 主要仪器 |
| 3.2 试验方法 |
| 3.2.1 样品蛋白质含量的测定 |
| 3.2.2 赤子爱胜蚓组织匀浆缓冲液的制备 |
| 3.2.3 人工土壤实验 |
| 3.2.4 蚯蚓生物参数的测定 |
| 3.2.5 数据处理 |
| 3.3 试验结果 |
| 3.3.1 蛋白质测定的标准曲线 |
| 3.3.2 汞与溴苯腈单一暴露对赤子爱胜蚓体内抗氧化酶活性的影响 |
| 3.3.3 汞与溴苯腈复合污染对赤子爱胜蚓体内抗氧化酶活性的影响 |
| 3.4 本章小结 |
| 第四章 汞与溴苯腈暴露对赤子爱胜蚓体腔细胞的影响 |
| 4.1 试验材料 |
| 4.1.1 供试动物 |
| 4.1.2 药品与试剂 |
| 4.1.3 主要仪器 |
| 4.2 试验方法 |
| 4.2.1 主要溶液配制 |
| 4.2.2 蚯蚓体腔细胞提取方法筛选 |
| 4.2.3 人工土壤试验 |
| 4.2.4 实验结果统计 |
| 4.3 结果与分析 |
| 4.3.1 蚯蚓体腔细胞的提取方法筛选 |
| 4.3.2 汞与溴苯腈对蚯蚓体腔细胞溶酶体膜稳定性的影响 |
| 4.3.3 汞与溴苯腈对蚯蚓体腔细胞凋亡的影响 |
| 4.3.4 讨论 |
| 4.4 本章小结 |
| 第五章 汞与溴苯腈复合污染对赤子爱胜蚓的遗传毒性 |
| 5.1 试验材料 |
| 5.1.1 供试蚯蚓 |
| 5.1.2 药品 |
| 5.1.3 主要仪器 |
| 5.2 试验方法 |
| 5.2.1 蚯蚓清肠 |
| 5.2.2 蚯蚓体腔细胞 DNA 损伤的检测 |
| 5.2.3 人工土壤试验 |
| 5.2.4 试验结果统计 |
| 5.3 结果与分析 |
| 5.3.1 蚯蚓体腔细胞 DNA 受损形态 |
| 5.3.2 汞与溴苯腈复合污染对蚯蚓体腔细胞 DNA 的损伤影响 |
| 5.4 讨论 |
| 5.5 本章小结 |
| 第六章 以球肾白线蚓为受试生物的污染场地毒性评估研究 |
| 6.1 试验材料 |
| 6.1.1 供试动物 |
| 6.1.2 供试土壤的采集 |
| 6.1.3 主要仪器 |
| 6.2 试验方法 |
| 6.2.1 土壤中污染物的化学分析 |
| 6.2.2 污染土壤对球肾白线蚓的急性毒性试验 |
| 6.2.3 实验结果与统计 |
| 6.3 结果与分析 |
| 6.3.1 土壤的理化性质及主要污染物 |
| 6.3.2 场地土壤对球肾白线蚓的急性毒性效应 |
| 6.4 讨论 |
| 6.4.1 污染物种类和含量对蚯蚓的毒性影响 |
| 6.4.2 土壤性质对污染物暴露的毒性影响 |
| 6.4.3 污染场地毒性风险评估的方法和体系构建 |
| 6.5 本章小结 |
| 第七章 总结及展望 |
| 7.1 研究结论 |
| 7.2 创新点 |
| 7.3 展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读博士学位期间发表论文及参与课题 |
（6）甘草酸—石墨烯复合材料的制备及其在新型靶向药物运输体系中的应用研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第1章 引言 |
| 1.1 甘草酸 |
| 1.1.1 甘草 |
| 1.1.2 甘草中的化学成分 |
| 1.1.3 甘草酸的药理作用 |
| 1.2 肝靶向药物运载系统 |
| 1.2.1 被动靶向制剂 |
| 1.2.2 主动靶向制剂 |
| 1.3 基于甘草酸类的肝靶向抗癌药物 |
| 1.4 石墨烯 |
| 1.4.1 电化学应用 |
| 1.4.2 药物载体应用 |
| 1.5 本文研究的意义,主要内容和创新点 |
| 第2章 CdSe量子点荧光增敏法测定甘草酸 |
| 2.1 前言 |
| 2.2 实验部分 |
| 2.2.1 主要仪器 |
| 2.2.2 主要试剂 |
| 2.2.3 CdSe量子点的制备 |
| 2.2.4 甘草酸的测定 |
| 2.2.5 样品中GL的测定 |
| 2.3 结果与讨论 |
| 2.3.1 CdSe量子点的表征 |
| 2.3.2 CdSe量子点与甘草酸的相互作用 |
| 2.3.3 反应介质和pH值的影响 |
| 2.3.4 反应时间的影响 |
| 2.3.5 CdSe量子点浓度的影响 |
| 2.3.6 方法的标准曲线 |
| 2.3.7 共存离子的干扰 |
| 2.3.8 实际样品的分析 |
| 2.4 结论 |
| 第3章 肝靶向甘草酸-氧化石墨烯的制备及表征 |
| 3.1 前言 |
| 3.2 实验部分 |
| 3.2.1 仪器与试剂 |
| 3.2.2 氧化石墨烯的制备 |
| 3.2.3 甘草酸-氧化石墨烯(GL-GO)的制备 |
| 3.2.4 甘草酸负载量的检测 |
| 3.2.5 甘草酸的释放 |
| 3.3 结果与讨论 |
| 3.3.1 GL-GO的表征 |
| 3.3.2 GL-GO的光电性能表征 |
| 3.3.3 甘草酸的负载 |
| 3.3.4 甘草酸的释放 |
| 3.4 结论 |
| 第4章 石墨烯-甘草酸修饰电极的制备及其电化学行为的研究 |
| 4.1 前言 |
| 4.2 实验部分 |
| 4.2.1 仪器和试剂 |
| 4.2.2 甘草酸功能化石墨烯(GL-G)的制备 |
| 4.2.3 甘草酸-石墨烯修饰电极(GL-G/GCE)的制备 |
| 4.2.4 实验方法 |
| 4.3 结果与讨论 |
| 4.3.1 石墨烯的电镜表征 |
| 4.3.2 甘草酸-石墨烯的光电性能表征 |
| 4.3.3 甘草酸-石墨烯电化学行为研究 |
| 4.3.4 对硝基苯酚在GL-G/GCE上的电化学行为 |
| 4.4 结论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间研究成果 |
| 主要符号对照表 |
| 致谢 |
（7）Cd2+胁迫下浮萍叶细胞核超微结构、nDNA损伤及抗氧化酶系的变化（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料培养与处理 |
| 1.2 电子显微镜观察 |
| 1.3 TUNEL检测 |
| 1.4 抗氧化酶系的提取和测定 |
| 2 实验结果 |
| 2.1 细胞核的损伤 |
| 2.2 细胞核DNA断裂程度的TUNEL检测 |
| 2.3 抗氧化酶系统活性的变化 |
| 3 讨论 |
（8）二氯化汞对泥鳅红细胞凋亡的影响（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验鱼 |
| 1. 2 实验试剂 |
| 1. 3 实验方法 |
| 1.3.1 染毒液的配置 |
| 1.3.2 染毒实验 |
| 1.3.3 制备血涂片 |
| 1.3.4 镜检、计数和测定 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 泥鳅对汞染毒液的反应特征 |
| 2.2 汞诱发泥鳅红细胞凋亡的浓度效应 |
| 2.3 汞诱发泥鳅红细胞凋亡的时间效应 |
| 3 讨论 |
（9）二苯甲酮对斑点叉尾鮰鱼卵巢细胞生长的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 1 绪言 |
| 1.1 二苯甲酮的理化特性及其合成途径 |
| 1.2 二苯甲酮在工农业生产中的用途及存在方式[2] |
| 1.2.1 辐射固化涂料 |
| 1.2.2 化妆品 |
| 1.2.3 塑料 |
| 1.2.4 其他 |
| 1.3 有关二苯甲酮毒性的国内外研究现状 |
| 1.4 本课题的内容和意义 |
| 2 细胞毒理学研究进展 |
| 2.1 细胞毒理学定义 |
| 2.2 细胞毒理学的主要研究内容 |
| 2.3 细胞毒理学的基本实验方法 |
| 2.3.1 细胞毒性的检测方法 |
| 2.3.2 细胞遗传毒性的检测方法 |
| 2.3.3 细胞短周期转化试验 |
| 2.3.4 细胞免疫功能的检测方法 |
| 2.4 水生生物细胞毒理学的研究进展 |
| 2.4.1 常用实验方法 |
| 2.4.2 用鱼类细胞培养检测水污染物毒性的优缺点 |
| 3 细胞培养 |
| 3.1 鱼类细胞培养概述 |
| 3.2 细胞培养的实验准备 |
| 3.2.1 培养用品的清洗 |
| 3.2.2 培养用品的灭菌 |
| 3.3 细胞培养的材料和方法 |
| 3.3.1 实验仪器 |
| 3.3.2 试剂及配置方法 |
| 3.3.3 细胞的培养条件 |
| 3.3.4 细胞的传代 |
| 3.3.5 细胞的冻存与复苏 |
| 3.3.5.1 细胞冻存 |
| 3.3.5.2 细胞复苏 |
| 3.4 细胞培养中细胞生长情况的观察 |
| 3.4.1 培养液的变化 |
| 3.4.2 细胞的生长状况 |
| 3.4.3 细胞的形态变化 |
| 3.5 小结 |
| 4 MTT 法的改良及应用 |
| 4.1 MTT 法概述 |
| 4.2 MTT 法的改良 |
| 4.2.1 选择不同溶解剂对测定结果的影响 |
| 4.2.2 加入溶解剂的方法对测定结果的影响 |
| 4.3 改良MTT 法的最佳实验条件的确定 |
| 4.3.1 实验材料及仪器 |
| 4.3.2 实验方法 |
| 4.3.3 实验结果 |
| 4.3.3.1 吸收波长的选取 |
| 4.3.3.2 加 MTT 后反应时间的确定 |
| 4.3.3.3 MTT 终浓度的确定 |
| 4.3.3.4 接种数量的确定 |
| 4.3.4 讨论 |
| 4.3.4.1 细胞特性对最佳接种量的影响 |
| 4.3.4.2 MTT 反应时间过长的负面效应 |
| 4.3.4.3 高浓度MTT 对活细胞具有致死效应 |
| 4.4 改良MTT 法在鱼类细胞体外毒性实验中普遍性的探讨 |
| 4.5 小结 |
| 5 二苯甲酮对CCO 细胞生长的影响 |
| 5.1 实验材料及仪器 |
| 5.2 实验方法 |
| 5.2.1 预备试验 |
| 5.2.2 二苯甲酮染毒浓度范围的选取 |
| 5.2.3 正常条件细胞生长情况的测定 |
| 5.2.4 直接染毒条件下细胞生长情况的测定 |
| 5.2.5 间接染毒条件下细胞生长情况的测定 |
| 5.3 实验结果 |
| 5.3.1 吸光度-细胞数（A-n）标准曲线 |
| 5.3.2 各条件下细胞指数生长期的生长速率 |
| 5.3.3 各生长条件下生长稳定期的细胞数量 |
| 5.4 讨论 |
| 5.4.1 不同浓度的二苯甲酮直接作用时对CCO 影响的比较 |
| 5.4.2 二苯甲酮对CCO 生长的影响机理 |
| 5.4.3 二苯甲酮对斑点叉尾鮰鱼个体的潜在影响 |
| 5.5 小结 |
| 6 结论 |
| 7 展望 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附录：攻读硕士学位期间发表的论文和参与的项目 |
（10）文昌鱼对几种环境因子及污染物的耐受极限初步研究（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料来源 |
| 1.2 方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 对3种重金属离子的耐受性 |
| 2.2 对NO2-N的耐受性 |
| 2.3 对盐度耐受性 |
| 3 讨论 |
| 3.1 三种重金属对文昌鱼的影响 |
| 3.2 NO2-N对文昌鱼的影响 |
| 3.3 盐度对文昌鱼的影响 |
四、镉离子诱导BA/F3β细胞发生奇特的细胞凋亡（论文参考文献）
- [1]氯化汞的急性腹腔毒性作用[D]. 李俊杰. 延边大学, 2018(01)
- [2]水体镉暴露对稀有鮈鲫肝脏毒性及脂代谢影响的初步研究[D]. 刘小红. 西南大学, 2016(01)
- [3]ROS对氯化镉诱导的人乳腺癌MCF-7细胞凋亡的影响[J]. 周筱轩,陆伟,钟玲盈,钱爱东,周培. 上海交通大学学报(农业科学版), 2014(01)
- [4]新疆鹰嘴豆中金属硫蛋白对铅毒性作用的干预研究[D]. 于立博. 新疆医科大学, 2013(01)
- [5]汞与溴苯腈复合污染对赤子爱胜蚓及球肾白线蚓的生态毒理效应研究[D]. 杨道丽. 上海交通大学, 2013(07)
- [6]甘草酸—石墨烯复合材料的制备及其在新型靶向药物运输体系中的应用研究[D]. 高艳丽. 青岛大学, 2012(09)
- [7]Cd2+胁迫下浮萍叶细胞核超微结构、nDNA损伤及抗氧化酶系的变化[J]. 王如平,解凯彬,徐楠,徐勤松,施国新. 广西植物, 2009(04)
- [8]二氯化汞对泥鳅红细胞凋亡的影响[J]. 唐正义,王芳,谢玉华. 内江师范学院学报, 2009(04)
- [9]二苯甲酮对斑点叉尾鮰鱼卵巢细胞生长的影响[D]. 王宇飞. 华中科技大学, 2007(05)
- [10]文昌鱼对几种环境因子及污染物的耐受极限初步研究[J]. 白秀娟,卢伙胜,廖春风. 广东海洋大学学报, 2007(01)