一、家用微波ELISA检测日本血吸虫抗体的研究（论文文献综述）
李莉[1]（2019）在《日本血吸虫多肽SJMHE1对小鼠哮喘模型的作用与机制研究》文中提出第一部分日本血吸虫多肽SJMHE1对小鼠哮喘模型的作用研究[目的]观察日本血吸虫多肽SJMHE1对哮喘小鼠气道炎症的作用。[方法]择6～8周健康雄性BALB/C小鼠,随机分为4组:PBS组、卵清蛋白（OVA）组、OVA/PBS组,OVA/SJMHEI组。OVA致敏构建支气管哮喘模型,HE染色观察小鼠肺组织病理形态学变化,BALF计数细胞总数及嗜酸性粒细胞数,ELISA测定小鼠血清中OVA特异性IgE水平。[结果]与PBS组比较,OVA、OVA/PBS组肺组织炎性细胞的浸润增加,BALF中细胞总数及嗜酸性粒细胞数增加,血清OVA特异性IgE增多;与OVA、OVA/PBS组比较,OVA/SJMHE1组肺组织炎症细胞的浸润减少,BALF中细胞总数及嗜酸性粒细胞数减少,血清OVA特异性IgE无明显变化。[结论]日本血吸虫多肽SJMHE1可抑制哮喘小鼠气道炎症。第二部分日本血吸虫多肽SJMHE1对哮喘小鼠模型Th1/Th2/Th17/Treg调节的影响[目的]观察日本血吸虫多肽SJMHE1对哮喘小鼠模型Th1/Th2/Th17/Treg调节的影响[方法]择6～8周健康雄性BALB/C小鼠,随机分为4组:PBS组、卵清蛋白（OVA）组、OVA/PBS组,OVA/SJMHE1组。OVA致敏构建支气管哮喘模型,用qPCR（荧光定量PCR）的方法检测脾细胞和肺组织中促炎细胞因子和抗炎细胞因子变化,流式细胞术检测脾细胞中Th1、Th2、Th17、Treg细胞比例,免疫组织化学法检测肺组织中Foxp3蛋白表达水平,免疫印迹（Western b1ot）的方法测定肺组织中GATA3和RORγt蛋白表达水平。[结果]日本血吸虫多肽SJMHE1可调节哮喘小鼠脾细胞和肺组织中促炎和抗炎细胞因子的产生,降低哮喘小鼠脾细胞中Th2的百分率,增加小鼠脾细胞中Th1和Treg细胞的比例,同时增加小鼠脾细胞和肺组织中Foxp3表达量,降低小鼠肺组织中GATA3和RORγt的含量。[结论]日本血吸虫多肽SJMHE1抑制哮喘小鼠气道炎症的免疫机制可能是通过下调Th2和Th17反应并上调Th1和Treg反应。第三部分日本血吸虫多肽SJMHE1降低哮喘小鼠髓源性抑制细胞的数量[目的]观察日本血吸虫多肽SJMHE1对哮喘小鼠髓源性抑制细胞（MDSC）的影响。[方法]择～8周健康雄性BALB/C小鼠,随机分为4组:PBS组、卵清蛋白（OVA）组、OVA/PBS组,OVA/SJMHE1组。OVA致敏构建支气管哮喘模型,流式细胞术测定脾脏MDSC中多形核细胞型MDSC（PMN-MDSC）、单核细胞型MDSC（M-MDSC）所占比例,免疫组织化学染色法检测肺组织MDSC的表达。[结果]与PBS组比较,OVA、OVA/PBS组脾细胞中PMN-MDSC比例及肺组织MDSC数量增加,脾细胞M-MDSC 比例无明显变化;与OVA、OVA/PBS组比较,OVA/SJMHE1组脾细胞PMN-MDSC比例及肺组织MDSC数量减少,脾细胞M-MDSC比例无明显变化。[结论]SJMHE1可能通过减少MDSC数量抑制哮喘小鼠气道炎症。
董小君[2]（2018）在《风湿宁对风寒湿痹证CIA模型TLR4/NF-κB信号通路的作用机制研究》文中研究表明目的:通过建立风寒湿痹证胶原诱导性关节炎（CIA）小鼠模型、大鼠模型,培养风寒湿痹证CIA模型大鼠膝关节滑膜组织中成纤维样滑膜细胞（FLS）,应用近红外荧光活体成像技术,围绕TLR4/NF-κB信号通路,从“滑膜组织-滑膜细胞-信号通路-靶向基因”角度,多层次地整体探究风湿宁治疗类风湿关节炎（RA）的药效作用机制。方法:第一部分,不同外感致病因素对病证结合CIA模型建立的比较研究。将110只SPF级雌性Wistar大鼠随机分为4组:空白对照组（10只）、CIA模型组（40只）、风寒湿痹证CIA模型组（30只）、风湿热痹证CIA模型组（30只）。采用风寒湿、风湿热外感致病因素刺激,结合牛II型胶原乳化剂诱导的方法,建立CIA模型、风寒湿痹证CIA模型、风湿热痹证CIA模型。分别采用疗效确切的验方风湿宁(18.24g·kg-1)与治痹经方乌头汤(4.9g·kg-1)、白虎加桂枝汤(10.15g·kg-1),对这三种RA模型加以治疗。运用以方测证的反证法和比较医学手段的正证法,观察模型大鼠的足掌温度、关节炎指数、关节肿胀度、血清RF、ACPA含量,踝关节病理学改变等指标,界定这三种RA模型的中医证候属性,从而确定下一步研究风湿宁药效作用机制的最佳动物模型。第二部分,近红外荧光探针在风寒湿痹证CIA小鼠模型中成像的应用研究。将48只SPF级BALB/c雌性小鼠随机分为4组:空白对照组、模型对照组、阳性对照组(3mg·kg-1)、风湿宁治疗组(23.45g·kg-1),每组12只。采用风寒湿外感致病因素刺激,结合牛II型胶原乳化剂诱导的方法,建立风寒湿痹证CIA小鼠模型。造模成功后,各组小鼠给予相应药物灌胃干预,每日1次,连续28天。末次灌胃1h后,通过尾静脉注射近红外荧光分子探针IRDye?800CW 2-DG,在活体水平上对小鼠RA炎症进行实时、动态、荧光成像观察,并对风湿宁治疗风寒湿痹证CIA小鼠模型的药效作用进行初步宏观探讨。第三部分,风湿宁对风寒湿痹证CIA大鼠模型滑膜组织中TLR4/NF-κB信号通路的作用机制研究。将54只SPF级雌性Wistar大鼠随机分为6组:空白对照组、模型对照组、阳性对照组(2.33mg·kg-1)、风湿宁低、中、高剂量组(9.12,18.24,36.48 g·kg-1),每组9只。采用风寒湿外感致病因素刺激,结合牛II型胶原乳化剂诱导的方法,建立风寒湿痹证CIA大鼠模型。造模成功后,各组大鼠给予相应药物灌胃干预,每日1次,连续28天。运用ELISA、HE、TUNEL、IHC、Real-time PCR、Western Blot等方法对大鼠血清RF、ACPA,炎性细胞因子IL-1β、TNF-α,抗炎细胞因子IL-4、IL-10,膝、踝关节病理学改变,滑膜组织细胞凋亡,滑膜组织中c-IAP1、XIAP、Caspase-3、Caspase-9表达,TLR4、MyD88、IκB-α、NF-κB mRNA和蛋白表达等进行检测,从TLR4/NF-κB信号通路上深入探讨风湿宁治疗RA的药效作用机制。第四部分,风湿宁含药血清对风寒湿痹证CIA-FLS增殖、凋亡和TLR4/NF-κB信号通路的作用机制研究。采用组织块培养法,对风寒湿痹证CIA模型大鼠膝关节滑膜组织中FLS进行原代培养、传代和鉴定。将第3代CIA-FLS细胞随机分为6组:空白血清对照组、来氟米特含药血清组、5,10,15,20%风湿宁含药血清组。运用CCK-8、TUNEL、ELISA、Real-time PCR、Western Blot等方法对CIA-FLS细胞增殖、凋亡,细胞培养上清液中IL-1β、TNF-α、IL-4、IL-10含量,CIA-FLS细胞中TLR4、MyD88、IκB-α、NF-κB mRNA和蛋白表达等进行检测,围绕TLR4/NF-κB信号通路,在细胞层面上,对风湿宁含药血清的药效作用机制进一步深入探讨。结果:第一部分,与空白对照组相比,CIA模型各组大鼠整体状况,随着时间推移持续性加重,体质量增长缓慢,关节炎指数和关节肿胀度明显升高,血清RF、ACPA含量显着上升,其中以风湿热痹证CIA模型对照组最为严重。风湿宁与治痹经方各治疗组大鼠灌服相应中药水煎液后,除风湿热痹证CIA风湿宁治疗组外,精神状态均逐渐好转,足掌温度、血清RF、ACPA含量有所下降,关节肿胀程度有所减轻,行动迟缓情况逐步改善,皮毛光泽度、爪甲形态、舌象等异常状况逐渐恢复。踝关节HE染色结果显示,CIA模型各组大鼠滑膜组织均有不同程度的增生和血管翳的形成,关节软骨可见不同程度的退行性变及骨质的破坏。各治疗组大鼠灌服相应药物后,对滑膜组织增生、炎性细胞浸润、血管翳形成、骨质侵蚀等均有不同程度的抑制作用。其中,治疗各组组间比较,以CIA白虎加桂枝汤治疗组、风寒湿痹证CIA风湿宁治疗组、风湿热痹证CIA白虎加桂枝汤治疗组改善效果尤为显着。第二部分,与空白对照组相比,模型对照组小鼠精神不振,倦怠少动,弓背蜷缩,喜扎堆,皮毛暗淡无泽,踝关节和足趾关节肿胀、变形,爪甲细长,色淡白,肛周污秽,小便清长,体质量增长减慢甚至减轻。风湿宁治疗组小鼠灌服中药水煎液后,与模型对照组比较,精神状态逐渐好转,体质量逐渐增长,足掌温度有所恢复,关节炎指数与踝关节宽度下降,关节肿胀程度有所减轻。近红外荧光活体成像结果显示,尾静脉注射2-DG荧光探针24h后,小鼠体内可观察到荧光信号;注射48h后,2-DG探针对关节炎特异性靶向效果佳,达到浓聚高峰,与正常组织对比明显;注射72h后,空白对照组小鼠体内2-DG探针逐渐排出体外,荧光信号减弱;模型对照组小鼠持续成像96h,仍可在炎症部位观察到荧光信号;风湿宁治疗组小鼠对2-DG探针在不同时刻的摄取量,较模型对照组少。第三部分,与空白对照组比较,模型对照组大鼠关节炎指数、关节肿胀度、血清RF、ACPA、IL-1β、TNF-α水平,脾脏、胸腺指数,膝踝关节组织病理学评分极显着升高（P<0.01）,血清IL-4、IL-10水平,滑膜组织细胞凋亡率极显着下降（P<0.01）,滑膜组织中c-IAP1、XIAP表达极显着上升（P<0.01）,Caspase-3、Caspase-9表达极显着下降（P<0.01）,TLR4/NF-κB信号通路表达极显着上调（P<0.01）。与模型对照组比较,风湿宁各剂量组大鼠灌胃治疗28天后,关节炎指数、关节肿胀度、血清RF、ACPA、IL-1β、TNF-α水平显着或极显着下降（P<0.05,P<0.01）,脾脏、胸腺指数,膝踝关节组织病理学评分显着或极显着下降（P<0.05,P<0.01）,血清IL-4、IL-10水平,滑膜组织细胞凋亡率显着或极显着上升（P<0.05,P<0.01）,滑膜组织中c-IAP1、XIAP表达显着或极显着下降（P<0.05,P<0.01）,Caspase-3、Caspase-9表达显着或极显着上升（P<0.05,P<0.01）,TLR4、MyD88、IκB-α、NF-κB mRNA与蛋白表达均显着或极显着下调（P<0.05,P<0.01）,其中,风湿宁高剂量组TLR4/NF-κB信号通路表达下调程度尤为显着。第四部分,CIA-FLS细胞传至3-6代,形态均一,呈长梭形。细胞免疫荧光鉴定,胞浆中Vimentin蛋白表达呈阳性。CCK-8、TUNEL法检测结果显示,风湿宁含药血清各浓度组处理CIA-FLS细胞24h、48h、72h后,对其增殖体现出抑制作用,且呈时间与浓度依赖性。与空白血清对照组同时段比较,其抑制作用有极显着性差异（P<0.01）;10,15,20%风湿宁含药血清处理细胞24h后,显着或极显着促进了CIA-FLS细胞的凋亡（P<0.05,P<0.01）。ELISA法检测结果显示,风湿宁含药血清各浓度组处理CIA-FLS细胞24h后,较空白血清对照组,可降低细胞培养上清液中IL-1β、TNF-α水平,提高IL-4、IL-10水平,有显着或极显着统计学差异（P<0.05,P<0.01）。Real-time PCR、Western Blot法检测结果显示,风湿宁含药血清各浓度组处理CIA-FLS细胞24h后,细胞中TLR4、MyD88、IκB-α、NF-κB mRNA与蛋白表达均显着或极显着下调（P<0.05,P<0.01）,其中,20%风湿宁含药血清组下调程度尤为显着。结论:（1）以CIA模型为基础,结合风、寒、湿、热等不同外感致病因素刺激,成功建立风寒湿痹证CIA大鼠模型和风湿热痹证CIA大鼠模型。（2）运用近红外荧光分子探针IRDye?800CW 2-DG,在活体水平上对风寒湿痹证CIA小鼠模型成功炎症靶向性荧光显像,风湿宁对模型小鼠足掌和关节的局部炎症有明显改善作用。（3）风湿宁对风寒湿痹证CIA模型大鼠具有明显的治疗作用,其药效作用机制可能是通过抑制TLR4/NF-κB信号通路,抑制IL-1β、TNF-α产生,下调c-IAP1、XIAP表达,降低脾脏、胸腺指数,促进IL-4、IL-10生成,促进滑膜组织细胞凋亡,提高Caspase-3、Caspase-9表达,从而产生了抗炎和免疫调节作用,达到治疗RA的效果,且其疗效与药物剂量有一定相关性。（4）风湿宁含药血清能抑制CIA-FLS细胞增殖,促进其凋亡,且呈时间与浓度依赖性。其作用机制可能是通过抑制TLR4/NF-κB信号通路的异常活化,抑制IL-1β、TNF-α产生,促进IL-4、IL-10生成,从而抑制RA滑膜增生,减轻滑膜炎症。
童星,肖小华,邓建朝,王家玥,李攻科[3]（2010）在《低温微波技术在化学研究中的应用》文中认为低温微波技术可用于降低微波反应时体系的温度,减少或消除微波辐射时速热效应带来的副反应,具有快速高效、反应均匀、安全环保等优势,在化学研究中得到了广泛关注和应用。本文介绍了低温微波技术的实现方法,综述了近年来该技术在蛋白质研究、合成反应、天然产物研究和微波化学机理研究等领域中的应用,并展望了低温微波技术的发展方向。
杨显志[4]（2009）在《微波在ELISA中的应用》文中提出综述了微波辐射技术在ELISA中的应用。采用微波辐射ELISA法进行诊断检测,背景清晰,反差明显,阴阳性对比鲜明,极大地加快了抗原抗体等的反应速度,缩短了反应时间,提高了工作效率。
杨耀湘[5]（2009）在《CD117、C-erbB-2、NDRG1在原发性肝细胞癌中的表达及其意义》文中提出【目的】探讨CD117、C-erbB-2、NDRG1在原发性肝细胞癌中的表达特点及其意义,为今后的分子靶向治疗提供依据,并进一步分析CD117、C-erbB-2和NDRG1与肿瘤的大小、部位、转移及组织病理学分型、分级、分期等的相关性。【方法】应用免疫组化EnVision法检测CD117、C-erbB-2、NDRG1在胎肝组织、正常肝组织、肝硬化组织、癌旁肝组织、原发性肝细胞癌组织、原发性转移灶组织中的表达;用图像分析系统测量CD117、C-erbB-2、NDRG1的平均光密度值。【结果】CD117、C-erbB-2、NDRG1在胎肝组织、正常肝组织（移植肝）、肝硬化组织、癌旁肝组织、原发性肝细胞癌组织、原发性转移灶组织中的平均光密度值分别为（0.177±0.130）、（0.197±0.090）、（0.159±0.086）、（0.087±0.088）、（0.069±0.088）、（0.067±0.070）;（0.031±0.034）、（0.000±0.000）、（0.001±0.001）、（0.029±0.078）、（0.028±0.065）、（0.005±0.017）:（0.059±0.074）、（0.206±0.056）、（0.198±0.074）、（0.059±0.051）、（0.128±0.096）、（0.176±0.083）。CD117、NDRG1在胎肝组织、正常肝组织、肝硬化组织、癌旁肝组织、原发性肝细胞癌组织、原发性转移灶组织中平均光密度值逐渐减小且各组间差异具有统计学意义（P<0.05）;C-erbB-2在胎肝组织、正常肝组织、肝硬化组织、癌旁肝组织、原发性肝细胞癌组织、原发性转移灶组织中平均光密度值逐渐增大且各组间差异具有统计学意义（P<0.05）;CD117的表达与患者的年龄、伴有肝硬化、PT值明显相关（P<0.05）;C-erbB-2的表达与肿瘤的数量、伴有HCV感染、穿透脏层腹膜有明显相关性（P<0.05）;NDRG1的表达与肿瘤的Edmondson分级明显相关。【结论】CD117参与肿瘤的发生发展,可作为HCC的抑癌基因;C-erbB-2可作为HCC的癌基因,促进肿瘤的发生、发展;NDRG1可作为HCC的抑癌基因;HCC中CD117与C-erbB-2表达呈明显负相关（r=-0.360,P<0.05）;C-erbB-2与NDRG1表达呈明显负相关（r=-0.669,P<0.05）;CD117与NDRG1表达呈明显正相关（r=0.377,P<0.05）,两者在抑制原发性肝细胞癌发生中可能存在协同作用;三者联合有助于HCC的预后判断。
彭新[6]（2009）在《苏木提取物的免疫抑制及抗肿瘤作用机制研究》文中提出肿瘤是机体在各种致瘤因素的作用下,局部组织的细胞在基因水平上失去对其生长的正常调控,导致克隆性异常增生或凋亡不足而形成的新生物,这种新生物往往形成局部肿块。肿瘤不管是良性还是恶性,也不管是上皮组织来源还是间叶组织来源,本质上都表现为细胞失去控制的异常增殖,这种异常生长的能力除了表现为肿瘤本身的持续生长之外,在恶性肿瘤还表现为对邻近正常组织的侵犯以及经血管、淋巴管和体腔转移到身体其它部位,而这往往是肿瘤致死的原因。祖国传统医学关于肿瘤发生的病机,历代医家的论述主要包括正气内虚、血瘀痰凝、邪毒内攻等。根据肿瘤患者病理性肿块、疼痛、出血、舌质瘀紫或有瘀点瘀斑,以及晚期面色黧黑、肌肤甲错等临床表现,认为血瘀症与肿瘤关系密切。近年来,随着分子生物学理论不断深入研究,中医药治疗肿瘤方面的研究进展取得了较为长足的进步,使我们对中药在抑制肿瘤生长,提高机体免疫功能,防止肿瘤转移的分子机制有了初步的认识。中医药对肿瘤的影响也从最初的免疫功能调节研究,发展到了今天的抗肿瘤血管生成研究,诱导细胞凋亡,抑制端粒酶活性等研究。苏木（Caesalpinia Sappan L,CAE）为豆科云实属植物的干燥心材。有行血祛瘀,消肿止痛之功效,中医临床常用于经痛、风湿痛、跌打瘀痛等症。临床上也用于肿瘤的治疗,现代药理学研究表明其具有抗肿瘤、免疫抑制等作用。但其具体的抗癌机制目前仍未知。为此我们用现代医学测试技术,测定苏木醇提取物免疫抑制与对抗肿瘤的作用机制。本研究的第一部分主要观察苏木不同提取物对小鼠胸腺组织、外周T细胞增殖和产生INF-γ的影响。通过制备苏木不同提取物分别给予灌胃小鼠,取小鼠胸腺称重计算胸腺指数;采用MTT法测定小鼠脾T细胞的增殖能力;用双抗体夹心ELISA法测定T细胞培养上清中产生INF-γ的含量。结果发现苏木不同提取物不仅对胸腺重量具有明显的抑制作用,而且还对T细胞的增殖和产生INF-γ的能力具有明显的抑制作用。其中苏木醇提取物和正丁醇提取物对T细胞的抑制作用较强。鉴于醇类提取物作用较强,在研究的第二部分主要观察苏木醇提物对人肺癌A549细胞的细胞毒作用和诱导凋亡作用。将苏木醇提物按不同浓度分别同人肺癌A549细胞共同培养,MTT法检测对细胞增殖作用的影响,光学显微镜、细胞膜磷脂酰丝氨酸外翻分析、细胞周期分析观察不同浓度苏木醇提物对人肺癌A549细胞的细胞毒和调亡作用。发现苏木醇提物对人肺癌A549细胞有抑制作用,并呈浓度依赖性;苏木醇提物在诱导细胞发生凋亡外还存在其它形式的细胞死亡方式并对细胞各期均有影响。经过第二部分体外抗肿瘤实验后,进行体内抗瘤实验。第三部分研究主要观察苏木醇提物对H22腹水瘤细胞抑瘤作用,通过皮下接种H22腹水瘤细胞的方法建立荷瘤惺竽Ｐ?用苏木醇提物灌胃处理,观察各组荷瘤小鼠的肿瘤生长情况,采用缺口末端标记法测定肿瘤细胞凋亡指数,免疫组织化学方法测定凋亡蛋白Bcl-2、Bax的表达情况。发现苏木醇提物可抑制H22移植瘤生长,促进瘤体细胞凋亡,降低瘤体细胞Bcl-2/Bax比值;其机制与通过调控凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达诱导肿瘤细胞凋亡有关。
车宏莉[7]（2008）在《日本血吸虫病免疫传感技术检测方法的研究》文中进行了进一步梳理研究背景:日本血吸虫病是一种危害严重的人兽共患寄生虫病,主要流行在发展中国家,目前,在我国湖区5省和山区2省仍在流行。血吸虫病的快速诊断的研究对于传染源的监测,疫情的控制将起到积极作用。一般认为,血吸虫病现场应用的理想诊断、筛查方法应具备以下特点:特异、敏感、价廉、简便、稳定和快速。但是,我国血吸虫病的现场查病方法仍然以粪检（kato-katz法）和IHA、ELISA等方法为主。由于粪检费时费力,阳性检出率较低,尤其在轻度流行区漏检率高,已不适宜于大面积疫区人群的筛查。常规ELISA方法操作复杂、现场难以推广应用。因此,研究快速、灵敏、准确、成本较低、简便易行的新型诊断技术和方法,已成为当前血吸虫病诊断迫切需要解决的问题。研究目的:将免疫方法和传感技术相结合,研究免疫传感技术检测日本血吸虫病的不同测试体系,为研制灵敏、简便、自动、定量分析的免疫传感检测装置奠定基础。研究方法:（1）利用巯基混合自组装单层膜（mixed SAMs）技术,以金硫键将巯基丙酸（MPA）和巯基乙醇（ME）混合物自组装在石英晶振表面,通过偶联试剂将日本血吸虫成熟虫卵可溶性抗原（SEA）交联到晶振上,从而开发了一种新的压电免疫传感器,用于血清中日本血吸虫抗体（SjAb）的直接检测。（2）采用自组装膜技术在石英晶振表面制备巯基丙酸（MPA）和巯基乙醇（ME）混合基底膜,通过偶联剂活化膜上羧基用于日本血吸虫抗原（SjAg）的高效共价固定。通过夹心式免疫反应引入辣根过氧化酶（HRP）标记二抗,利用HRP催化H2O2氧化底物4-氯-1-萘酚,在晶振表面形成不溶性沉积物,使免疫检测信号得以显着放大,提高检测的灵敏度。（3）采用印刷电极开发便携式、一次性的电化学生物传感器。将碳浆和银浆印刷在PET板,做成二电极的试条,工作电极为碳电极,在工作电极上以不同的方法固定SEA,参比电极为银和氯化银电极,通过循环伏安法（CV法）和示差脉冲伏安法（DPV法）来检测抗体的效价,比较几种不同固定方法的检测效果。（4）采用磁性颗粒为载体固定日本血吸虫抗原的方法,将日本血吸虫抗原通过共价吸附到核壳结构的磁性颗粒表面,与待测抗体反应后,再与酶标二抗夹心反应,最后以3,3’,5,5’-四甲基联苯胺（TMB）为底物,通过测定酶催化下荧光强度的变化来检测抗体的浓度。（5）利用双抗原夹心法,采用日本血吸虫可溶性虫卵抗原（SEA）包被硝酸纤维素膜（NC膜）作为捕获剂,日本血吸虫抗体（SjAb）包被NC膜作对照线,以胶体碳标记SEA作为显色剂,建立快速检测血清中血吸虫抗体的胶体碳试条法,并用灰度传感技术检测测试带灰度来完成半定量分析。研究结果:（1）与传统采用单一自组装单层膜固定化方法相比,发现基于混合自组装单层膜固化SjAg具有更高的免疫反应活性。在优化的实验条件下,该传感器检测血清稀释范围为1:1 500-1:60,比较了不同SiAb浓度的IRS实际样本,与经典ELISA法相比,相关系数达0.960。（2）开发了一种基于酶生物催化沉积信号放大的日本血吸虫压电免疫传感器。酶催化底物反应生成不溶物沉积显着放大免疫检测信号,提高了方法的检测灵敏度,传感器检测血清稀释范围为1:10000-1:200。（3）探索了四种不同的血吸虫抗原固定方法,并研制了四种血吸虫印刷电极免疫传感器:戊二醛交联（GA）传感器、壳聚糖-戊二醛（Chit-GA）交联法传感器、溶胶-凝胶法（Sol-gel）传感器、碳纳米管修饰的溶胶-凝胶法（Sol-gel）传感器。采用阳性兔血清测试戊二醛交联（GA）传感器的检测血清稀释范围为:1:1 000-1:400;壳聚糖-戊二醛（Chit-GA）交联法传感器的检测范围为:1:1 000-1:500;溶胶-凝胶法（Sol-gel）传感器的检测范围为:1:1 000-1:500;碳纳米管修饰的溶胶-凝胶法（Sol-gel）传感器检测范围为:1:2 000-1:100。（4）首次采用荧光免疫传感分析方法,检测了兔血清中日本血吸虫抗体的浓度,抗体稀释度在1:2×105-1:104范围内荧光强度响应呈良好的线性关系。（5）建立了一种快速检测血清中日本血吸虫抗体的胶体碳试纸条免疫诊断方法,引入灰度传感以得出检测带（T带）的灰度,而T带灰度与血清效价具有较好曲线关系,因而可以根据曲线对待测血清作出半定量分析。检测137份血清,与间接血凝法（indirecthaemagglutination assay,IHA）检测结果一致性为98.54%。以IHA试剂盒为参照,该方法的检测敏感性为98.99%,特异性为97.37%。结论:（1）基于巯基混合自组装单层膜的压电免疫传感器,检测方法灵敏、简便,在实际样品的检测中,取得了满意结果。且检测能力与经典ELISA法相接近,经进一步优化可望用于日本血吸虫病的诊断。（2）基于巯基化合物混合自组装膜的免疫材料固定化程序可实现SjAg在压电晶振表面的高效固定化,引入的酶催化底物反应生成不溶物步骤可显着放大免疫检测信号,从而提高了检测灵敏度（SjAb浓度稀释比达1:10 000）,与常规免疫测定方法相比,该压电免疫传感技术具有灵敏度较高、线性范围较宽、成本低廉等优点,可望用于日本血吸虫病的检测分析。（3）基于不同的血吸虫抗原固定方法,研制了四种血吸虫印刷电极免疫传感器。四种方法比较,碳纳米管修饰的溶胶-凝胶法（Sol-gel）传感器灵敏度高,线性范围宽,生物材料抗原的使用量少,成本低,为发展成一次性电极快速测试条奠定了基础。（4）建立了一种荧光免疫传感分析方法并用于日本血吸虫抗体的检测,方法简单实用且具有良好的选择性和重现性,为光学传感检测的研究探索了新的途径。（5）首次将灰度传感技术应用于日本血吸虫病的诊断,结合胶体碳试纸条,建立一种可实现日本血吸虫抗体半定量检测的方法,该法操作简便,快速,具有较高的敏感性和特异性,适合作血吸虫病的现场诊断,也为免疫传感技术的应用开辟了新的方向。（6）表1为本文中研究的几种免疫传感器性能比较,免疫荧光检测方法和酶催化沉积放大的压电免疫传感器的灵敏度高,但存在测试时间相对较长,操作复杂的弊端;混合自组装单层膜压电免疫传感器操作简单,检测的灵敏度可以满足血吸虫检测的需要,但存在传感器和测试仪器成本较高,仪器抗干扰性差的问题;基于印刷电极的碳纳米管修饰的溶胶-凝胶传感器检测时间短,仪器和传感器成本低,检测的灵敏度可以满足血吸虫病检测的需要,但目前传感器的重现性与实际应用还存在一定差距;纳米碳颗粒标记的层析免疫试条使用方便,测试时间短,检测的灵敏度可以满足血吸虫筛查的需要,具有一定的实用性,但目前的研究成果尚限于半定量的检测。
杨坤[8]（2008）在《血吸虫病景观格局与贝叶斯复合模型的构建》文中认为随着气候变暖、退田还湖、人类迁移活动等生态环境因素的改变,钉螺所处地理环境、生物群落、种群密度及其分布区域等都在发生变化。因此,血吸虫病的发生、发展及流行趋势也将随之变化,以科学的模型来预测血吸虫病的发展趋势是疾病预防控制中的重要内容之一。本研究在地理信息系统（GIS）和遥感（RS）技术的支持下,以主要的自然环境因素（水、植被、温度等）、景观因素（土地利用、土地类型等）及社会因素等作为研究指标,在血吸虫病流行区分别构建基于景观格局和贝叶斯模型的钉螺和血吸虫病分布复合模型,阐明和预测同一环境不同尺度、同一尺度不同环境类型的钉螺和血吸虫病分布的时空规律,为血吸虫病的监测和防治策略提供参考依据。首先在云南洱源县利用GPS仪记录沟渠的形状、空间位置与村庄边界,并收集2000至2006年查螺数据,利用遥感图像提取植被指数（NDVI）、湿度（Wetness）、地表温度（LST）与土地利用/类型等信息,进一步提取景观指数。在村级尺度上,构建钉螺分布非时空与时空贝叶斯复合模型,利用2006年钉螺分布数据与SPOT5遥感图像构建更小尺度（钉螺孳生环境）点数据贝叶斯复合模型,预测钉螺分布。显示山丘型钉螺分布在村级水平上无显着性时间和空间相关性;小尺度下,钉螺分布存在一定空间相关性。在村级水平上钉螺密度与NDVI、湿度、沟渠坡度等呈一定的相关性。小尺度下钉螺密度与上述因素无显着性相关,而与景观指数MSI（Mean shape index,平均形状指标）与SEI（Shannon’sevenness index,香农均匀度指标）呈显着性正相关,感染性钉螺密度与居民区面积比例成正相关。提示改变血吸虫病流行区的景观异质性可以起到降低钉螺密度的作用;山丘型钉螺与血吸虫病分布研究,宜采用高分辨率遥感图像进行小尺度研究。其次,我们在云南洱源县血吸虫病流行村开展了入户调查,对年龄≥5岁的居民开展血吸虫病检查（单纯血清学检查、单纯病原学检查和血检阳性者进行病原学检查）,分别对血检阳性率和感染率构建贝叶斯多水平模型（个体、户级与村级）。结果显示人群血检阳性率和血吸虫感染率的空间相关性主要发生在村级内部,不同年龄组与性别的人群血检阳性率与血吸虫感染率无显着性差异。村级水平上,人群血检阳性率与景观指数SEI和LPI（Largest patches index,最大斑块指数）呈正相关;人群血吸虫感染的危险因素为村周围钉螺平均密度。户级水平上,人群血检阳性的危险因素为较多水阳面积、无沼气池;人群血吸虫感染的危险因素主要为家庭无卫生畜圈。提示本区域控制人群血吸虫感染的主要措施为改造畜圈与降低流行村周围钉螺密度。第三,我们利用湖南汉寿县1995-2006年查螺数据及相应年份遥感图像提取NDVI、Wetness、LST与景观指数,构建钉螺分布贝叶斯复合模型用于钉螺分布预测。结果显示钉螺与感染性钉螺分布呈显着的时间负相关;垸内钉螺分布的空间相关性随距离增加而减少的速度明显快于垸外钉螺;垸内钉螺密度与NDVI呈负相关,垸内钉螺密度与景观指数SEI和LPl分别呈正相关和负相关。每年垸外钉螺与感染性钉螺分布的空间结构基本相似,变异较大;垸外钉螺与NDVI呈正相关,垸外钉螺密度分别与LST和Wetness呈负相关和正相关;垸外感染性钉螺密度与景观指数MSI、SDI（Shannon’s diversity index,香农多样性指数）呈正相关,与SEI、LPI和LSI呈负相关。结合退田还湖政策实施情况,钉螺分布预测图显示退田还湖实施后,垸内的钉螺密度仍处于一个较高的水平,其空间分布较垸外钉螺分布集中,垸外钉螺主要分布在汉寿县西北部垸外洲滩。最后,我们利用湖南汉寿县10年间3次以上（含3次）的血吸虫病查病数据,在考虑检查方法灵敏度和特异度的不确定性基础上构建贝叶斯复合模型。显示全县血吸虫感染率无明显时间相关性,每年人群血吸虫感染率的空间相关性结构差异较大,与NDVI呈显着负相关。预测图显示2002年感染率处于较低水平,感染率大于1%的区域主要沿水系目平湖和沅水分布;2005年全县平均感染率为2.22%,高感染率区域主要沿主要大水系分布;利用单纯血清学或病原学检查的感染率预测值及其预测误差的空间格局分布相似;感染率预测变化图显示汉寿县沅水以南大部分地区人群血吸虫感染率没有明显变化,沅水以北地区人群血吸虫感染率的增加明显,提示单退型退田还湖对人群血吸虫感染率的影响程度强于双退型。比较分析山丘型与湖沼型钉螺与血吸虫病分布的贝叶斯复合模型,可以看出山丘型与湖沼型钉螺和血吸虫病分布的影响因素、时空分布格局、模型构建方法等方面都存有差异,决定了两类血吸虫病流行区的控制措施应该有所不同。湖沼型血吸虫病流行区可以采取相对一致或相似的控制措施,主要应采取人畜同步化疗、家畜圈养和易感地区灭螺为主的综合防治措施,最大限度地控制病情,长期监测平垸行洪区动态变化,及时采取有效控制措施,严防疫情扩散。而在山丘型血吸虫病流行区,防治措施应因地制宜,在不同范围内实施针对性强和可操作性的技术措施,如坚持以环境改造为主的血吸虫病综合治理,实施重点工程灭螺,同时,应采取人畜同步化疗、改水改厕、健康教育、家畜圈养等综合防治措施,最大限度地降低钉螺面积,控制血吸虫病传播。适宜尺度下基于景观格局与贝叶斯模型的钉螺和血吸虫病分布的复合模型,在分析和预测山丘型和湖沼型钉螺及血吸虫病分布中将发挥重要作用,成为确定防治措施、提高防治效果的重要工具。
郑浩,许枫,孙婷,肖璐[9]（2007）在《研究快速ELISA试剂盒过有效期后的应用价值》文中研究指明目的研究快速ELISA试剂盒过有效期近2年后是否有应用价值。方法用过有效期近2年的快速ELISA试剂盒通过家用微波-ELISA法检测日本血吸虫病患者65份血清稀释成1:50,1:100,1:200,1:400计算抗体阳性检测率与未过有效期的ELISA试剂盒阳性检测率并进行对比。结果过有效期近2年的ELISA试剂盒在诊断日本血吸虫病时仍有价值。结论过有效期近2年的ELISA试剂盒与未过有效期的ELISA试剂盒来检测日本血吸虫都有较好阳性反应强度且未见显着差异。特别对于某些药品短缺情况下的偏远山区或经济欠发达地区适用。
熊海军,李正惠,刘琳[10]（2005）在《改良血球法诊断血吸虫病》文中提出目的观察改进后的冻干血吸虫病诊断血球方法的准确性和实用性。方法采用反相间接红细胞凝集原理,用稀释棒对血清进行稀释后,测定抗体浓度。结果改进后的方法（A法）与原法（B法）比较,不仅结果相同,而且操作简便,提高了阳性检出率。结论改进后的方法结果可靠,并适用于大样本检测,可推广使用。
二、家用微波ELISA检测日本血吸虫抗体的研究（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、家用微波ELISA检测日本血吸虫抗体的研究（论文提纲范文）
（1）日本血吸虫多肽SJMHE1对小鼠哮喘模型的作用与机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 英文缩略词 |
| 前言 |
| 参考文献 |
| 本论文研究的目的、内容、方法、意义及实验方案的设计 |
| 1 研究目的 |
| 2 研究内容 |
| 3 研究技术 |
| 4 研究意义 |
| 5 实验方案的设计 |
| 第一部分 日本血吸虫多肽SJMHE1对小鼠哮喘模型的作用研究 |
| 实验材料与方法 |
| 1 实验动物 |
| 2 日本血吸虫多肽SJMHE1 |
| 3 主要试剂和材料 |
| 3.1 主要试剂 |
| 3.2 主要仪器设备和耗材 |
| 4 实验方法 |
| 4.1 小鼠哮喘模型的建立 |
| 4.2 HE染色检测肺组织病变情况 |
| 4.3 支气管肺泡灌洗液收集及细胞计数 |
| 4.4 ELISA测定小鼠血清中OVA特异性IgE水平 |
| 4.5 统计学分析 |
| 实验结果 |
| 1 成功建立小鼠急性哮喘发作模型 |
| 2 SJMHE1处理减轻哮喘小鼠肺组织病变情况 |
| 3 SJMHE1处理减少哮喘小鼠BALF中细胞总数及嗜酸性粒细胞数 |
| 4 SJMHE1处理不影响哮喘小鼠血清OVA特异性IgE水平 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 第二部分 日本血吸虫多肽SJMHE1对哮喘小鼠模型Th1/Th2/Th17/Treg调节的影响 |
| 实验材料与方法 |
| 1 实验动物 |
| 2 日本血吸虫多肽SJMHE1 |
| 3 主要试剂和材料 |
| 3.1 主要试剂 |
| 3.2 主要仪器设备和耗材 |
| 4 实验方法 |
| 4.1 小鼠哮喘模型的建立 |
| 4.2 RNA提取和qRT-PCR法检测小鼠脾细胞和肺组织促炎和抗炎细胞因子 |
| 4.3 流式细胞术测小鼠脾细胞Th1/Th2/Th17/Treg细胞比例 |
| 4.4 免疫组织化学染色检测肺组织FoxP3蛋白表达情况 |
| 4.5 Western-blot方法检测肺组织GATA3和RORγt蛋白表达情况 |
| 4.6 统计学分析 |
| 实验结果 |
| 1 SJMHE1调节哮喘小鼠脾细胞和肺组织细胞因子的产生 |
| 2 SJMHE1治疗可调节哮喘小鼠脾细胞Th1/Th2/Th17/Treg亚群比例 |
| 3 SJMHE1可增加哮喘小鼠脾细胞和肺组织中Foxp3的表达 |
| 4 SJMHE1处理可降低哮喘小鼠肺组织GATA3和RORγt的表达 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 第三部分 日本血吸虫多肽SJMHE1降低哮喘小鼠髓源性抑制细胞的数量 |
| 实验材料与方法 |
| 1 实验动物 |
| 2 日本血吸虫多肽SJMHE1 |
| 3 主要试剂和材料 |
| 3.1 主要试剂 |
| 3.2 主要仪器设备和耗材 |
| 4 实验方法 |
| 4.1 小鼠哮喘模型的建立 |
| 4.2 流式细胞术测小鼠脾细胞PMN-MDSC及M-MDSC细胞比例 |
| 4.3 免疫组织化学染色检测肺组织MDSC浸润情况 |
| 4.4 统计学分析 |
| 实验结果 |
| 1 SJMHE1处理降低哮喘小鼠脾脏PMN-MDSC细胞数量 |
| 2 SJMHE1处理减少哮喘小鼠肺组织中MDSC数量 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 主要结论及展望 |
| 1 主要结论 |
| 2 展望 |
| 致谢 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 |
（2）风湿宁对风寒湿痹证CIA模型TLR4/NF-κB信号通路的作用机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| abstract |
| 缩略词表 |
| 引言 |
| 第一部分 不同外感致病因素对病证结合CIA模型建立的比较研究 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 实验药物及试剂 |
| 1.2.1 治痹经方 |
| 1.2.2 风湿宁 |
| 1.2.3 实验试剂 |
| 1.3 实验仪器 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 RA大鼠模型的建立 |
| 2.2 RA大鼠模型的分组及给药 |
| 2.3 标本采集及指标检测 |
| 2.3.1 大鼠一般状态观察 |
| 2.3.2 大鼠关节炎指数评分 |
| 2.3.3 大鼠关节肿胀度检测 |
| 2.3.4 大鼠血清RF、ACPA含量检测 |
| 2.3.5 大鼠踝关节组织病理学观察 |
| 2.4 统计学方法 |
| 3 结果 |
| 3.1 各组大鼠一般状态的观察结果 |
| 3.1.1 各组大鼠造模后一般状态变化 |
| 3.1.2 各组大鼠用药治疗后一般状态变化 |
| 3.2 各组大鼠实验期间体质量变化 |
| 3.3 各组大鼠实验期间足掌温度变化 |
| 3.4 各组大鼠实验期间关节炎指数变化 |
| 3.5 各组大鼠实验期间关节肿胀度变化 |
| 3.6 各组大鼠实验期间血清RF、ACPA含量变化 |
| 3.7 各组大鼠踝关节组织病理学观察结果 |
| 4 实验小结 |
| 5 讨论 |
| 5.1 治痹经方的选择及意义 |
| 5.2 病证结合CIA模型的建立及评价 |
| 5.3 风湿宁对三种CIA模型的影响 |
| 5.3.1 风湿宁对CIA模型大鼠体质量的影响 |
| 5.3.2 风湿宁对CIA模型大鼠足掌温度的影响 |
| 5.3.3 风湿宁对CIA模型大鼠关节炎指数与关节肿胀度的影响 |
| 5.3.4 风湿宁对CIA模型大鼠血清RF、ACPA的影响 |
| 5.3.5 风湿宁对CIA模型大鼠踝关节组织病理学的影响 |
| 第二部分 近红外荧光探针在风寒湿痹证CIA小鼠模型中成像的应用研究 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 实验药物及试剂 |
| 1.2.1 风湿宁与来氟米特 |
| 1.2.2 实验试剂 |
| 1.3 实验仪器 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 风寒湿痹证CIA小鼠模型的建立及给药 |
| 2.1.1 小鼠热板反应筛选 |
| 2.1.2 动物分组 |
| 2.1.3 模型制备 |
| 2.1.4 给药方法 |
| 2.2 指标检测 |
| 2.2.1 小鼠一般状态观察 |
| 2.2.2 小鼠足掌疼痛阈值检测 |
| 2.2.3 小鼠关节炎指数评分 |
| 2.2.4 小鼠关节肿胀度检测 |
| 2.2.5 近红外荧光小鼠活体成像观察 |
| 2.3 统计学方法 |
| 3 结果 |
| 3.1 风湿宁对风寒湿痹证CIA小鼠模型一般状态的影响 |
| 3.2 风湿宁对风寒湿痹证CIA小鼠模型足掌疼痛阈值的影响 |
| 3.3 风湿宁对风寒湿痹证CIA小鼠模型关节炎指数的影响 |
| 3.4 风湿宁对风寒湿痹证CIA小鼠模型踝关节宽度的影响 |
| 3.5 风湿宁对风寒湿痹证CIA小鼠模型近红外荧光活体成像的影响 |
| 4 实验小结 |
| 5 讨论 |
| 5.1 阳性药物的选择 |
| 5.2 风湿宁对模型小鼠足掌疼痛阈值的影响 |
| 5.3 风湿宁对模型小鼠关节炎指数与踝关节宽度的影响 |
| 5.4 风湿宁对模型小鼠近红外荧光活体成像的影响 |
| 第三部分 风湿宁对风寒湿痹证CIA大鼠模型滑膜组织中TLR4/NF-κB信号通路的作用机制研究 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 实验药物及试剂 |
| 1.2.1 风湿宁与来氟米特 |
| 1.2.2 实验试剂 |
| 1.3 实验仪器 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 风寒湿痹证CIA大鼠模型的建立及筛选 |
| 2.2 风寒湿痹证CIA大鼠模型的分组及给药 |
| 2.3 标本采集及指标检测 |
| 2.3.1 大鼠一般情况观察 |
| 2.3.2 大鼠血清RF、ACPA、IL-1β、IL-4、IL-10与TNF-α含量检测 |
| 2.3.3 大鼠脾脏与胸腺指数检测 |
| 2.3.4 大鼠膝、踝关节组织病理学观察及评分 |
| 2.3.5 大鼠滑膜组织中细胞凋亡检测 |
| 2.3.6 大鼠滑膜组织中c-IAP1、XIAP、Caspase-3与Caspase-9免疫组化检测 |
| 2.3.7 大鼠滑膜组织中TLR4、MyD88、IκB-α与NF-κBmRNA表达检测 |
| 2.3.8 大鼠滑膜组织中TLR4、MyD88、IκB-α与NF-κB蛋白表达检测 |
| 2.4 统计学方法 |
| 3 结果 |
| 3.1 风湿宁对风寒湿痹证CIA大鼠模型一般状态的影响 |
| 3.2 风湿宁对风寒湿痹证CIA大鼠模型关节炎指数的影响 |
| 3.3 风湿宁对风寒湿痹证CIA大鼠模型关节肿胀度的影响 |
| 3.4 风湿宁对风寒湿痹证CIA大鼠模型血清RF、ACPA含量的影响 |
| 3.5 风湿宁对风寒湿痹证CIA大鼠模型血清炎性细胞因子含量的影响 |
| 3.6 风湿宁对风寒湿痹证CIA大鼠模型血清抗炎细胞因子含量的影响 |
| 3.7 风湿宁对风寒湿痹证CIA大鼠模型脾脏与胸腺指数的影响 |
| 3.8 风湿宁对风寒湿痹证CIA大鼠模型膝、踝关节组织病理学及评分的影响 |
| 3.8.1 各组大鼠膝关节组织病理学观察及评分结果 |
| 3.8.2 各组大鼠踝关节组织病理学观察及评分结果 |
| 3.9 风湿宁对风寒湿痹证CIA大鼠模型滑膜组织细胞凋亡的影响 |
| 3.10 风湿宁对风寒湿痹证CIA大鼠模型滑膜组织中c-IAP1、XIAP、Caspase-3与Caspase-9免疫组化表达的影响 |
| 3.11 风湿宁对风寒湿痹证CIA大鼠模型滑膜组织中TLR4、MyD88、IκB-α与NF-κBmRNA相对表达量的影响 |
| 3.12 风湿宁对风寒湿痹证CIA大鼠模型滑膜组织中TLR4、MyD88、IκB-α与NF-κB蛋白表达的影响 |
| 4 实验小结 |
| 5 讨论 |
| 5.1 风湿宁的来源及方析 |
| 5.2 风湿宁通过下调炎性细胞因子表达,上调抗炎细胞因子活性,是发挥其治疗作用的机制之一 |
| 5.3 风湿宁通过调节免疫功能,是发挥其治疗作用的机制之一 |
| 5.4 风湿宁可诱导滑膜细胞调亡,抑制滑膜细胞异常增殖,是发挥其治疗作用的主要机制之一 |
| 5.5 风湿宁可抑制TLR4/NF-κB信号通路异常活化,是发挥其治疗作用的主要机制之一 |
| 第四部分 风湿宁含药血清对风寒湿痹证CIA-FLS增殖、凋亡和TLR4/NF-κB信号通路的作用机制研究 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 滑膜组织来源 |
| 1.2 制备含药血清的实验动物 |
| 1.3 实验药物及试剂 |
| 1.3.1 风湿宁与来氟米特 |
| 1.3.2 实验试剂 |
| 1.4 实验仪器 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 风寒湿痹证CIA模型大鼠滑膜细胞体外分离培养 |
| 2.1.1 CIA-FLS细胞原代培养 |
| 2.1.2 CIA-FLS细胞传代 |
| 2.1.3 CIA-FLS细胞计数 |
| 2.1.4 CIA-FLS细胞冻存 |
| 2.1.5 CIA-FLS细胞复苏 |
| 2.2 CIA-FLS细胞免疫荧光鉴定 |
| 2.3 含药血清的制备 |
| 2.4 CIA-FLS细胞分组及给药 |
| 2.5 CCK-8法检测CIA-FLS细胞增殖 |
| 2.6 TUNEL法检测CIA-FLS细胞凋亡 |
| 2.7 ELISA法检测CIA-FLS细胞培养上清液中细胞因子含量 |
| 2.8 Real-time PCR法检测CIA-FLS细胞中TLR4、MyD88、IκB-α与NF-κBmRNA表达 |
| 2.9 Western Blot法检测CIA-FLS细胞中TLR4、MyD88、IκB-α与NF-κB蛋白表达 |
| 2.10 统计学方法 |
| 3 结果 |
| 3.1 CIA-FLS细胞原代培养及形态学观察 |
| 3.2 CIA-FLS细胞免疫荧光鉴定 |
| 3.3 风湿宁含药血清对CIA-FLS细胞增殖的影响 |
| 3.4 风湿宁含药血清对CIA-FLS细胞凋亡的影响 |
| 3.5 风湿宁含药血清对CIA-FLS细胞培养上清液中细胞因子含量的影响 |
| 3.6 风湿宁含药血清对CIA-FLS细胞中TLR4、MyD88、IκB-α与NF-κB mRNA相对表达量的影响 |
| 3.7 风湿宁含药血清对CIA-FLS细胞中TLR4、MyD88、IκB-α与NF-κB蛋白表达的影响 |
| 4 实验小结 |
| 5 讨论 |
| 5.1 CIA-FLS细胞的原代培养及鉴定 |
| 5.2 风湿宁含药血清通过抑制CIA-FLS细胞增殖,促进其凋亡,是发挥其治疗作用的机制之一 |
| 5.3 风湿宁含药血清通过下调CIA-FLS细胞上清液中炎性细胞因子表达,上调抗炎细胞因子活性,是发挥其治疗作用的机制之一 |
| 5.4 风湿宁含药血清通过抑制CIA-FLS细胞中TLR4/NF-κB信号通路异常活化,是发挥其治疗作用的主要机制之一 |
| 结论 |
| 创新性与特色 |
| 问题与展望 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 综述 TLRs/NF-κB信号通路与类风湿关节炎相关研究进展 |
| 参考文献 |
| 附件1：在读期间公开发表的学术论文、专着及科研成果 |
（3）低温微波技术在化学研究中的应用（论文提纲范文）
| 1 引言 |
| 2 低温微波技术在蛋白质研究中的应用 |
| 2.1 LTMT在蛋白质酶水解中应用 |
| 2.2 LTMT在蛋白质免疫分析中应用 |
| 2.3 LTMT在蛋白质酶联免疫中应用 |
| 2.4 LTMT在蛋白质形态研究中应用 |
| 3 低温微波技术在催化合成反应中的应用 |
| 4 低温微波技术在天然产物研究中的应用 |
| 5 低温微波技术在微波化学机理研究中的应用 |
| 6 展望 |
（5）CD117、C-erbB-2、NDRG1在原发性肝细胞癌中的表达及其意义（论文提纲范文）
| 摘要 |
| 英文摘要 |
| 引言 |
| 第一部分 文献研究 |
| 一、CD117的研究现状 |
| (一) CD117的发现 |
| (二) CD117的结构及生物学功能 |
| (三) CD117与常见肿瘤的相关研究 |
| (四) 以CD117为靶点的分子靶向治疗药物 |
| 二、C-erbB-2的研究现状 |
| (一) C-erbB-2的发现 |
| (二) C-erbB-2的结构及生物学功能 |
| (三) C-erbB-2与常见肿瘤的相关研究 |
| (四) 以C-erbB-2为靶点的分子靶向治疗药物 |
| 三、NDRG1的研究现状 |
| (一) NDRG1的发现 |
| (二) NDRG1的结构及生物学功能 |
| (三) NDRG1与常见肿瘤的相关研究 |
| 第二部分 实验研究 |
| 一、材料 |
| 二、方法 |
| (一) 临床资料 |
| (二) HCC的分级、分型、分期 |
| (三) 免疫组织化学染色(EnVision法) |
| (四) 数据的统计分析 |
| 三、结果 |
| (一) CD117的表达 |
| (二) C-erbB-2的表达 |
| (三) NDRG1的表达 |
| (四) CD117、C-erbB-2及NDRG1在HCC中表达的比较 |
| 四、讨论 |
| (一) 酪氨酸激酶受体与肿瘤的分子靶向治疗 |
| (二) CD117在HCC中的表达及其与肝癌发生、发展的关系 |
| (三) C-erbB-2在HCC中的表达及其与肝癌发生、发展的关系 |
| (四) NDRG1在HCC中的表达及其与肝癌发生、发展的关系 |
| (五) CD117、C-erbB-2及NDRG1在HCC中的表达之间的关系 |
| 第三部分 结语 |
| 参考文献 |
| 附录I 英文缩略词表 |
| 附录Ⅱ 论文彩图 |
| 附录Ⅲ 硕士期间发表论文 |
| 致谢 |
（6）苏木提取物的免疫抑制及抗肿瘤作用机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 英文缩略词表 |
| 第一部分 文献综述 |
| 文献综述一 中药苏木应用与研究进展 |
| 文献综述二 中药提取技术的应用进展 |
| 文献综述三 中医药防治肿瘤的研究进展 |
| 第二部分 研究正文 |
| 前言 |
| 实验1 苏木不同提取物对小鼠胸腺和T细胞增殖功能影响的研究 |
| 1.材料和方法 |
| 2.结果 |
| 3.讨论 |
| 参考文献 |
| 实验2 苏木醇提物对人肺癌A549细胞作用影响的研究 |
| 1.材料和方法 |
| 2.结果 |
| 3.讨论 |
| 参考文献 |
| 实验3 苏木醇提物对H22小鼠移植瘤抑制作用机制的研究 |
| 1.材料和方法 |
| 2.结果 |
| 3.讨论 |
| 参考文献 |
| 结语 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
| 附图 |
（7）日本血吸虫病免疫传感技术检测方法的研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 目录 |
| 英文缩略词 |
| 前言 |
| 第一章 基于混合自组装单层膜的日本血吸虫压电免疫传感器 |
| 1 材料和方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 第二章 酶催化沉积质量放大的日本血吸虫压电免疫传感器 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 第三章 基于印刷电极的日本血吸虫免疫传感器研究 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 第四章 基于磁性纳米颗粒的日本血吸虫抗体荧光免疫传感分析 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 第五章 基于胶体碳层析试条的日本血吸虫抗体灰度传感分析 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 参考文献 |
| 免疫传感器技术及诊断血吸虫病的研究 |
| 致谢 |
| 攻读学位论文期间主要研究成果 |
（8）血吸虫病景观格局与贝叶斯复合模型的构建（论文提纲范文）
| 前言 |
| 1. 研究背景 |
| 2. 研究目标 |
| 3. 研究内容 |
| 4. 技术路线 |
| 5. 参考文献 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 第一部分 山氏型钉螺分布贝叶斯复合模型的构建 |
| 第一节 村级水平钉螺时空区域分布格局的研究 |
| 1. 前言 |
| 2. 材料和方法 |
| 3. 结果 |
| 4. 讨论 |
| 第二节 小尺度下钉螺空间点状分布格局的研究 |
| 1. 前言 |
| 2. 材料和方法 |
| 3. 结果 |
| 4. 讨论 |
| 参考文献 |
| 第二部分 山丘型血吸虫病分布贝叶斯复合模型的构建 |
| 1. 前言 |
| 2. 材料和方法 |
| 3. 结果 |
| 4. 讨论 |
| 5. 参考文献 |
| 第三部分 湖沼型钉螺分布贝叶斯复合模型的构建 |
| 1. 前言 |
| 2. 材料和方法 |
| 3. 结果 |
| 4. 讨论 |
| 5. 参考文献 |
| 第四部分 湖沼型血吸虫病分布贝叶斯复合模型的构建 |
| 1. 前言 |
| 2. 材料和方法 |
| 3. 结果 |
| 4. 讨论 |
| 5. 参考文献 |
| 总结 |
| 综述 景观流行病学研究现状及其进展 |
| 1. 景观流行病学概念 |
| 2. 景观流行病学研究方法 |
| 3. 景观流行病学应用 |
| 4. 问题及展望 |
| 5. 参考文献 |
| 附录 |
| 附录1:血吸虫病入户调查表 |
| 附录2:景观指数的计算及意义 |
| 附录3:WinBUGS程序 |
| 附录4:博士期间发表的论文 |
| 致谢 |
| 附件 |
四、家用微波ELISA检测日本血吸虫抗体的研究（论文参考文献）
- [1]日本血吸虫多肽SJMHE1对小鼠哮喘模型的作用与机制研究[D]. 李莉. 江苏大学, 2019(10)
- [2]风湿宁对风寒湿痹证CIA模型TLR4/NF-κB信号通路的作用机制研究[D]. 董小君. 成都中医药大学, 2018(01)
- [3]低温微波技术在化学研究中的应用[J]. 童星,肖小华,邓建朝,王家玥,李攻科. 化学进展, 2010(12)
- [4]微波在ELISA中的应用[A]. 杨显志. “第十四届全国微波能应用学术会议”暨“2009年微波创造美的生活高峰论坛”论文集, 2009
- [5]CD117、C-erbB-2、NDRG1在原发性肝细胞癌中的表达及其意义[D]. 杨耀湘. 广州中医药大学, 2009(11)
- [6]苏木提取物的免疫抑制及抗肿瘤作用机制研究[D]. 彭新. 北京中医药大学, 2009(10)
- [7]日本血吸虫病免疫传感技术检测方法的研究[D]. 车宏莉. 中南大学, 2008(02)
- [8]血吸虫病景观格局与贝叶斯复合模型的构建[D]. 杨坤. 中国疾病预防控制中心, 2008(05)
- [9]研究快速ELISA试剂盒过有效期后的应用价值[J]. 郑浩,许枫,孙婷,肖璐. 中国疗养医学, 2007(11)
- [10]改良血球法诊断血吸虫病[J]. 熊海军,李正惠,刘琳. 检验医学与临床, 2005(05)