一、蝎毒多肽对鸡胚血管生长的抑制作用（论文文献综述）
范红波,黄欣媛[1]（2021）在《蝎毒多肽的抗肿瘤作用机制》文中提出蝎毒的主要生理活性组分是其内含的多种生物活性多肽,一般长度为20～80氨基酸,分子内含2～4个二硫键,理化性质稳定并能发挥多种药理作用。蝎毒多肽是离子通道抑制剂,而离子通道在癌细胞中失调和过表达,在肿瘤的发展和侵袭中起重要作用。因此,蝎毒多肽具有明显的抗肿瘤效用,其作用机制主要有诱导癌细胞凋亡,抑制癌细胞增殖、侵袭、转移和血管生成,以及调节免疫细胞活性。
周青青,张琼谊,余桂媛,闫昌誉,黄蓉萍,韩绍聪,李怡芳,李维熙,何蓉蓉,栗原博[2]（2021）在《鸡胚模型在生物活性评价中的应用》文中进行了进一步梳理实验动物模型在生物活性筛选及安全性评价等方面发挥着重要的作用,但由于传统的哺乳类动物实验模型难以进行快速的活性评价,而细胞等体外实验方法也具有一定的局限性。因此,线虫、果蝇及斑马鱼等模式动物已被广泛使用。其中,与传统的实验动物模型相比,鸡胚模型具有操作简便、取材容易、实验成本低及实验周期短等特点。此外,由于鸡胚发育过程清晰、易于观察及孵育期间不受母体代谢的影响,因此有利于直接评价生物活性及对不同发育阶段的作用。基于上述理由,本文对鸡胚模型在生物活性评价中的应用进行综述,旨在为该实验模型的应用提供有益的参考。
孙浩浩[3]（2020）在《鸡胚蛋孵化期间蛋白质磷酸化修饰组学及其肽组学研究》文中研究指明鸡胚蛋含有丰富的蛋白质、脂质等营养物质,这对鸡胚的正常生长发育具有重要意义。蛋清和蛋黄蛋白质是鸡胚发育过程中的主要蛋白质来源。蛋白质的功能和结构往往受其翻译后修饰的影响。磷酸化是调节生物功能最常见的翻译后修饰,其可以参与细胞代谢,蛋白活性调控,信号传导等。然而鸡胚蛋孵化过程中存在哪些磷酸化的蛋白质,其磷酸化状态如何变化,这些变化对鸡胚产生哪些影响,目前仍不清楚。此外,蛋清和蛋黄中含有丰富的酶系,孵化可能促使内源酶被激活,从而导致蛋白质在内源酶的酶解下产生一些具有生理活性的多肽,鸡胚发育过程中蛋白质会自动降解形成哪些小分子肽以及这些小分子肽具有什么生物活性,目前鲜有报道。基于此,本研究以孵化第0 d和孵化第12 d的蛋清和蛋黄混合物为原材料,采用比较定量磷酸化组学的策略,利用固定化金属螯合亲和层析特异性富集样品中的磷酸化肽段,并结合纳升液相色谱-串联质谱技术对富集到的磷酸化肽段进行鉴定和定量分析,并选取磷酸化水平发生显着变化的蛋白质,通过进一步的生物信息学分析以及相关文献报道来探讨蛋白质磷酸化状态改变对鸡胚发育的影响。此外,通过MALDI-TOF-MS/MS方法对不同孵化时期蛋清和蛋黄中的小分子多肽进行鉴定,并采用多种生物信息学分析方法对内源肽的功能活性进行评估和筛选,从而为胚蛋源天然活性肽的开发利用提供了数据支撑及理论基础。本研究主要结果如下:（1）采用定量蛋白质组学（串联质谱标签标记）技术对孵化期间第0 d和第12d蛋清和蛋黄蛋白质进行了差异定量磷酸化组学分析。鉴定到100个蛋白上的215个磷酸化位点,其中95个蛋白的203个位点包含定量信息。通过对鉴定到的磷蛋白进行Motif分析,结果表明鸡蛋蛋白质磷酸化的基序是[S-X-E]。（2）差异位点的筛选遵循以下的标准:1.2倍为变化阈值,t-test p-value<0.05。基于以上标准,我们发现在12 d/0 d比较组中有55个磷酸化位点的修饰水平发生上调,68个磷酸化位点的修饰水平发生下调。对这些差异磷酸化的位点进行热图分析表明胚蛋孵化期间蛋白质磷酸化和去磷酸化过程同时发生。如核黄素结合蛋白在孵化过程中磷酸化程度增加,可能促进了该蛋白的跨膜转运,可以及时将核黄素转运到鸡胚。卵黄蛋白原在孵化过程中发生去磷酸化,其作用是为鸡胚提供发育所需的磷,从而促进胚胎骨骼的生长。基因本论分析表明差异变化的磷蛋白主要与结合功能相关。蛋白质互作分析表明磷酸化的蛋白质互作复杂,表明孵化期间磷蛋白发生广泛的相互作用。归一化分析表明孵化期间蛋白质磷酸化状态的改变不受蛋白质丰度变化的影响,即孵化过程中蛋白质自身发生加磷酸基团和去磷酸基团。（3）利用MALDI-TOF-MS/MS研究不同孵化时期（0 d、6 d、14 d、16 d）鸡胚蛋蛋清内源肽组学。在孵化的第0 d、6 d、14 d、16 d分别鉴定到147条,261条,334条,236条肽段。结合已有文献发现,有6条肽段的功能活性已被报道和验证。其中3条肽段（KMKILELPFASGTM、YRGGLEPINF和FRADHPFL）具有抗氧化和ACE抑制活性。1条（GAPVPVDENDEG）具有抗氧化活性。2条（NTDGSTDYGIL、IVSDGDGMNAW）分别具有抗氧化和抗菌功能。对鉴定到的肽段进行生物信息学分析,发现共有13条肽段具有潜在抗氧化活,14条具有潜在ACE制剂活性,9条具有潜在抗菌活性。其中抗氧化肽段主要在孵化早期被鉴定到（0 d和6 d）,而ACE抑制肽和抗菌肽主要在孵化后期（14 d和16 d）被鉴定到。这表明在孵化前期肽段主要参与自由基清除,展现抗氧化能力。而后期主要参与血压调节和发挥抗菌作用。通过进一步筛选,3条潜在抗氧化肽（QFGWVLRLGNL、VHGFHRL、VIMGMRF）、1条潜在抗氧化肽（GMNAWVAWR）、3条潜在抗菌肽（LVLKYCPKIGYC、LVLKYCPKIGYCS、CSKTQIWATSHGCK）均无毒性且无致敏性,因此可能具有开发应用价值。（4）利用MALDI-TOF MS/MS研究不同孵化时期（0 d、6 d、12 d、18 d）鸡胚蛋蛋黄内源肽组学。分别在孵化的第0 d、6 d、12 d和18 d分别鉴定到113条、208条、267条、187条肽。4条肽（YINQMPQKSRE、ITMIAPSAF、VTGRFAGHPAAQ和IYEAVNKVSPRAGQ）的功能活性已被报道验证。其中YINQMPQKSRE、ITMIAPSAF、VTGRFAGHPAAQ具有ACE抑制活性。IYEAVNKVSPRAGQ具有抗氧化活性。通过生物信息学分析方法发现14条肽段具有潜在抗氧化活性,9条肽段具有潜在抗癌活性,这些肽段大部分都是在孵化后期（12 d和18 d）被鉴定到。这表明在胚蛋孵化后期,蛋黄可能中存在大量的抗氧化肽和抗癌肽,它们的存在可以清除脂质过氧化产生的自由基以及消除成熟鸡胚患癌的风险。通过进一步筛选,四条潜在抗氧化肽（MGSNAMPRG、MAKAAGAFCILLLLTA、FRKSGFC、SLPFLCQ）和2条潜在抗癌肽（QGVEQGTRKWE、ELTKDLEEVKEKIR）均无致敏性、无毒性,说明这些肽安全性好,具有进一步开发利用的价值。
付劢[4]（2020）在《鸡胚多肽调节免疫力功能的初步探究》文中指出免疫力低下是现代社会中人们普遍存在的一种亚健康状态,人体在此状态下易受病原菌入侵,使机体受到损害。免疫应答作为重要的人体保护屏障,与人体的健康有着直接的关系,免疫力强弱对于人体健康具有非常重要的意义。通过研究具有免疫调节肽的天然食物,筛选出其中的功能性物质,可制成保健品或营养品来提高人体免疫力。鸡胚蛋作为一种民间药膳补品,因营养丰富,口感滑嫩等优点,有长久的被食用历史。研究报道表明,鸡胚蛋匀浆物、鸡胚蛋水溶物、鸡胚蛋脂溶物,均对调节免疫力起促进作用。本文以鸡胚蛋为原料,通过蛋白质提取、优化水解工艺、鸡胚多肽分离获得不同分子量大小的鸡胚多肽,探究其对于免疫力的增强和调节作用。本文以13日龄的鸡胚蛋为原料,提取蛋白后获得鸡胚粗蛋白,通过单因素和响应面实验探究枯草杆菌蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、胰蛋白酶在内的五种蛋白酶的酶解效果,优化菠萝蛋白酶水解鸡胚的酶解工艺,其中水解度最高的组合为在pH为6、酶与底物比3%、酶解温度45℃的条件下,使用菠萝蛋白酶酶解鸡胚,酶解时间为7 h。在优化鸡胚蛋酶解工艺的基础上,以最优工艺条件酶解鸡胚蛋后获得鸡胚多肽,利用超滤和透析技术,获得分子量为小于1 kDa、1-5 kDa、5-10 kDa、大于10 kDa的四组鸡胚多肽。调节四个组分的浓度,给予小鼠巨噬细胞,空白对照组给予完全培养基,与对照组实验相比,不同浓度的四组鸡胚多肽在细胞增殖和中性红吞噬的实验中,均促进小鼠巨噬细胞增殖并增强巨噬细胞吞噬活性。将小鼠巨噬细胞RAW264.7分为三组,分别给予完全培养基、脂多糖（LPS）、脂多糖和不同浓度鸡胚多肽。LPS可抑制细胞免疫功能,促进巨噬细胞NO的释放,及NF-κB、Toll-like Receptors免疫通路中相关免疫因子（iNOS、IL-6、IL-10、TNF-α、TLR4）的基因表达。给予鸡胚多肽刺激巨噬细胞的实验组与脂多糖刺激的实验组比较,巨噬细胞NO的释放量、iNOS mRNA、IL-6mRNA、IL-10 m RNA、TNF-αm RNA、TLR4 m RNA的基因表达回调,说明鸡胚多肽对于增强免疫力起促进作用。
刘亚平[5]（2019）在《藏鸡种蛋氧化应激响应蛋白质的筛选及其PIT54对血管生成机制的研究》文中认为近些年来,大量研究探究了鸡蛋不同部位的蛋白质组及其生物活性。但是,不同生长环境对于鸡蛋蛋白质组及生物活性的影响尚不清楚。为挖掘藏鸡蛋特有的功能蛋白质,本研究以两种海拔鸡种蛋为研究对象,分别选取青藏高原的土着品种藏鸡种蛋和在世界范围内广泛饲养的人工选育品种白来航鸡种蛋,对蛋清和蛋黄蛋白质组及其生物功能进行了详细的分析,进而通过构建人工注释的鸡蛋蛋清和蛋黄蛋白质数据集,筛选出抗氧化相关候选蛋白质PIT54,并围绕着两种海拔高度鸡种蛋PIT54的DNA序列的单核苷酸多态性位点、蛋白质提取优化、质谱分析、抗氧化活性和对血管生成的影响及其机制初步探究等方面开展了一系列研究工作。主要研究结果如下:（1）利用非标记蛋白质组学对藏鸡种蛋清蛋白质（TEW）和白来航种蛋蛋清蛋白质（CEW）进行了比较研究,以鉴定差异蛋清蛋白质及其生物活性。一共鉴定出176种蛋白质。其中,14种表达量差异显着（倍数>1.5且P<0.05）的蛋白质,主要参与了脂质转运、免疫防御、生长发育和抗氧化过程;通过体外实验和Caco-2细胞的抗氧化实验证实了CEW和TEW之间抗氧化应激活性的差异;前列腺素-H2D-异构酶前体和谷胱甘肽过氧化物酶被认为是与差异抗氧化活性相关的候选蛋白质。（2）通过非标记定量技术比较了藏鸡种蛋蛋黄蛋白质（TEY）和白来航鸡种蛋蛋黄蛋白质（CEY）的蛋白质表达图谱,一共鉴定出135种蛋白质,其中19种蛋白质的表达量在两组样本间存在显着差异（倍数>1.5且P<0.05）;差异表达的蛋白质主要与氧化应激、免疫、能量代谢以及组织发育等过程相关;为了进一步验证抗氧化能力的差异,通过体外实验和对H2O2诱导氧化应激的Caco-2细胞的保护作用实验比较了CEY和TEY的抗氧化应激活性差异。TEY和CEY均具有抗氧化活性,但前者表现出的抗氧化应激能力更强（P<0.05）,该结果可能与TEY中的抗氧化活性相关蛋白（谷胱甘肽过氧化物酶3和PIT54）的表达量差异有关。（3）由于蛋白质表达的动态性,本研究中鉴定的蛋白质种类与文献报道种类有所差异。为更加广泛地筛选抗氧化蛋白质进行后续实验,通过构建人工注释的鸡蛋蛋清和蛋黄蛋白质的非冗余数据集,筛选出了鸡蛋中抗氧化蛋白质合集,以具有抗氧化应激作用和研究较少为基本原则,初步选择了PIT54作为候选的抗氧化活性相关蛋白。PIT54还具有促进血管生成以及免疫调节等生物活性。进一步通过生物信息学对PIT54的结构和功能进行分析发现,分子中含有4个重复的SRCR结构域和6个保守的半胱氨酸残基,具有清道夫受体活性,定位于细胞膜,主要与脂质运输、细胞激活以及含氧化合物响应过程相关,说明其的确与低氧氧化应激过程相关。（4）根据PIT54可以与血红蛋白结合的特性,将鸡血红蛋白通过CNBr偶联到活化的Sepharose 4B上,制备吸附血红蛋白的亲和柱,用来纯化PIT54。研究了不同缓冲液体系（Tris-HCl,p H 8.1和硼酸盐缓冲液,p H 8.1）对于PIT54分离的影响,建立了从蛋黄中分离纯化PIT54的方法,蛋黄经正己烷脱油后获得粗蛋白,依次经过DEAE阴离子交换层析和吸附血红蛋白的亲和层析柱亲和层析两步分离法,便可以快速高效地获得PIT54蛋白质,并保持了蛋白质活性,该方法操作简单。相比于C-PIT54,T-PIT54具有更强的与Hb结合的能力（P<0.05）和抑制LDL脂质氧化反应的能力（P<0.05）。质谱分析发现PIT54分子中一共检测到3个N-糖基化位点（85N、157N和485N）。其中,157N仅在C-PIT54中检测到,另外两个位于SRCR结构域的糖酸化位点在T-PIT54分子中的糖基化程度显着高于C-PIT54（P<0.05）。C-PIT54和T-PIT54分子中都只检测到了一个磷酸化位点411Ser,位于SRCR结构域N端,T-PIT54的磷酸化程度显着低于C-PIT54（P<0.05）。（5）为了研究两种海拔高度鸡种蛋来源的PIT54对常氧和低氧孵化的鸡胚血管生成的影响,需要模拟高原低氧环境。首先,本研究在原有孵化箱的基础上,通过外加氮气模拟低氧环境;利用单片机优化了氧气、二氧化碳、温度、湿度及其翻蛋控制系统,同时完善了孵化箱的密闭性;实现了准确、稳定的模拟不同含氧量下的鸡胚孵化过程。该设备操作简单,成本低,实用性强。利用该孵化箱模拟低氧环境进行后续实验。之后,以不同孵化时期的常氧和低氧孵化的白来航鸡胚尿囊绒毛膜（CAM）为研究对象,以血管覆盖度和血管直径的分布情况为指标,筛选出D4、D8和D12为给药的时间点;然后,比较分析了T-PIT54和C-PIT54处理对低氧和常氧环境下的藏鸡和白来航鸡胚CAM血管发育情况的影响。最终发现了PIT54可以作为促血管生成因子,具有促进血管生成的作用,T-PIT54具有更强的促进血管生成的能力（P<0.05）,且作用范围广泛;C-PIT54对血管生成的促进作用具有种间差异性;T-PIT54和C-PIT54对于第8天的鸡胚的影响最大。因此,选择了两种给药处理的NC8、HC8和HT8组进行后续机制探究;（6）筛选出特异性肽段CTVNKNLEETETS制备PIT54抗体,经检验抗体效果良好。利用该抗体通过WB和免疫组织化学分析PIT54在鸡胚组织中的特异性表达,结果发现PIT54蛋白质在鸡胚的血液和肺泡中大量表达,在心脏、脑和血管中少量表达,在系带和肝脏中未检测到PIT54的特异性表达。通过免疫分子印迹分别考察了T-PIT54和C-PIT54处理后,CAM中的VEGFR2上下游相关蛋白的表达水平及磷酸化情况。发现低氧环境中,C-PIT54和T-PIT54可以通过显着增加上游的HIF-1α的表达量,刺激血管新生;增强VEGFR2/Src信号分子机制提高内皮细胞的通透性,有助于出芽和迁移;通过影响PI3K/Akt信号分子机制和提升ERK的磷酸化程度促进细胞增殖;增加p38单个蛋白质的磷酸化水平抑制细胞凋亡。这些都证明了C-PIT54和T-PIT54可以促进血管生成,提高低氧环境的适应性。但是,这两种外源添加的PIT54对低氧孵化鸡胚血管生成的促进作用具有种间差异性。两者在常氧白来航鸡胚中表现出与低氧环境相反的作用,可以避免血管内皮细胞的过度增殖。（7）通过对藏鸡源和白来航鸡源的PIT54 protein基因的DNA序列进行扩增测序发现,PIT54 protein基因全长5186 bp,包括8个外显子和7个内含子。同源比对结果显示,测序获得的T-PIT54与C-PIT54的内含子序列差异较大,但是,CDS序列保守性较高（99%identify）,表明了藏鸡源和白来航鸡源的PIT54 protein具有遗传稳定性。与C-PIT54相比,T-PIT54的DNA序列中存在着5个突变和5个插入片段;根据预测获得T-PIT54与C-PIT54蛋白质的氨基酸序列,生物信息学分析发现,T-PIT54的α-螺旋,结构更加紧密。两种蛋白质分子中都存在12个结合位点,但是部分位点具有种间特异性。这些序列与结构的差异可能是造成T-PIT54与C-PIT54抗氧化活性和促进血管生成活性差异的主要原因。
王垒[6]（2018）在《鸡胚肽及其锌螯合物的制备与应用研究》文中提出目的:本研究以鸡胚蛋为原料,通过酶解制备鸡胚肽并考察其抗氧化活性;制备鸡胚肽与微量元素锌的螯合物并考察其抗疲劳及提高免疫力的功能。方法:通过单因素试验法和正交试验法优选鸡胚蛋最佳酶解工艺。使用活性炭对酶解工艺制备出的鸡胚肽进行脱腥脱色处理并采用超滤对其进行分段。通过对鸡胚肽与微量元素锌螯合工艺的单因素试验法以及正交试验法得出最佳的螯合工艺。最后通过初步的抗疲劳及免疫调节药效学试验验证制得的富锌鸡胚肽的作用。结果:鸡胚蛋的最优酶解方法为先用碱性蛋白酶再用胰蛋白酶,最佳酶解工艺:底物浓度为10%,调节温度至55℃,pH值为8.0,加入3.0%的碱性蛋白酶酶解3h,待温度下降至40℃,加入2.0%胰蛋白酶酶解2h,此酶解工艺的水解度为31.96%。最佳的脱腥脱色工艺为在底物浓度为10%的情况下,加入0.5%的粉末活性炭,调节pH为5.0,于65℃水浴中加热搅拌40min,其脱色率为88.57%,肽回收率为82.63%,腥味小。鸡胚肽分段及抗氧化活性测定结果为分子量<1KDa的鸡胚小肽抗氧化活性最好,IC50为0.25mg/ml。富锌鸡胚肽中锌的螯合工艺最佳方法如下:螯合温度选定在70℃,锌离子与鸡胚肽的浓度之比为1:2,pH为8.0,螯合的时间为2h,在此反应条件下,螯合率为52.63%,采用火焰原子吸收光谱法测出锌在此螯合物的含量约为0.0937%。经过初步药效学研究可知富锌鸡胚肽具有较好的抗疲劳、提高免疫力的作用。结论:通过双酶酶解制备出的鸡胚肽具有较好的抗氧化活性;鸡胚肽经过与锌螯合之后制得的富锌鸡胚肽具有较好的抗疲劳和提高免疫的能力。
周舟,侯炜,李站,李铮,谢燕达,王家伟,伍晓慧,董广通[7]（2017）在《中药抗肿瘤血管生成的治疗现状与展望》文中进行了进一步梳理肿瘤是目前临床常见疾病,肿瘤的难治性就在于肿瘤的复发和转移,而肿瘤新生血管的生成是肿瘤复发和转移的重要条件之一。因此通过抑制肿瘤血管的生成从而来控制肿瘤疾病的发展已经成为当今抗肿瘤治疗的热点。随着对中药研究的进一步深入,中药在抗肿瘤血管生成方面具有显着作用。文章就近5年来中药在抗肿瘤血管生成方面的研究与应用现状及进展进行综述。
熊艳梅[8]（2015）在《海金沙抑制鸡胚尿囊膜新生血管作用研究及活性部位制备》文中进行了进一步梳理中药海金沙[Lygodium japonicum（Thunb）Sw.]是蕨类海金沙科（Lygodiaceae）海金沙属（Lygodium）多年生草质藤本植物。研究表明海金沙具有清热解毒、利胆消肿、抗菌等药理活性,然而,对海金沙抗血管生成的作用却鲜有报道。本文采用鸡胚绒毛尿囊膜（CAM）模型筛选海金沙抗血管生成的活性部位,并对其提取精制工艺进行优化,制备活性部位。采用高效液相色谱法（HPLC）对海金沙活性成分经大鼠灌胃给药后吸收入血的成分进行分析,为揭示海金沙抗血管生成药效物质提供一定实验依据。研究目的:本文采用CAM模型筛选海金沙提取物中具有抗血管生成作用的活性部位,优选其提取精制工艺,制备提取物,为海金沙的开发和应用提供实验依据。研究方法:1.采用系统分离法,分别以石油醚、乙酸乙酯、正丁醇为提取溶剂,对海金沙全草提取液进行提取,制备海金沙石油醚、乙酸乙酯、正丁醇提取物。2.采用CAM模型,以加药口处新生血管增长百分率为指标,比较海金沙石油醚、乙酸乙酯、正丁醇提取物抗血管生成活性。3.采用显色反应,盐酸-镁粉、盐酸-锌粉反应试验、氯化铝的络合反应试验、4%氢氧化钠溶液及紫外-可见光谱及海金沙正丁醇部位指纹图谱的建立,对抗血管生成活性部位进行分析,确认海金沙正丁醇提取物所含成分的类别。4.制备海金沙抗血管生成活性部位,应用CAM模型对其抗血管生成活性进行验证;以鸡胚卵黄囊膜（YSM）血管生成模型对CAM模型筛选出的抗血管生成活性部位进行进一步研究。5.采用L9（34）正交法,以浸出物得率和海金沙血管生成活性部位含量为指标,进行海金沙提取工艺的优选,考察提取溶剂浓度、用量、提取时间等因素对提取效果的影响,确定最优提取工艺条件。采用冷藏静置法,以总黄酮的含量及叶绿素清除率为指标,考察提取物浓度对除叶绿素效果的影响。6.采用柱分离技术分离活性部位提取物,获得不同浓度乙醇洗脱部位,以CAM模型对其进行抗血管生成作用的筛选,并进行验证试验。7.应用大鼠血清药化方法,以50%乙醇洗脱部位作为药物组,进行灌胃处理,制备空白血清组、空白血清+药物组、药物组及含药血清组,采用液相色谱技术对海金沙入血成分进行分析。结果:1.海金沙石油醚提取物、乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物对CAM血管生长均有一定的抑制作用,正丁醇提取物抑制作用最强,其次为乙酸乙酯提取物。2.采用盐酸-镁粉、盐酸-锌粉反应试验检测海金沙正丁醇提取物,结果出现红色泡沫;采用氯化铝的络合反应试验反应为黄色;采用4%氢氧化钠溶液对正丁醇提取物进行显色反应为棕红色。采用紫外-可见光谱测定可知,海金沙正丁醇提取物与芦丁对照品显色后吸收峰均在510nm附近;通过对海金沙正丁醇部位进行高效液相指纹图谱的建立,分析吸收光谱特征。综合以上实验结果,初步判断正丁醇提取物主要含有黄酮类化合物。3.CAM模型高、中剂量药物组加药口处血管生成明显减少,YSM模型高、中剂量药物组新生血管密度增长率及数目均明显减少,可以推测海金沙总黄酮对血管生成有一定的抑制作用,并呈现剂量依赖性。4.采用L9（34）正交法,进行海金沙提取工艺的筛选,由极差和方差分析结果可知,对有效成分提取率影响因素依次排列为乙醇浓度>提取时间>溶剂用量,结果显示乙醇浓度有显着性差异,故确定海金沙总黄酮最佳提取工艺为:乙醇浓度为50%、乙醇用量为18倍药材量、提取2次、每次2h。5.采用冷藏静置法,除去提取液中叶绿素,实验结果显示,样品溶液浓度为0.5g生药/ml时,提取液中叶绿素含量最低。6.海金沙总黄酮经过柱分离后所得4个不同醇浓度洗脱部位中,乙醇浓度为50%洗脱部位对鸡胚新生血管抑制作用最强。确定乙醇浓度为50%洗脱部位为抗鸡胚血管生成的有效部位,确定最佳浓度为9.6g生药/ml。7.以血清药化学方法,通过液相色谱技术分析大鼠血清。通过比较各高效液相色谱图可知,有6个成分保留时间相同,入血后新产生5个吸收峰,可能经过吸收后,该5个成分为代谢物,需进一步对给药成分进行研究确定。结论:本研究通过对海金沙进行逐级分离分析与鸡胚绒毛尿囊膜（CAM）模型相结合的方法,确定海金沙提取物中抑制鸡胚血管生成最佳部位为50%乙醇洗脱海金沙黄酮部位。采用L9（34）正交法及冷藏静置法,确定海金沙总黄酮最佳提取工艺为:乙醇浓度为50%、乙醇用量为18倍药材量、提取2次、每次2h。样品溶液浓度为0.5g生药/ml情况下,进行冷藏静置滤过进行分离精制处理。并通过大鼠血清药化方法,灌胃给予50%乙醇洗脱部位,经HPLC分析所得血清,有6个成分保留时间相同,入血后新产生5个吸收峰,可能经过吸收后,该5个成分为代谢物,需进一步对给药成分进行研究确定。
程磊,邓玉华[9]（2014）在《具有抗肿瘤血管生成作用的三大类中药研究现状和思考》文中研究指明肿瘤新生血管的生成是肿瘤生长、复发和转移过程中不可缺少的生物过程,因此,抗肿瘤血管生成是目前治疗肿瘤的重要方式。随着对中医药研究的进一步深入,发现诸多中药在抗肿瘤血管生成方面有显着作用。本文就目前研究较多的活血药、清热药、攻毒药等三类具有抗肿瘤血管生成作用的中药作分析和思考。
钱昕[10]（2014）在《壁虎多肽混合物A抗血管生成作用的实验研究》文中研究说明目的：观察壁虎多肽混合物A（GPMA）抗肿瘤血管生成的作用,并探讨其机制。方法：（1）建立鸡胚尿囊膜血管形成模型（CAM模型），采用一日龄受精种蛋50只温箱孵育到九日龄，随机分为5组，每组10只，分别为实验组（高、中、低壁虎多肽混合物）、阴性对照组和阳性对照组。在蛋壳上开窗暴露鸡胚尿囊膜，将提前制备好的甲基纤维素薄片放置于尿囊膜新生毛细血管区域，作为药物载体。然后给予实验组鸡胚不同浓度壁虎多肽。观察壁虎多肽对鸡胚尿囊膜新生血管的抑制作用；阴性对照组给予等量生理盐水，阳性对照组用5-氟尿嘧啶，48h后观察甲基纤维素薄片覆盖区及周围血管生成情况；（2）分离、培养人脐静脉内皮细胞（HUVEC），用倒置显微镜观察体外培养HUVEC的形态变化，并用MTT比色法测定含不同浓度（0.4mg/mL、0.2mg/mL、0.1mg/mL、0.05mg/mL、0.025mg/mL）的壁虎多肽混合物A对HUVEC增殖的影响；（3）培养人EC109肿瘤细胞，用免疫组化法观察0.2mg/mL和0.1mg/mL壁虎多肽混合物A作用24h后对EC109细胞VEGF蛋白表达的影响；（4）建立小鼠H22移植肿瘤模型，用免疫组化法和Western-blot法检测小鼠H22移植肿瘤组织对VEGF蛋白表达的影响。结果：（1）阴性对照组的大血管数量、血管密度、血管分支明显多于壁虎多肽组，管径也较壁虎多肽组粗，加入壁虎多肽高剂量组的CAM上只见极少数管径极细的大血管，血管分支明显减少，细小血管几乎不见，甚至出现溶血现象。壁虎多肽在40μg/egg时抑制率为90%，与对照组比差异有显着性。解剖显微镜下观察并计数全视野内的大小血管，用药组血管总数明显减少。（2）倒置显微镜下可见，正常人脐静脉内皮细胞贴壁单层生长，铺路石状单层梭形细胞排列，细胞为扁平多角形，边界清楚，胞浆丰富、胞核清晰可见，为圆形或椭圆形。加药24小时后，各药物组细胞排列紊乱，尤其5-FU阳性药物及大剂量药物组作用明显、细胞数量明显减少。MTT结果显示药物对其抑制作用随浓度、时间的增加而加强。（3）在体外EC109肿瘤细胞培养实验中，免疫组化结果显示壁虎多肽混合物A在0.2mg/mL、0.1mg/mL剂量下均能明显降低EC109肿瘤细胞的VEGF的表达。（4）在小鼠H22移植肿瘤模型，腹腔注射高（80mg/kg）、中（40mg/kg）、低（20mg/kg）剂量壁虎多肽混合物A，免疫组化和Western-blot实验结果显示壁虎多肽混合物A能抑制肿瘤组织中VEGF蛋白的产生。结论：壁虎多肽混合物A可以抑制正常及肿瘤组织的血管增生，其抑制血管增生作用可能是通过抑制血管内皮或者肿瘤细胞VEGF的产生的结果。
二、蝎毒多肽对鸡胚血管生长的抑制作用（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、蝎毒多肽对鸡胚血管生长的抑制作用（论文提纲范文）
（1）蝎毒多肽的抗肿瘤作用机制（论文提纲范文）
| 1 癌细胞的离子通道 |
| 2 蝎毒多肽的抗癌作用 |
| 2.1 增殖抑制和诱导细胞凋亡 |
| 2.2 抑制肿瘤新生毛细血管的生成 |
| 2.3 抑制肿瘤侵袭和转移 |
| 2.4 免疫调节作用 |
| 3 小结与展望 |
（2）鸡胚模型在生物活性评价中的应用（论文提纲范文）
| 1 鸡胚的组织结构与特点 |
| 2 鸡胚模型在疾病机理及生物活性评价中的应用 |
| 2.1 鸡胚模型在神经系统相关疾病中的应用 |
| 2.2 鸡胚模型在血管系统相关疾病中的应用 |
| 2.3 鸡胚模型在心脏系统相关疾病中的应用 |
| 2.4 鸡胚模型在眼部系统相关疾病中的应用 |
| 2.5 鸡胚模型在肝脏系统相关疾病中的应用 |
| 2.6 鸡胚模型在骨骼系统相关疾病中的应用 |
| 2.7 鸡胚模型在肿瘤学研究中的应用 |
| 2.8 鸡胚模型在病毒和微生物等相关疾病中的应用 |
| 3 鸡胚模型在安全性评价中的应用 |
| 4 鸡胚细胞系在生物学研究中的应用 |
| 5 结语 |
（3）鸡胚蛋孵化期间蛋白质磷酸化修饰组学及其肽组学研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩略语表 |
| 第一章 文献综述 |
| 1 鸡蛋蛋白质功能及磷酸化修饰 |
| 1.1 鸡蛋蛋白质的功能活性 |
| 1.1.1 抗氧化活性 |
| 1.1.2 抗菌活性 |
| 1.1.3 免疫活性 |
| 1.2 蛋白质磷酸化修饰 |
| 2 蛋白质组学概述 |
| 2.1 蛋白质组学的定义 |
| 2.2 蛋白质组学技术 |
| 2.2.1 蛋白质分离 |
| 2.2.2 质谱鉴定 |
| 2.2.3 定量蛋白质组学技术 |
| 3 蛋白质组学在鸡蛋中的应用 |
| 3.1 鸡蛋蛋白质的全组学研究 |
| 3.2 鸡胚蛋蛋白质的比较差异组学 |
| 4 鸡蛋蛋白质的磷酸化修饰组学研究 |
| 5 活性肽研究进展 |
| 5.1 鸡蛋中主要的活性肽 |
| 5.1.1 抗氧化肽 |
| 5.1.2 降血压肽 |
| 5.1.3 抗菌肽 |
| 5.1.4 降血糖肽 |
| 5.2 肽组学研究在鸡蛋中的应用 |
| 6 本课题的研究意义与研究内容 |
| 6.1 研究意义 |
| 6.2 研究内容 |
| 第二章 基于TMT标记的鸡胚蛋孵化期间差异定量磷酸化组学分析 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.1.1 实验原料 |
| 1.1.2 主要试剂 |
| 1.1.3 主要仪器与设备 |
| 1.2 实验方法 |
| 1.2.1 蛋白提取 |
| 1.2.2 胰酶酶解 |
| 1.2.3 TMT标记 |
| 1.2.4 HPLC分级 |
| 1.2.5 修饰富集 |
| 1.2.6 液相色谱-质谱联用分析 |
| 1.2.7 数据库搜索 |
| 1.2.8 质谱质控检测 |
| 1.2.9 生物信息学分析 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 质谱质控检测结果 |
| 2.2 样品重复性检验 |
| 2.3 磷酸化蛋白及磷酸化位点鉴定总览 |
| 2.4 差异磷酸化蛋白及磷酸化位点总览 |
| 2.5 磷酸化基序分析 |
| 2.6 GO分析 |
| 2.7 差异磷酸化的蛋白质亚细胞结构定位 |
| 2.8 差异磷酸化的蛋白质结构域富集 |
| 2.9 PPI分析 |
| 2.10 磷酸化蛋白质组与蛋白质组的比较 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 第三章 鸡胚蛋孵化期间蛋清内源肽组学分析 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.1.1 实验原料 |
| 1.1.2 主要试剂 |
| 1.1.3 主要仪器与设备 |
| 1.2 实验方法 |
| 1.2.1 样品前处理 |
| 1.2.2 多肽样品制备 |
| 1.2.3 质谱分析 |
| 1.2.4 数据库检索 |
| 1.2.5 肽段功能活性分析 |
| 1.2.6 潜在活性肽理化性质分析 |
| 1.2.7 潜在活性肽安全性评价 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 多肽数量及分子量分布 |
| 2.2 多肽匹配分析 |
| 2.3 已被报道的功能肽 |
| 2.4 活性肽预测 |
| 2.4.1 抗氧化活性预测 |
| 2.4.2 ACE抑制活性预测 |
| 2.4.3 抗菌活性预测 |
| 2.5 潜在活性肽的理化性质分析 |
| 2.5.1 抗氧化肽的理化性质 |
| 2.5.2 ACE抑制肽的理化性质 |
| 2.5.3 抗菌肽的理化性质 |
| 2.6 安全性评价 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 第四章 鸡胚蛋孵化期间蛋黄内源肽组学分析 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.1.1 实验原料 |
| 1.1.2 主要试剂 |
| 1.1.3 主要仪器与设备 |
| 1.2 实验方法 |
| 1.2.1 样品前处理 |
| 1.2.2 多肽样品制备 |
| 1.2.3 质谱分析 |
| 1.2.4 数据库检索 |
| 1.2.5 肽段功能活性分析 |
| 1.2.6 潜在活性肽理化性质分析 |
| 1.2.7 潜在活性肽安全性评价 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 多肽数量及分子量分布 |
| 2.2 肽段序列定位分析 |
| 2.3 已被报道的功能肽 |
| 2.4 活性肽预测 |
| 2.4.1 抗氧化活性预测 |
| 2.4.2 抗癌活性肽预测 |
| 2.5 潜在活性肽的理化性质分析 |
| 2.5.1 抗氧化肽的理化性质分析 |
| 2.5.2 抗癌活性肽的理化性质分析 |
| 2.6 潜在活性肽的安全性评价 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 第五章 结论与展望 |
| 1 结论 |
| 2 创新点 |
| 3 展望 |
| 参考文献 |
| 攻读硕士学位期间的科研成果 |
| 致谢 |
（4）鸡胚多肽调节免疫力功能的初步探究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 鸡胚蛋 |
| 1.1.1 概述 |
| 1.1.2 鸡胚蛋的营养成份 |
| 1.1.3 鸡胚蛋的研究现状 |
| 1.2 肽 |
| 1.2.1 概述 |
| 1.2.2 多肽的功能性研究 |
| 1.2.3 多肽的分离纯化研究 |
| 1.3 免疫系统 |
| 1.3.1 概述 |
| 1.3.2 免疫通路 |
| 1.4 研究目的、意义及内容 |
| 1.4.1 研究目的和意义 |
| 1.4.2 研究内容 |
| 第二章 鸡胚蛋白酶解工艺的优化 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 实验部分 |
| 2.2.1 材料与试剂 |
| 2.2.2 仪器与设备 |
| 2.2.3 实验方法 |
| 2.2.4 结果与分析 |
| 2.3 本章小结 |
| 第三章 鸡胚多肽的初步分离及筛选 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 实验部分 |
| 3.2.1 材料与试剂 |
| 3.2.2 仪器与设备 |
| 3.2.3 实验方法 |
| 3.2.4 结果与分析 |
| 3.3 本章小结 |
| 第四章 鸡胚多肽的免疫调节作用 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 实验部分 |
| 4.2.1 材料与试剂 |
| 4.2.2 仪器与设备 |
| 4.2.3 实验方法 |
| 4.2.4 结果与分析 |
| 4.3 本章小结 |
| 第五章 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简历 |
（5）藏鸡种蛋氧化应激响应蛋白质的筛选及其PIT54对血管生成机制的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩略语表 |
| 第一章 文献综述 |
| 1 鸡蛋蛋白质的主要功能 |
| 1.1 抗氧化活性(氧化应激响应活性) |
| 1.2 抗菌活性 |
| 1.3 血管紧张素转移酶抑制活性 |
| 1.4 抗病毒活性 |
| 1.5 其他生物活性 |
| 2 蛋白质组学研究 |
| 2.1 蛋白质组学的常用技术 |
| 2.2 蛋白质组学技术的应用 |
| 2.3 鸡蛋蛋白质翻译后的研究 |
| 3 藏鸡蛋的研究进展 |
| 3.1 藏鸡蛋蛋壳的研究进展 |
| 3.2 低氧孵化对鸡胚组织器官的影响 |
| 3.3 低氧适应性相关蛋白质的研究 |
| 4 PIT54及血管生成的研究进展 |
| 4.1 PIT54的相关研究 |
| 4.2 血管生成及常用的模型 |
| 4.3 促血管生成因子对于血管生成的影响 |
| 5 本课题选题的学术思想 |
| 5.1 研究目的与意义 |
| 5.2 学术思想 |
| 5.3 主要研究内容 |
| 第二章 两种海拔高度鸡种蛋蛋清蛋白质组的比较研究 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 试验方法 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 EW基本营养成分分析 |
| 2.2 蛋清蛋白质的GO分类分析 |
| 2.3 差异蛋白质的生物信息学分析 |
| 2.4 生物信息学分析两组的抗氧化活性差异 |
| 2.5 CEW和 TEW的抗氧化活性测定 |
| 3 讨论 |
| 3.1 差异蛋白质的功能分析 |
| 3.2 抗氧化相关蛋白质的筛选 |
| 4 小结 |
| 第三章 两种海拔高度鸡种蛋蛋黄蛋白质组的比较研究 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 试验方法 |
| 2 结果和讨论 |
| 2.1 TEY和 CEY的基本营养成分分析及其蛋白质的鉴定 |
| 2.2 TEY和 CEY中差异表达的蛋白质 |
| 2.3 差异蛋白质的生物信息学分析 |
| 2.4 生物信息学分析差异蛋白质与抗氧化活性相关 |
| 2.5 藏鸡和白来航鸡抗氧化活性相关的蛋白和基因 |
| 2.6 体外抗氧化测定 |
| 2.7 细胞毒性/细胞保护作用 |
| 3 讨论 |
| 3.1 差异蛋白质的功能分析 |
| 3.2 CEYH和 TEYH对于Caco-2 细胞的保护作用 |
| 3.3 鉴定与抗氧化活性有关的蛋黄蛋白质 |
| 4 小结 |
| 第四章 两种海拔高度鸡种蛋抗氧化蛋白质筛选 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 蛋白质注释 |
| 1.3 鸡蛋抗氧化活性蛋白质的筛选 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 比较本研究中鉴定的蛋白质与已报道蛋白质 |
| 2.2 构建蛋清和蛋黄中蛋白质数据集 |
| 2.3 确定抗氧化活性候选蛋白质 |
| 2.4 PIT54的功能分析与同源比对 |
| 3 讨论 |
| 3.1 鸡蛋中抗氧化活性蛋白质的筛选 |
| 3.2 PIT54的生物活性预测分析 |
| 3.3 PIT54的保守性分析 |
| 4 小结 |
| 第五章 两种海拔高度鸡种蛋蛋黄PIT-54的纯化与质谱分析 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 试验方法 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 血红蛋白的提取及亲和层析柱的制备 |
| 2.2 PIT54蛋白质纯化 |
| 2.3 质谱鉴定 |
| 2.4 PIT54与血红蛋白的结合能力 |
| 2.5 PIT54抗氧化能力的测定 |
| 2.6 两种来源的PIT54糖基化位点鉴定 |
| 2.7 两种蛋白质的磷酸化位点差异鉴定 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 第六章 两种海拔高度PIT54对CAM血管生成的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 试验方法 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 低氧孵化过程的模拟与控制 |
| 2.2 调试与孵化测试 |
| 2.3 鸡胚尿囊绒毛膜的给药时间点筛选 |
| 2.4 两种PIT54 对于鸡胚CAM的血管发育的影响 |
| 3.讨论 |
| 3.1 高原低氧孵化箱的模拟与控制 |
| 3.2 不同孵化时间对于CAM血管生成的影响 |
| 3.3 不同药物对于鸡胚CAM血管发育的影响 |
| 4 小结 |
| 第七章 两种海拔PIT54对CAM血管生成机制的探究 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 试验方法 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 PIT54抗体的制备与效果评价 |
| 2.2 PIT54的表达部分探测 |
| 2.3 C-PIT54和T-PIT54对HIF-1α表达量的影响 |
| 2.4 不同药物处理对VEGFR2/Src信号分子机制的影响 |
| 2.5 C-PIT54和T-PIT54对PI3K/Akt信号分子机制的影响 |
| 2.6 C-PIT54和T-PIT54对ERK和p38 及各自磷酸化水平的影响 |
| 3 讨论 |
| 3.1 PIT54表达部位分析 |
| 3.2 C-PIT54和T-PIT54 对血管生成相关蛋白的影响 |
| 3.3 PIT54 影响鸡胚CAM血管生成的机制 |
| 4 小结 |
| 第八章 两种海拔高度鸡PIT54基因测序比较 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 试验方法 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 载体的构建与酶切鉴定 |
| 2.2 PIT54 protein基因DNA结构分析 |
| 2.3 不同来源的PIT54 protein基因DNA序列比较分析 |
| 2.4 预测的T-PIT54与C-PIT54 氨基酸序列的比较分析 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 第九章 结论与展望 |
| 1 结论 |
| 2 创新性 |
| 3 研究展望 |
| 参考文献 |
| 作者简介 |
| 致谢 |
（6）鸡胚肽及其锌螯合物的制备与应用研究（论文提纲范文）
| 提要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 课题思路图 |
| 第一章 绪论 |
| 1 鸡胚蛋概述 |
| 1.1 鸡胚蛋简介 |
| 1.2 鸡胚蛋的营养成分 |
| 1.3 鸡胚蛋开发现状 |
| 2 生物功能肽概述 |
| 2.1 生物功能肽简介 |
| 2.2 生物功能肽研究现状 |
| 2.3 生物功能肽发展前景 |
| 3 微量元素-锌概述 |
| 4 本文主要研究内容及意义 |
| 4.1 鸡胚蛋制备鸡胚肽的酶解工艺及脱腥脱色工艺研究 |
| 4.2 鸡胚肽分子量分布、分段及其抗氧化活性研究 |
| 4.3 鸡胚肽-锌螯合物的螯合工艺研究 |
| 4.4 富锌鸡胚肽初步药效学研究 |
| 4.5 研究意义 |
| 5 技术路线 |
| 第二章 鸡胚蛋酶解工艺研究及脱腥脱色研究 |
| 1 材料与仪器 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.2 仪器与试剂 |
| 2 酶解试验方法 |
| 2.1 试验工艺流程 |
| 2.2 鸡胚蛋中蛋白质、水分的含量测定 |
| 2.3 蛋白酶种类的优选 |
| 2.4 酶解工艺优选 |
| 2.5 水解度的测定 |
| 2.6 酶解最优工艺验证试验 |
| 3 脱腥脱色试验方法 |
| 3.1 脱腥脱色试验工艺流程 |
| 3.2 脱腥脱色工艺条件考察试验 |
| 3.3 最优脱腥脱色工艺验证试验 |
| 4 结果与讨论 |
| 4.1 酶解试验结果 |
| 4.2 脱腥脱色工艺考察结果与分析 |
| 4.3 脱腥脱色最优工艺验证结果 |
| 5 本章小结 |
| 第三章 鸡胚肽分子量分布、分段及其抗氧化活性研究 |
| 1 试验材料与仪器 |
| 1.1 试验材料 |
| 1.2 试剂与仪器 |
| 2 试验方法 |
| 2.1 鸡胚肽溶液中肽的含量测定方法 |
| 2.2 鸡胚肽分子量分布的测定 |
| 2.3 DPPH·法测定不同分子量鸡胚肽抗氧化活性 |
| 3 试验结果与分析 |
| 3.1 肽含量的测定结果 |
| 3.2 分子量分布的测定结果与分析 |
| 3.3 不同分子量鸡胚肽抗氧化活性测定结果 |
| 4 本章小结 |
| 第四章 鸡胚肽-锌螯合工艺研究 |
| 1 试验材料与仪器 |
| 1.1 试验材料 |
| 1.2 仪器与试剂 |
| 2 试验方法 |
| 2.1 试验工艺流程 |
| 2.2 鸡胚肽-锌螯合工艺单因素试验 |
| 2.3 鸡胚肽-锌螯合工艺正交法优化试验 |
| 2.4 鸡胚肽-锌螯合率的测定方法 |
| 2.5 火焰原子吸收光度法测定鸡胚肽-锌螯合物中锌的含量 |
| 3 试验结果与分析 |
| 3.1 鸡胚肽-锌螯合工艺单因素试验结果与分析 |
| 3.2 鸡胚肽-锌螯合工艺正交法优化试验结果与分析 |
| 3.3 火焰原子吸收光度法测定鸡胚肽-锌螯合物中锌的含量结果 |
| 4 本章小结 |
| 第五章 富锌鸡胚肽免疫调节试验研究 |
| 1 材料与仪器 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.2 仪器与试剂 |
| 1.3 动物 |
| 2 试验方法 |
| 2.1 抗疲劳试验研究 |
| 2.2 对免疫器官-胸腺和脾脏的影响试验研究 |
| 3 试验结果与分析 |
| 3.1 富锌鸡胚肽对小鼠抗疲劳试验研究结果与分析 |
| 3.2 富锌鸡胚肽对小鼠免疫器官的影响试验研究结果与分析 |
| 4 本章小结 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 论文着作 |
（7）中药抗肿瘤血管生成的治疗现状与展望（论文提纲范文）
| 1 中医学对肿瘤血管生成机制的认识 |
| 2 中药单药抗肿瘤血管生成 |
| 2.1 红景天 |
| 2.2 红花 |
| 2.3 白花蛇舌草 |
| 2.4 半枝莲 |
| 2.5 蜈蚣 |
| 2.6 蝎毒 |
| 2.7 白头翁 |
| 2.8 斑蝥 |
| 2.9 黄芩 |
| 3 中药复方抗肿瘤血管生成 |
| 3.1 鳖甲煎丸 |
| 3.2 六神丸 |
| 3.3 加味血府逐瘀汤 |
| 3.4 益气养阴方 |
| 3.5 消癌解毒方 |
| 3.6 参麦注射液 |
| 3.7 补肾健脾方 |
| 3.8 复方苦参注射液 |
| 3.9 解毒消症饮 |
| 4 讨论 |
| 4.1 中药复方在抗肿瘤血管生成方面的角色定位 |
| 4.2 中医综合性治疗在抗肿瘤血管生成方面的应用 |
| 4.3 中药如何协同贝伐单抗发挥增效减毒作用 |
| 4.4 治病求本, 辨证论治如何与精准治疗相结合 |
| 4.5 中药如何使肿瘤血管“正常化” |
| 4.6中药的抗肿瘤血管生成作用尚需更多的临床试验来证明 |
| 5 结论 |
（8）海金沙抑制鸡胚尿囊膜新生血管作用研究及活性部位制备（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 第一章 文献研究 |
| 1.1 海金沙的化学成分、药理活性及临床应用研究进展 |
| 1.1.1 海金沙主要化学成分 |
| 1.1.2 海金沙主要药理活性 |
| 1.1.3 海金沙的临床应用 |
| 1.1.4 发展前景及展望 |
| 1.2 中药抗血管生成与肿瘤治疗 |
| 1.2.1 肿瘤血管的生成与调控 |
| 1.2.2 抗血管生成的中药及其机制 |
| 1.2.3 展望 |
| 第二章 海金沙提取物不同萃取部位抗血管生成活性的筛选 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.1.1 鸡胚种蛋 |
| 2.1.2 主要试剂耗材 |
| 2.1.3 主要仪器设备 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 样品溶液制备 |
| 2.2.2 供试品溶液制备 |
| 2.2.3 CAM模型的制备及加药 |
| 2.2.4 统计学方法 |
| 2.3 实验结果 |
| 2.3.1 海金沙不同极性部位对鸡胚血管长势的影响 |
| 2.3.2 海金沙不同极性部位对鸡胚血管生成的影响 |
| 2.4 讨论 |
| 第三章 海金沙正丁醇部位主要化学成分的分析 |
| 3.1 实验材料 |
| 3.1.1 主要试剂耗材 |
| 3.1.2 主要仪器设备 |
| 3.2 实验方法 |
| 3.2.1 海金沙正丁醇部位的制备 |
| 3.2.2 显色反应 |
| 3.2.3 紫外-可见光谱分析 |
| 3.2.4 指纹图谱的建立 |
| 3.3 实验结果 |
| 3.3.1 显色反应结果及分析 |
| 3.3.2 可见光谱测定结果及分析 |
| 3.3.3 海金沙正丁醇部位化学成分HPLC分析 |
| 3.4 讨论 |
| 第四章 海金沙总黄酮对鸡胚血管生成的影响的研究 |
| 4.1 实验材料 |
| 4.1.1 鸡胚种蛋 |
| 4.1.2 主要试剂耗材 |
| 4.1.3 主要仪器设备 |
| 4.2 实验方法与结果 |
| 4.2.1 海金沙总黄酮制备 |
| 4.2.2 供试品溶液制备 |
| 4.2.3 CAM模型的制备及加药 |
| 4.2.4 YSM模型的制备及加药 |
| 4.3 讨论 |
| 第五章 海金沙总黄酮提取精制工艺研究 |
| 5.1 实验材料 |
| 5.1.1 主要试剂耗材 |
| 5.1.2 主要仪器设备 |
| 5.2 海金沙提取工艺考察 |
| 5.2.1 标准曲线绘制 |
| 5.2.2 提取次数的考察 |
| 5.2.3 正交试验考察提取工艺参数 |
| 5.2.4 验证实验 |
| 5.2.5 方法学验证 |
| 5.3 海金沙除叶绿素工艺考察 |
| 5.3.1 样品溶液的制备 |
| 5.3.2 样品溶液浓度考察 |
| 5.4 讨论 |
| 第六章 海金沙总黄酮抗血管生成活性部位筛选 |
| 6.1 实验材料 |
| 6.1.1 鸡胚种蛋 |
| 6.1.2 主要试剂耗材 |
| 6.1.3 主要仪器设备 |
| 6.2 实验方法 |
| 6.2.1 海金沙总黄酮精制物的制备 |
| 6.2.2 供试品溶液制备 |
| 6.2.3 鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)实验 |
| 6.3 实验结果 |
| 6.4 验证实验 |
| 6.4.1 上柱 |
| 6.4.2 冲柱 |
| 6.4.3 供试品溶液制备 |
| 6.4.4 鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)实验 |
| 6.5 讨论 |
| 第七章 海金沙抗血管生成活性部位入血成分初步分析 |
| 7.1 实验材料 |
| 7.1.1 实验动物 |
| 7.1.2 主要试剂耗材 |
| 7.1.3 主要仪器设备 |
| 7.2 实验方法 |
| 7.2.1 色谱条件 |
| 7.2.2 供试品溶液的制备 |
| 7.2.3 供试品溶液的测定 |
| 7.3 实验结果 |
| 7.3.1 检测波长的选择 |
| 7.3.2 血清样品制备方法筛选及结果 |
| 7.3.3 入药血清成分分析 |
| 7.4 讨论 |
| 第八章 总结与展望 |
| 总结 |
| 展望 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 在校期间发表论文情况 |
| 致谢 |
（9）具有抗肿瘤血管生成作用的三大类中药研究现状和思考（论文提纲范文）
| 1 中医学对肿瘤血管生成机制的认识 |
| 2 三大类中药抗肿瘤血管生成的研究 |
| 2.1 活血类 |
| 2.1.1 莪术 |
| 2.1.2 红花 |
| 2.1.3 丹参 |
| 2.1.4 姜黄 |
| 2.1.5 川芎 |
| 2.2 清热类 |
| 2.2.1 白花蛇舌草 |
| 2.2.2 半枝莲 |
| 2.2.3 蒲公英 |
| 2.2.4 垂盆草 |
| 2.2.5 穿心莲 |
| 2.2.6 山慈菇 |
| 2.2.7 其他 |
| 2.3 攻毒类 |
| 2.3.1 蜈蚣 |
| 2.3.2 蟾酥 |
| 2.3.3 斑蝥 |
| 2.3.4 蝎毒 |
| 2.3.5地鳖虫 |
| 2.3.6 壁虎 |
| 3 讨论 |
| 3.1 目前抗肿瘤血管生成研究的不足之处 |
| 3.2 应加强对中药复方的研究 |
| 3.3 应寻找合适的抗血管生成动物模型 |
| 4 结论 |
（10）壁虎多肽混合物A抗血管生成作用的实验研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第1章 综述 |
| 1.1 抗肿瘤血管生成的药物研究 |
| 1.1.1 肿瘤与血管生成 |
| 1.1.2 抗肿瘤血管生成的中药研究 |
| 1.1.3 抗肿瘤血管生成的化疗药物 |
| 1.1.4 其他抗肿瘤血管生成的药物 |
| 1.2 壁虎的实验研究 |
| 1.2.1 抗肿瘤的实验研究 |
| 1.2.2 其它实验研究 |
| 第2章 引言 |
| 第3章 材料与方法 |
| 3.1 材料 |
| 3.1.1 主要试剂 |
| 3.1.2 主要仪器及设备 |
| 3.1.3 实验动物及细胞株 |
| 3.1.4 药物 |
| 3.1.5 主要试剂的配置 |
| 3.2 实验方法 |
| 3.2.1 壁虎粗多肽的制备 |
| 3.2.2 对鸡胚尿囊膜（CAM）血管生成的影响 |
| 3.2.3 人脐静脉内皮细胞的分离、培养 |
| 3.2.4 MTT 法检测人脐静脉内皮细胞活性 |
| 3.2.5 EC109 细胞培养及其 VEGF 蛋白表达的监测 |
| 3.2.6 免疫组化法和 Western-blot 测定腋下移植瘤组织 VEGF 蛋白表达 |
| 3.2.7 统计学方法 |
| 第4章 结果 |
| 4.1 GEE 层析结果 |
| 4.2 GPMA 影响 CAM 血管生成的结果 |
| 4.3 GPMA 对脐静脉内皮细胞作用的结果 |
| 4.4 药物对 EC109 细胞 VEGF 蛋白表达的影响 |
| 4.5 对小鼠 H22 组织 VEGF 蛋白表达的影响 |
| 第5章 讨论 |
| 5.1 壁虎多肽混合物 A 制备与选用 |
| 5.2 鸡胚与血管增生 |
| 5.3 人脐静脉血管内皮细胞 |
| 5.4 肿瘤与血管增生 |
| 第6章 结论 |
| 参考文献 |
| 附图 |
| 缩略语词汇表 |
| 致谢 |
| 攻读硕士学位期间的研究成果 |
四、蝎毒多肽对鸡胚血管生长的抑制作用（论文参考文献）
- [1]蝎毒多肽的抗肿瘤作用机制[J]. 范红波,黄欣媛. 湖北工程学院学报, 2021(06)
- [2]鸡胚模型在生物活性评价中的应用[J]. 周青青,张琼谊,余桂媛,闫昌誉,黄蓉萍,韩绍聪,李怡芳,李维熙,何蓉蓉,栗原博. 今日药学, 2021
- [3]鸡胚蛋孵化期间蛋白质磷酸化修饰组学及其肽组学研究[D]. 孙浩浩. 华中农业大学, 2020(02)
- [4]鸡胚多肽调节免疫力功能的初步探究[D]. 付劢. 中国农业科学院, 2020(01)
- [5]藏鸡种蛋氧化应激响应蛋白质的筛选及其PIT54对血管生成机制的研究[D]. 刘亚平. 华中农业大学, 2019(01)
- [6]鸡胚肽及其锌螯合物的制备与应用研究[D]. 王垒. 山东中医药大学, 2018(01)
- [7]中药抗肿瘤血管生成的治疗现状与展望[J]. 周舟,侯炜,李站,李铮,谢燕达,王家伟,伍晓慧,董广通. 辽宁中医杂志, 2017(09)
- [8]海金沙抑制鸡胚尿囊膜新生血管作用研究及活性部位制备[D]. 熊艳梅. 广州中医药大学, 2015(01)
- [9]具有抗肿瘤血管生成作用的三大类中药研究现状和思考[J]. 程磊,邓玉华. 中国当代医药, 2014(19)
- [10]壁虎多肽混合物A抗血管生成作用的实验研究[D]. 钱昕. 河南科技大学, 2014(02)