一、细菌内毒素检查法测定注射用硫酸链霉素热原的观察（论文文献综述）
胡瑞鸿[1]（2020）在《抗H株小鹅瘟病毒卵黄抗体的研制与质量评估》文中研究表明小鹅瘟（Gosling plague,GP）又称为鹅细小病毒病,是由鹅细小病毒引起的一种高度接触性、败血性传染病,是危害养鹅业的主要传染病。近年来,根据遗传进化分析,小鹅瘟病毒（Gosling plague virus,GPV）的毒力有增强趋势,给该病的防治带来更大的挑战。目前GP的特异性防治主要依赖接种卵黄抗体（Immunoglobulin of yolk,IgY）进行被动免疫,对GP强毒感染具有明显的防治效果。由于IgY具有价格低廉、防治效果好等优点,已被广大养鹅户接受和采用。但目前使用的IgY多为粗制抗体,缺乏统一的生产、检验标准,琼扩抗体效价高低不等,故研制一种纯度及效价高,防治效果好,有统一生产标准的GPV IgY势在必行。本研究从黑龙江省某地饲养的雏鹅群中,采集疑似GP病死鹅的病料,进行GPV的分离鉴定,利用分离获得的GPV研制抗GP的IgY,并对其质量进行评价,具体研究内容和方法如下:（1）GPV的分离鉴定用氯仿提取法从疑似GP病死鹅的肝、脾组织中分离病毒,接种3日龄雏鹅和12日龄鹅胚进行病毒分离;分离的病毒经特异性检验（琼脂扩散试验（AGP）和鹅胚中和试验）、超微结构观察、毒力测定、理化特性（热敏感试验、乙醚敏感试验、氯仿敏感试验、胰蛋白酶敏感试验、耐酸性试验）检验、纯净性试验、核酸检测、VP3基因序列鉴定及基因进化树分析,进行综合鉴定。（2）GPV IgY的研制将分离鉴定获得的GPV（命名为H株）,经鹅胚逐级传代至F10,F10代进行1000倍稀释,接种12日龄鹅胚,收获鹅胚液作为GPV灭活疫苗抗原,抗原无菌检验和毒力检测合格后,进行浓缩及灭活,通过接种12日龄鹅胚进行灭活检验;灭活检验合格后进行GPV灭活疫苗的配制及乳化,获得GPV灭活疫苗,对其进行物理性状、无菌检验及安全性检验;将检验合格的GPV灭活疫苗按经典免疫程序免疫产蛋鸡,当高免鸡蛋卵黄液的GPV IgY琼扩抗体效价≥1:64时,对其进行除脂、提取和灭活,制备出抗H株GPV IgY。（3）抗H株GPV IgY的质量评价通过监测GPV IgY的琼扩抗体效价对GPV IgY的理化特性（温度、酸碱度、胃蛋白酶的作用时间、冻融次数）进行评价;通过GPV IgY单次单剂量、重复单剂量和单次大剂量皮下注射3日龄雏鹅及小白鼠的安全性试验,观察雏鹅和小白鼠的健康状况,局部及全身反应情况对GPV IgY的安全性进行评价;通过不同琼扩抗体效价和不同剂量的GPV IgY对GPV强毒攻毒24 h雏鹅的治疗试验、对GPV感染不同时长和不同日龄雏鹅的治疗试验,依据雏鹅治愈率,对GPV IgY治疗效果进行评价;用不同琼扩抗体效价和不同免疫剂量的GPV IgY对雏鹅皮下接种,24 h后用GPV强毒攻毒,依据雏鹅保护率进行预防效果评价;同类产品免疫3日龄雏鹅,依据雏鹅保护率与治愈率,评价GPV IgY与同类产品的差异。通过物理性状、无菌检验、支原体检验、GPV IgY琼扩抗体效价监测及对雏鹅攻毒保护率监测,确定GPV IgY的储存温度和时间。试验结果表明:（1）GPV的分离鉴定结果分离的病毒接种雏鹅,呈现与GP一致的临床症状和病理剖检变化;接种鹅胚,可在鹅胚中增殖,且为非血凝性感染病毒;AGP显示,从雏鹅和鹅胚分离的病毒液与GP阳性血清之间出现沉淀线;鹅胚中和试验证明,病毒液能被GP阳性血清中和,中和后的病毒液接种鹅胚不引起死亡;电镜下观察,H株病毒粒子具有典型的细小病毒特征;H株鹅胚和雏鹅传代培养F6～F10代,毒价最高且稳定,病毒的ELD50和LD50分别大于10-5.0/0.2 m L和10-4.0/0.2m L;以分离到的H毒株分别接种3日龄、10日龄、20日龄雏鹅,其致病性随雏鹅日龄增大而减弱;分离的病毒在56℃3 h保持其感染性,能够抵抗乙醚、氯仿、胰蛋白酶和酸性条件（p H3.0）的作用;分离的病毒液细菌、支原体和外源病毒检查均为阴性,证明H株病毒纯净;PCR核酸检测病毒约在500 bp处出现特异性DNA条带,DNA大小与GPV相符;上述结果表明,分离的病毒符合GP生物学特性,该病毒为GPV（命名为H株）。以PCR扩增出的VP3基因,与参考毒株的VP3基因序列对比,核苷酸的同源性在95.9%～99.1%之间,氨基酸同源性为97.9%～99.6%之间;基因进化树分析表明,H株与在黑龙江省分离的SP、ZZ、ZD、DQ、JX等毒株亲缘关系较与GD（广东）、YG（扬州）等毒株近。（2）GPV IgY的制备结果GPV H株灭活疫苗抗原无菌检验呈阴性、鹅胚液ELD50为10-5.22/0.2 m L、灭活检验鹅胚全部健活。GPV灭活疫苗的物理性状、无菌检验、安全检验均合格。用该GPV灭活疫苗免疫产蛋鸡,收集AGP≥1:64高免鸡蛋的卵黄液。高免卵黄液经酸化水1:8稀释、p H5.2、4℃作用15 h、1900 g离心20 min条件下除脂;酸化水-1.5%辛酸-33%硫酸铵提取;终浓度0.05%甲醛溶液经20～25℃灭活24 h,对GPV IgY的琼扩抗体效价、蛋白浓度及蛋白纯度均无显着影响,确定上述除脂、提取和灭活条件为最佳工艺。（3）GPV IgY的质量评价结果上述制备的抗H株GPV IgY在60℃以下作用2 h,GPV IgY琼扩抗体效价与对照比不降低,当温度达到70℃以上,琼扩抗体效价显着降低,当温度达到75℃作用30 min时,琼扩抗体效价呈阴性;p H范围在4.0～11.0时,GPV IgY琼扩抗体效价与对照比差异不显着,p H值为3.0和12.0时,GPV IgY琼扩抗体效价显着低于对照组;当胃蛋白酶作用6 h,琼扩抗体效价无变化,作用8 h以上显着降低;GPV IgY经5次反复冻融,琼扩抗体效价与对照比无显着差异;GPV IgY免疫雏鹅和小白鼠均未出现任何注射局部和全身不良反应,精神状态良好,采食正常;GPV IgY对雏鹅治疗效果表明,琼扩抗体效价越高、注射剂量越大,雏鹅治愈率越高;病毒感染雏鹅的时间越长、雏鹅日龄越大,雏鹅治愈率越低;GPV IgY对雏鹅预防效果表明,同一注射剂量,琼扩抗体效价越高,雏鹅保护率越高,同一琼扩抗体效价,注射剂量增加,雏鹅保护率增高;GPV IgY免疫雏鹅后12 h～10 d,对雏鹅保护率高达88.00%以上,可有效抵抗病毒感染。差异对比试验表明,研制的GPV IgY的雏鹅保护率与治愈率均高于同类产品。（4）GPV IgY的储存条件2～8℃储存24个月,GPV IgY的物理性状、纯净性、琼扩抗体效价稳定,对雏鹅感染GPV的保护率达88.00%以上。（5）GPV IgY推荐使用剂量和方法对已感染GPV的雏鹅,选择GPV IgY琼扩抗体效价为1:16以上,1.0 m L/只;对未感染雏鹅进行紧急预防免疫,0.5 m L/只,皮下注射,对GPV感染的治愈率和保护率均达80.00%。
袁航,谢寒冰,陈安珍,王海英[2]（2019）在《清火片标准中检测方法的提高与修订研究》文中进行了进一步梳理目的:提高清火片的质量标准。方法:采用薄层色谱法,以靛玉红、大黄对照药材和大黄酸、薄荷脑及土大黄苷作为指标进行相关药味的定性鉴别及伪品大黄的检查;采用高效液相色谱法,以大黄素和大黄酚为指标成分进行大黄中总蒽醌和结合蒽醌的定量检测。结果:薄层色谱方法斑点清晰,分离度良好;大黄素和大黄酚分别在1.674～41.849μg·mL-1、2.594～64.860μg·mL-1浓度范围内呈良好的线性关系;游离大黄素、游离大黄酚、总大黄素和总大黄酚的平均加样回收率（n=6）分别为101.55%、102.59%、102.13%、101.91%。总蒽醌含量为0.383～1.115 mg·片-1,结合蒽醌含量为0.063～0.514 mg·片-1。结论:本实验所建立的定性定量方法快速准确、重现性良好,为完善清火片的质量标准提供了依据。
惠琦[3]（2014）在《靶向黑色素瘤重组免疫毒素MSH-PE38KDEL的表达、纯化及其靶向抗肿瘤生物学效应》文中进行了进一步梳理恶性黑色素瘤是恶性肿瘤中发病率增长最快的一种，目前仍没有找到治疗转移性黑色素瘤最为有效的方法。重组毒素由于具有特异性高、细胞毒性强的特点，有望成为黑色素瘤（辅助）治疗的有效方法之一，特别是对转移性黑色素瘤的治疗可能是最好的方式。本研究利用恶性黑色素瘤细胞表面MC1R的结合位点为正常细胞及其它肿瘤的几十倍的巨大差异，并利用促黑色素细胞激素（Melanophore-stimulating hormone, α-MSH）可特异性的与恶性黑色素瘤表面的MC1R结合的特性，将α-MSH作为恶性黑色素瘤特异的靶向载体；将绿脓杆菌外毒素PE作为免疫毒素的毒性部分用于杀伤靶细胞，构建了重组毒素MSH-PE38KDEL，以基因工程方式表达黑色素瘤靶向免疫毒素。重组毒素MSH-PE38KDEL的构建与表达。本研究通过生物信息学分析，优化MSH与PE40的链接Linker，确保各自的结构与功能不受影响；然后对PE40进行修饰，降低其免疫原性（PE38），并增加其活性（PE38KDEL）；构建了MSH-PE38KDEL基因，将其连接到pET28a、pHis1525表达载体上，构建了pET28a-MSH-PE38KDEL、 pHis1525-MSH-PE38KDEL重组质粒，分别在Rosegami、WH320表达宿主菌内进行了表达，经SDS-PAGE分析及活性测定，最终筛选了高表达且具有生物活性的重组质粒pET28a-MSH-PE38KDEL。将序列鉴定正确的重组质粒转化入Rosetta-gamiTM2（DE3），IPTG诱导目的蛋白表达。以SDS-PAGE对表达产物进行鉴定。同时用凝胶成像分析系统配套软件对MSH-PE38KDEL融合蛋白的表达量进行分析，证明其表达量可占全菌体的10%。重组毒素MSH-PE38KDEL的纯化。利用Western blot对超声破碎后菌体进行分析证明融合蛋白为可溶性表达。对表达后蛋白采用了菌体超声破碎、离心、疏水层析、离子交换及分子筛层析等纯化手段， SDS-PAGE分析MSH-PE38KDEL的纯度，其纯度可达90%以上。重组毒素MSH-PE38KDEL的体外抗黑色素瘤活性。采用α-MSH受体高表达的人黑色素瘤A875细胞及鼠黑色素瘤B16细胞进行了体外生物活性试验，同时以α-MSH受体低表达的鼻咽癌细胞CNE、乳腺癌细胞MCF及人正常细胞2BS做对照，证明其靶向杀伤作用。MTT检测MSH-PE38KDEL对黑色素瘤细胞A875及B16的杀伤作用在85%以上，而对人正常细胞2BS无杀伤作用。重组毒素MSH-PE38KDEL的体内抗黑色素瘤活性。以鼠黑色素瘤B16细胞在NIH/nu裸鼠体内建立黑色素瘤高转移动物模型。采用了瘤周围注射及静脉注射两种给药途径，对荷瘤小鼠进行治疗。结果显示以MSH-PE38KDEL1.1mg/只连续注射10天，可显着抑制肿瘤生长，其抑瘤率＞90%，且瘤周注射组肿瘤消失率为30%，静脉注射组肿瘤消失率为40%。病理切片HE染色结果显示MSH-PE38KDEL有效抑制了黑色素瘤B16细胞的肝内转移；电镜观察肝脏超微结构结果显示，MSH-PE38KDEL抑制了黑色素瘤B16细胞对机体细胞的破坏作用。重组毒素MSH-PE38KDEL在体内具有明显的抗黑色素瘤的效应，毒副作用低，病理及电镜结果显示对实质脏器均未见损伤。MSH-PE38KDEL有望成为靶向治疗黑色素瘤的候选药物。
马西亚[4]（2014）在《组织工程人角膜内皮的体外重建及其动物移植试验》文中研究说明人角膜内皮层（HCE）由单层的六角形人角膜内皮细胞（HCE细胞）镶嵌而成，是前房房水和角膜基质之间的渗漏性屏障，HCE细胞质膜上所拥有的诸多膜运输蛋白通过发挥“泵”功能使整个角膜处于半脱水状态，在维持角膜正常厚度和其透明性进而保障眼睛发挥正常视功能方面具有不可替代的作用。遗憾的是，成人的HCE细胞丧失了增殖能力，而且数量还在逐年减少，HCE单层完整性的维持只能靠邻近HCE细胞的扩大和移行来实现。一旦受到病原体感染、机械损伤和非生理性胁迫等，HCE细胞死亡的速率更快，轻者会造成不可逆角膜病变——角膜内皮功能失代偿（corneal endothelial dysfunction），重者将会致盲——角膜内皮盲（primary corneal endotheliopathy），角膜内皮病盲在因角膜病变所导致的视力障碍中位于第二位。角膜移植是目前治疗角膜内皮病盲的唯一办法，因HCE异常仅仅是由于HCE细胞数量不足造成的，故绝大多数角膜内皮病盲患者均可通过角膜移植而治愈，但由于捐献角膜数量的高度匮乏，致使可用于角膜移植的供体角膜材料严重不足，众多角膜内皮病盲患者无法通过角膜移植重见光明。目前，组织工程人角膜内皮（tissue-engineered human corneal endothelium,TE-HCE）被公认为是治疗角膜内皮病盲的天然HCE的等效替代物，已成为广大角膜内皮病盲患者恢复视力和复明的唯一希望。但迄今为止，仍没有可用于临床HCE移植的TE-HCE产品问世。本文在前期研究工作的基础上，利用表型、核型和功能蛋白表达正常且没有致瘤性的人角膜内皮单克隆细胞株细胞（monoclonal human corneal endothelial cells, mcHCE细胞）为种子细胞，以理化性能正常、安全性高且生物相容性理想的薄化去上皮层修饰羊膜（modifieddenuded-epithelium amniotic membrane, mdAM）为载体支架，在体外重建出了形态和组织结构正常的TE-HCE，并利用家猫和猕猴进行了动物角膜的穿透性后板层角膜移植试验，旨在获得可使移植动物角膜长期维持透明的TE-HCE，为可用于临床HCE移植的TE-HCE新产品的生产和临床应用奠定基础。用于TE-HCE体外重建的种子细胞为来自非转染无致瘤性HCE细胞系（utHCEC01）的第38代mcHCE细胞。在用作种子细胞开展TE-HCE体外重建之前，分别对其细胞属性、功能蛋白的表达以及致瘤性进行了检测和鉴定。检测结果显示，第38代mcHCE细胞呈近似六角形的多边形内皮样细胞形态，透明度高，形态大小均一，细胞群体倍增时间为41.07h，染色体数目为2n=46条，表明该细胞株细胞的生长状态良好，分裂增殖能力旺盛；第38代mcHCE细胞仍维持有标志蛋白——人血管内皮生长因子受体-2（Flk1）和人IV型胶原蛋白的阳性表达，表明该细胞株细胞保持有HCE细胞的固有属性；细胞连接蛋白的免疫荧光检测结果显示，第38代mcHCE细胞仍保持有紧密连接蛋白1（ZO-1）、N-钙粘蛋白（N-Cadherin）、间隙连接蛋白-43（CX-43）和整联蛋白αv/β5（Integrinαv/β5）的阳性表达，表明该细胞株细胞具有在细胞间以及细胞与细胞外基质间形成细胞连接的潜能；第38代mcHCE细胞还维持有细胞膜运输蛋白——人Na+/K+ATPase、人氯离子通道蛋白-2（hCLCN2）、 Na+/HCO3-协同转运蛋白（hSLC4）和人水孔通道蛋白-1（AQP1）的阳性表达，表明该细胞株细胞具有发挥正常膜运输功能的潜能；第38代mcHCE细胞在裸鼠皮下接种后没有肿瘤出现，证实该细胞株细胞没有致瘤性。综合上述检测和鉴定结果，证明第38代mcHCE细胞形态结构、属性和功能正常，且没有致瘤性，可以被用作TE-HCE体外重建的种子细胞。本文利用胰酶-EDTA倒置消化法对去上皮层羊膜进行薄化处理，再使用专用信号分子包被，制得薄化mdAM。在用作载体支架进行TE-HCE体外重建之前，分别对其进行理化性质、生物学性质以及其与第38代mcHCE细胞的生物相容性进行检测和评价。结果显示，薄化mdAM只有基底膜和致密层组成，且上皮面光滑平整；厚度均一，平均厚度约为28.47μm；透明度和透光率良好，可见光区的透光率在90%以上；重金属含量符合国家对可吸收植入型医用生物材料的要求。薄化mdAM无热源和眼刺激性；皮下植入后无炎症反应且降解速度比瑞济生物羊膜快；且与第38代mcHCE细胞具有良好的生物相容性。综上所述，薄化mdAM具有良好的理化和生物学性能，安全性高，且与mcHCE细胞生物相容性良好，可以被用作TE-HCE体外重建的载体支架。本文以上述mcHCE细胞为种子细胞、以薄化mdAM为载体支架，用含20%FBS的DMEM/F12（1:1）完全培养液，在37℃、5%CO2的培养条件下进行了TE-HCE的体外重建。每24h茜素红染色结果显示，重建96h后种子细胞便可在载体支架上形成完整连续的细胞层，细胞与细胞间着色清晰，细胞呈近似六角形内皮样形态，细胞密度为3487±99.04个/mm2；组织结构和超微结构鉴定结果显示，体外重建96h所得的TE-HCE具有完整连续的角膜内皮细胞单层，多角形细胞中具有一定数量的线粒体和内质网，细胞与细胞间、细胞与载体支架间具有多处细胞连接样结构，与正常HCE的组织结构和超微结构相似。免疫荧光检测结果显示，体外重建96h所得的TE-HCE仍维持有细胞紧密连接蛋白1（ZO-1）、N-钙粘蛋白（N-Cadherin）、间隙连接蛋白-43（CX-43）和整联蛋白αv/β5（Integrinαv/β5）的阳性表达，表明体外重建96h所得的TE-HCE具有形成紧密连接复合体进而形成前房房水与角膜基质间渗漏性屏障的潜能。综上所述，体外重建96h所得TE-HCE具有与正常HCE相似的形态特征、组织结构和超微结构，可以作为正常HCE的等效替代物，被认为可以用于角膜内皮病盲的临床治疗。为了进一步评价所重建的TE-HCE在体内是否具有正常HCE的生理功能。本文选用自身角膜内皮细胞没有增殖能力的家猫和猕猴作为实验动物。首先撕除实验眼的后弹力层和内皮层，然后进行带DiI荧光标记的TE-HCE和mdAM（对照组）的后板层角膜移植。移植后用裂隙灯显微镜、角膜测厚仪和眼压计跟踪观察其透明度、厚度和眼压的变化情况，并在家猫移植104天，猕猴移植181天时取材进行DiI荧光标记、茜素红染色及细胞密度、组织结构和超微结构的离体鉴定，此外家猫还进行了房水蛋白变化的鉴定。结果显示，家猫和猕猴TE-HCE移植眼的角膜均未出现水肿和排斥等不良反应，角膜厚度逐渐下降，并逐渐恢复透明；而mdAM实验眼，角膜水肿严重且不透明；但TE-HCE移植眼、mdAM移植眼和正常对照眼的眼压在观察期间均在上下波动，没有明显的相关性。离体检测结果显示，家猫和猕猴TE-HCE移植眼角膜中央移植区的内皮细胞均带有DiI荧光标记，且形态大小均一，多为六角形镶嵌内皮样形态，细胞密度分别为2573.33±0.59个/mm2和2780.00±0.77个/mm2，与他们各自正常对照眼的形态和细胞密度相近，而mdAM移植眼角膜中央移植区均没有内皮细胞，这表明，家猫和猕猴TE-HCE移植眼角膜中央移植区的内皮细胞均来自所植入的TE-HCE，且具有与正常对照眼相似的形态特征和细胞密度。家猫和猕猴TE-HCE移植眼角膜的组织结构和超微结构与正常对照眼角膜相似，但猕猴TE-HCE移植眼角膜在移植181天后HCE细胞仍没有分泌形成新的后弹力层。家猫TE-HCE移植眼和正常对照眼房水蛋白的二维电泳的分析结果显示，TE-HCE移植眼与正常对照眼房水蛋白分离斑点的重复性较好，匹配的Corr系数达到0.8以上。综上所述，TE-HCE在家猫和猕猴体内具有正常HCE的生理功能，能够维持家猫和猕猴移植角膜的正常厚度和长期透明性。综上所述，利用表型、核型和功能蛋白表达正常且没有致瘤性的mcHCE细胞为种子细胞，以理化性能正常、安全性高且生物相容性理想的薄化mdAM为载体支架，在体外重建96h后即可获得形态特征和组织结构近似正常HCE的TE-HCE，且移植到自身角膜内皮细胞无增殖能力且撕除后弹力层和内皮层的家猫和猕猴角膜上后，能够重塑出形态特征、细胞密度、组织结构和超微结构与正常HCE基本一致的角膜内皮细胞单层，且能够维持家猫和猕猴移植角膜的正常厚度及长期透明性。这些研究结果表明该TE-HCE可以作为天然HCE的等效替代物，用于角膜内皮病盲的临床治疗，为众多角膜病盲患者重建光明带来希望，这在再生医学领域具有重要意义。
彭越[5]（2008）在《苦参碱葡萄糖注射液细菌内毒素检查方法研究》文中提出苦参碱葡萄糖注射液现行质量标准为国家食品药品监督管理局批准的试行标准,根据该试行标准规定,该产品的热原检查用家兔法。苦参碱葡萄糖注射液为苦参碱与葡萄糖的灭菌水溶液,适用于慢性肝炎的氨基转移酶及胆红素异常。由于苦参碱葡萄糖注射液有一定的刺激性,在进行热原实验时常引起家兔的躁动,容易对实验结果产生影响。故本研究的目的就是参照药品细菌内毒素检查的实验设计对以细菌内毒素检查法取代热原检查法的可行性进行实验研究,并建立苦参碱葡萄糖注射液细菌内毒素检查方法,为该产品的质量标准转正提供数据支持。细菌内毒素检查法是利用鲎试剂来检测或量化由革兰阴性菌产生的细菌内毒素,以判断供试品中细菌内毒素的限量是否符合规定的一种方法。细菌内毒素检查包括两种方法,即凝胶法和光度测定法。后者包括浊度法和显色基质法。自20世纪60年代鲎血凝集机制的发现和鲎实验方法的建立,引起了各国药政管理部门的极大兴趣,并使细菌内毒素检查法在药品的热原限量控制中得到了广泛的应用和发展。特别是《中国药典》2005年版细菌内毒素检查法正式收载,使细菌内毒素定量检查法在我国得到肯定、应用和推广,它还将有力地推动细菌内毒素检查法在我国的新进展。本研究从细菌内毒素基础知识着手,介绍了细菌内毒素的概念、化学结构及化学组份、生物活性、耐热性、致病机理及作用机理等基础理论。参照《中国药典》2005年版二部附录XI E细菌毒素检查法的要求,通过试验摸索,该产品采用凝胶法在稀释2倍后不干扰细菌内毒素试验;采用动态比浊法,对该产品稀释液进行定量检测,在8倍稀释时无干扰作用,从而确立了苦参碱葡萄糖注射液细菌内毒素检查方法。同时对细菌内毒素检查法的常见可能影响因素进行了分析,并对采取的相应对策进行了摸索、探讨。最后研究结果建立的细菌内毒素检查法快速、简便、重复性好、灵敏度高,苦参碱葡萄糖注射液采用细菌内毒素检查法代替热原检查法,方法可行,并能进行定量检测。
常菁[6]（2008）在《可吸收壳聚糖复合膜的制备及预防肌腱粘连功能的实验研究》文中研究指明目的:在手外科领域中,肌腱粘连是肌腱损伤后常见的并发症,其防治一直是外科学界普遍关注的问题。肌腱粘连是指肌腱损伤修复过程中周围组织的增生和侵入,一定的粘连有利于断端获得血管输送血液的营养,同时还可促使成纤维细胞接触肌腱而发挥修复作用。但粘连过多会使修复后的肌腱功能受到限制,严重影响手部的各种运动功能,往往需要通过手术来松解粘连的肌腱,改善肌腱的滑动功能。精细的手术操作和早期的功能锻炼虽可减轻肌腱粘连的程度,但仍不能完全防止粘连的形成,因此,防止粘连是手外科领域至今尚未能解决的难题。由于肌腱的愈合需要有滑液的营养,因此单纯的物理阻隔会影响肌腱的愈合,这就需要找到一种既不影响肌腱愈合,又能阻止其与周围组织粘连的适合材料。壳聚糖是自然界唯一带正电荷多糖,其特有的理化性质已成为医药界及生物医学领域的研究热点。研究证明,壳聚糖具有良好的成胶成膜性、生物可降解性、降解速度可控性,在医用材料领域应用前景广阔。本实验研究旨在制备一种可预防粘连的壳聚糖复合膜,并对其功能、作用机理及应用前景进行探讨。方法:1、实验所需壳聚糖及其衍生物等原料的制备、纯化和性质评价。2、确定复合膜各组分比例,以1,4丁二醇双缩水甘油醚为交联剂,流延法制备羧甲基壳聚糖、N-乙酰化壳聚糖、羟丙基壳聚糖复合膜（CM-C-HP复合膜）,运用扫描电镜、红外光谱、细胞培养、体内植入等方法对复合膜的理化性质、生物相容性、生物降解性进行系统评价。3、以鸡为实验模型,切除趾浅屈肌腱,横断趾深屈肌腱,形成趾深屈肌腱断裂动物模型。设置实验组、阳性对照组、阴性对照组和正常对照组,运用生物力学测试、组织学检测、彩超声像图等方法对复合膜预防肌腱粘连作用进行评价。4、利用MTT、透射电镜、凝胶电泳、流式细胞仪等测定方法研究羧甲基壳聚糖和羟丙基壳聚糖共混糖溶液对L929成纤维细胞生长的影响,从复合膜抑制成纤维细胞生长的角度探讨复合膜预防肌腱粘连的机理。结果:1、制备出的材料样品符合医用材料要求,无菌无热原,生物相容性好,生物降解性可控。综合评价各材料多方面性质,选择乙酰化壳聚糖、羧甲基壳聚糖和羟丙基壳聚糖作为制备复合膜的基本原料。2、CM-C-HP复合膜具有良好的柔韧度、机械强度、通透性,无溶血现象,无细胞毒性和全身急性毒性,对L929成纤维细胞生长有明显抑制作用,体内植入实验显示了良好的生物相容性和生物可降解性,具有比壳聚糖更为优良的手术缝合可操作性。3、在以鸡为肌腱断裂模型的预防粘连实验中,CM-C-HP复合膜组肌腱吻合口周围的粘连带、肉芽组织、胶原纤维及成纤维细胞均明显少聚乳酸薄膜组,肌腱活动度生物力学测试结果明显优于阴性对照组,说明CM-C-HP复合膜具有良好的防粘连作用。4、L929细胞经不同浓度羧甲基壳聚糖和羟丙基壳聚糖共混糖溶液培养24h、48h和96h后,测定MTT、透射电镜、凝胶电泳、细胞周期等指标,结果表明共混糖溶液对成纤维细胞生长有明显抑制作用,细胞周期发生中断,细胞被阻滞于G0-G1期。该部分内容提示复合膜通过抑制成纤维细胞生长来预防肌腱粘连,从细胞和分子水平初步探讨了复合膜预防肌腱粘连的机理。结论:本研究中的CM-C-HP复合膜作为预防粘连的生物膜材料,柔软光滑,机械强度高,具有良好的通透性、生物相容性、生物可降解性、降解速度可控性及手术缝合可操作性,预防粘连作用显着,效果优于聚乳酸薄膜产品,而且取材方便,价格低廉,是一种具有广阔应用前景的预防粘连复合膜。
孙雪峰[7]（2007）在《乳炎康粉针剂的制备及药效学研究》文中进行了进一步梳理本研究参照注射粉针剂的相关标准,以阿米卡星和替米考星为主药,制备出乳炎康粉针剂,依照粉针剂的一般质量要求进行质量检查,并进行了稳定性试验、安全性试验以及药效学试验,以期为临床应用提供依据。1.处方设计以无乳链球菌、停乳链球菌、金黄色葡萄球菌、致病性大肠埃希菌等4种奶牛乳房炎常见病原菌为试验菌,采用纸片扩散法确定阿米卡星与替米考星最佳配比为2:3。采用紫外分光光度计扫描,确定乳炎康粉针剂的附加剂为柠檬酸和柠檬酸钠,二者的最佳配比为7:3。无菌称取各药,按照比例进行混合,制备出乳炎康粉针剂。2.质量检查参照粉针剂的质量要求对乳炎康粉针剂分别进行无菌检查、热原检查、澄明度检查和酸碱度检查。结果显示乳炎康粉针剂水溶液pH在5.79～5.82之间,水溶液澄明度检查未检出可见异物,无热原,无菌检查符合要求。3.稳定性试验对乳炎康粉针剂分别进行高温、高湿、强光照射试验,结果表明,乳炎康粉针剂对光不敏感,但对高温和高湿环境敏感。在加速试验中,乳炎康粉针剂理化性质稳定,符合新药申报临床试验的要求。经典恒温试验估算出该制剂的有效期为2.1年;吸湿性研究表明乳炎康粉针剂的临界相对湿度为65.3%。4.安全性试验以肌肉刺激试验、黏膜试验、溶血性试验、急性毒性试验对乳炎康粉针剂进行安全性评价。试验结果表明,乳炎康粉针剂无刺激性、无溶血反应,对雏鸡的LD50为222.62 mg/kg。5.药效学试验以无乳链球菌、停乳链球菌、金黄色葡萄球菌、致病性大肠埃希菌等4种奶牛乳房炎常见病原菌为试验菌,测定乳炎康粉针剂对各菌的最小杀菌浓度和最小抑菌浓度,并与临床治疗奶牛乳房炎的常用药进行药效比较。体外抑菌效果结果表明,乳炎康粉针剂对各菌的效果优于硫酸卡那霉素,不及链霉素,与青霉素效果相当。对奶牛隐性乳房炎和临床型乳房炎的临床治疗效果表明,乳炎康粉针剂对隐性乳房炎及临床型乳房炎有效率均在80%以上,治愈率在60%以上,优于临床常用的青、链霉素和硫酸卡那霉素。
赵树臣[8]（2007）在《中药组方治疗奶牛子宫内膜炎的研究》文中研究指明奶牛子宫内膜炎是奶牛产后主要由于细菌感染而引起的常见产科疾病,给奶牛养殖业造成很大的经济损失,本研究旨在筛选有效治疗奶牛子宫内膜炎的中药组方并对其进行药效学研究。为了探讨产后奶牛子宫内主要存在的细菌和发生子宫内膜炎后的主要致病菌,本试验对黑龙江省各大奶牛场产后正常奶牛和患有子宫内膜炎的奶牛子宫分泌物进行采样（正常奶牛12头,患牛42头）后,分别在需氧和厌氧条件下进行培养,对病原菌进行了分离鉴定。从产后014d正常奶牛子宫中分离到细菌8种,其中产后59d检出的细菌数最多;从患病奶牛子宫内容物中分离到14种细菌,其中大肠杆菌、葡萄球菌、分泌属化脓菌、拟杆菌和梭菌等5种为主要的致病菌。为了了解这些病原菌对抗微生物药和部分中草药的敏感性,为临床上治疗奶牛子宫内膜炎提供重要依据,指导临床合理用药,进行了16种西药、11种单味中药及2个中药复方对患子宫内膜炎奶牛子宫内分离鉴定的致病菌的体外抑菌作用试验。结果表明,西药万古霉素、新霉素、土霉素、氟苯尼考和环丙沙星对分离出的主要致病菌均有较强的抑制作用,尤其以环丙沙星效果更为突出;中药以苦参、黄芩、鱼腥草、蒲公英、夏枯草和复方Ⅰ、Ⅱ的抑菌效果较好,而且复方Ⅰ、Ⅱ强于单味中草药的抑菌效果。采用正交法,筛选了治疗奶牛子宫内膜炎的中药组方,并采用试管二倍稀释法,通过体外抑菌试验评估了该组方对奶牛子宫内膜炎的5种主要致病菌的抑菌效果;进行了二甲苯对小鼠耳廓肿胀试验,甲醛对小鼠足跖肿胀试验和甲醛对小鼠致炎后足跖中PGE2含量测定等三组抗炎试验以检验该中药组方的抗炎效果;进行了中药组方对家兔眼结膜刺激性试验和豚鼠皮肤过敏性试验评价其有无刺激性和致敏性。试验结果表明,蒲公英、连翘、双花等8味中草药所组成的复方制剂具有显着的抑菌和抗炎作用,对黏膜有轻微的刺激性,无致敏性。采用子宫内灌注的方式对24头中国荷斯坦奶牛随机分成4组:对照组,仅注射30ml PBS;中药组方组,20ml 1g/ml中药组方煎液;LPS组,20ml PBS含100μg LPS;LPS+中药组方组,100μg+20g中药组方煎液,进行大肠杆菌LPS和中药组方治疗奶牛子宫内膜炎的临床药效学研究,结果表明:①LPS子宫内灌注后,子宫腔中嗜中性粒细胞的数量和活性显着增加,中药组方可增加其效果,但是单独应用中药组方粒细胞无显着变化。②LPS子宫内灌注后,外周血中IL-2、IL-6和TNF-α含量无显着性变化、IL-8含量短暂性增加后恢复正常;外周血中GSH-Px、SOD、MDA和T-AOC变化不显着。③中药组方子宫内灌注后,外周血中IL-2、IL-6、IL-8和TNF-α含量无显着性变化;外周血中GSH-Px、SOD活性在48h显着升高,而MDA和总抗氧化物T-AOC含量没有明显的变化。④中药组方和LPS联合应用对外周血中细胞因子和抗氧化系统间无明显的影响。治疗后不同组间动物的妊娠率分别为:对照组20%,中药组方组60%,大肠杆菌LPS组:66.7%,中药组方+大肠杆菌LPS组:80%,二者联合有协同作用。大肠杆菌LPS灌注到子宫内,作为一种免疫趋化剂,能够引起中性粒细胞大量向子宫腔内迁移,激活子宫防御机制,净化子宫内的感染。
聂严,赵晖,王国忠[9]（2002）在《《中华人民共和国兽药典》二○○○年版一部收载化学药品修订情况介绍》文中指出介绍了《中华人民共和国兽药典》二○○○年版 (一部 )对一九九○年版 (一部 )的修订情况。
雷宇[10]（2001）在《细菌内毒素检查法测定注射用硫酸链霉素热原的观察》文中认为目的 建立注射用硫酸链霉素的细菌内毒素检查方法。方法 参照《中国药典》 1995年版二部收载的细菌内毒素方法进行实验。结果 通过干扰实验证明 ,注射用硫酸链霉素对鲎试剂的凝集反应有干扰作用 ,但稀释后干扰消除 ,用灵敏度为 0 .12 5 EU· m l- 1 的鲎试剂检查细菌内毒素方法可行 ,有效。结论 可以用细菌内毒素检查法替代家兔法来控制注射用硫酸链霉素的质量。
二、细菌内毒素检查法测定注射用硫酸链霉素热原的观察（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、细菌内毒素检查法测定注射用硫酸链霉素热原的观察（论文提纲范文）
（1）抗H株小鹅瘟病毒卵黄抗体的研制与质量评估（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 1 前言 |
| 1.1 小鹅瘟病毒研究现状 |
| 1.1.1 小鹅瘟病毒及小鹅瘟病简介 |
| 1.1.2 小鹅瘟病毒的鉴定方法 |
| 1.2 小鹅瘟生物制剂研究进展 |
| 1.2.1 小鹅瘟病毒活疫苗 |
| 1.2.2 小鹅瘟病毒灭活疫苗 |
| 1.2.3 小鹅瘟病毒基因疫苗 |
| 1.2.4 小鹅瘟病毒重组活载体疫苗 |
| 1.2.5 小鹅瘟抗血清 |
| 1.2.6 小鹅瘟病毒卵黄抗体 |
| 1.3 卵黄抗体的研究进展 |
| 1.3.1 卵黄抗体的结构特点 |
| 1.3.2 卵黄抗体的提取方法 |
| 1.3.3 卵黄抗体的灭活方法 |
| 1.3.4 卵黄抗体应用 |
| 1.3.5 卵黄抗体的优势与展望 |
| 1.4 研究的目的和意义 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 主要仪器与设备 |
| 2.2 主要材料和试剂 |
| 2.3 试验方法 |
| 2.3.1 研究技术路线图 |
| 2.3.2 小鹅瘟病毒分离培养 |
| 2.3.3 小鹅瘟病毒的鉴定 |
| 2.3.4 小鹅瘟病毒灭活疫苗的制备及检验 |
| 2.3.5 小鹅瘟病毒卵黄抗体的制备 |
| 2.3.6 小鹅瘟病毒卵黄抗体质量评价 |
| 2.3.7 小鹅瘟病毒卵黄抗体储存条件的确定 |
| 2.4 试验数据分析及统计 |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 小鹅瘟病毒分离培养 |
| 3.1.1 小鹅瘟病毒在雏鹅分离培养结果 |
| 3.1.2 小鹅瘟病毒在鹅胚分离培养结果 |
| 3.2 小鹅瘟病毒鉴定 |
| 3.2.1 小鹅瘟病毒特异性试验结果 |
| 3.2.2 小鹅瘟病毒粒子超微结构观察结果 |
| 3.2.3 小鹅瘟病毒毒力测定 |
| 3.2.4 小鹅瘟病毒理化特性 |
| 3.2.5 小鹅瘟病毒的纯净性试验结果 |
| 3.2.6 小鹅瘟病毒核酸检测结果 |
| 3.2.7 小鹅瘟病毒VP3基因序列鉴定 |
| 3.3 小鹅瘟病毒灭活疫苗抗原的制备及成品检验 |
| 3.3.1 小鹅瘟病毒H株灭活疫苗制备抗原用病毒的检验 |
| 3.3.2 小鹅瘟病毒H株灭活疫苗检验 |
| 3.4 小鹅瘟病毒卵黄抗体的制备 |
| 3.4.1 产蛋鸡选择结果 |
| 3.4.2 高免鸡蛋的琼扩抗体效价监测结果 |
| 3.4.3 小鹅瘟病毒卵黄抗体除脂条件的确定 |
| 3.4.4 小鹅瘟病毒卵黄抗体提取方法的确定 |
| 3.4.5 小鹅瘟病毒卵黄抗体外源性病毒灭活方法确定 |
| 3.5 小鹅瘟病毒卵黄抗体的质量评价 |
| 3.5.1 小鹅瘟病毒卵黄抗体的理化特性 |
| 3.5.2 小鹅瘟病毒卵黄抗体的安全性评价 |
| 3.5.3 小鹅瘟病毒卵黄抗体对人工感染雏鹅的治疗效果评价 |
| 3.5.4 小鹅瘟病毒卵黄抗体对雏鹅注射后攻毒的预防效果评价 |
| 3.5.5 小鹅瘟病毒卵黄抗体与试验选用的同类产品差异试验 |
| 3.6 小鹅瘟病毒卵黄抗体储存条件的确定 |
| 3.6.1 储存温度及时间对小鹅瘟病毒卵黄抗体物理性状的影响 |
| 3.6.2 储存温度及时间对小鹅瘟病毒卵黄抗体纯净性的影响 |
| 3.6.3 储存温度及时间对小鹅瘟病毒卵黄抗体琼扩抗体效价的影响 |
| 3.6.4 储存温度及时间对雏鹅攻毒预防效果的影响 |
| 4 讨论 |
| 4.1 小鹅瘟病毒的分离鉴定及生物学特性分析 |
| 4.2 小鹅瘟病毒H株VP3基因序列分析 |
| 4.3 影响HA与HI效果的因素分析 |
| 4.4 小鹅瘟病毒灭活疫苗的制备 |
| 4.5 鸡群的选择管理与高免蛋黄收集 |
| 4.6 小鹅瘟病毒卵黄抗体除脂条件的确定及主要影响因素分析 |
| 4.7 最优小鹅瘟病毒卵黄抗体提取方法确定及分析 |
| 4.7.1 辛酸终浓度对小鹅瘟病毒卵黄抗体的影响 |
| 4.7.2 小鹅瘟病毒卵黄抗体提取方法的对比分析及验证 |
| 4.7.3 小鹅瘟病毒卵黄抗体的琼扩抗体效价与蛋白浓度的相关性分析 |
| 4.8 小鹅瘟病毒卵黄抗体灭活条件的确定 |
| 4.9 小鹅瘟病毒卵黄抗体的质量评价 |
| 4.9.1 小鹅瘟病毒卵黄抗体安全性评价 |
| 4.9.2 小鹅瘟病毒卵黄抗体治疗效果评价 |
| 4.9.3 小鹅瘟病毒卵黄抗体的预防效果评价 |
| 4.9.4 小鹅瘟病毒卵黄抗体试验选用的同类产品差异 |
| 4.10 储存条件的确定 |
| 5 结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 攻读博士学位期间发表的学术论文 |
| 作者简历 |
（2）清火片标准中检测方法的提高与修订研究（论文提纲范文）
| 1 仪器与试剂 |
| 1.1 仪器 |
| 1.2 试剂 |
| 2 方法与结果 |
| 2.1 薄层鉴别 |
| 2.1.1 大青叶的薄层色谱鉴别[2-4] |
| 2.1.2 大黄的薄层色谱鉴别[2] |
| 2.1.3 薄荷脑的薄层色谱鉴别[5] |
| 2.2 伪品大黄的薄层色谱检查[6] |
| 2.3 大黄中大黄素和大黄酚的含量测定[7～10] |
| 2.3.1 色谱条件与系统适用性试验 |
| 2.3.2 溶液的制备 |
| 2.3.2.1 对照品溶液 |
| 2.3.2.2 供试品溶液 |
| 2.3.2.3 空白阴性样品溶液 |
| 2.3.3 标准曲线及线性范围 |
| 2.3.4 精密度试验 |
| 2.3.5 稳定性试验 |
| 2.3.6 重复性实验 |
| 2.3.7 回收率试验 |
| 2.3.8 样品含量测定 |
| 3 讨论 |
| 3.1 大青叶薄层色谱考察 |
| 3.2 大黄薄层色谱考察 |
| 3.3 展开剂考察 |
| 3.4 小结 |
（3）靶向黑色素瘤重组免疫毒素MSH-PE38KDEL的表达、纯化及其靶向抗肿瘤生物学效应（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 英文缩略词表 |
| 第一篇 文献综述 |
| 第1章 黑色素瘤研究进展 |
| 1.1 我国黑色素瘤发生情况 |
| 1.2 恶性黑色素瘤的转移途径及发生机制 |
| 1.3 黑色素瘤的治疗 |
| 1.4 免疫毒素用于黑色素瘤治疗的展望 |
| 第2章 免疫毒素的研究进展 |
| 2.1 免疫毒素的概念及策略 |
| 2.2 免疫毒素的研究历程 |
| 2.3 重组免疫毒素靶向分子的选择 |
| 2.4 重组免疫毒素毒素配体的设计及作用机制 |
| 2.5 重组免疫毒素在肿瘤治疗中的研究 |
| 2.6 重组免疫毒素治疗实体瘤的研究进展 |
| 2.7 重组免疫毒素研发及应用的瓶颈 |
| 第3章 PE 类重组免疫毒素的研究进展 |
| 3.1 PE 的结构与功能 |
| 3.2 PE 的细胞毒性机制 |
| 3.3 PE 衍生物 |
| 3.4 PE 衍生物基因重组免疫毒素的研究进展 |
| 3.5 PE 类毒素在肿瘤导向中的应用 |
| 第4章 促黑色素细胞激素及其受体研究进展 |
| 4.1 促黑色素细胞激素及其受体 |
| 4.2 以促黑色素细胞激素为靶向载体的重组毒素的研究进展 |
| 4.3 促黑色素细胞激素及其受体在人类疾病中的作用 |
| 4.4 促黑色素细胞激素为导向的研究策略 |
| 第二篇 研究内容 |
| 第1章 MSH-PE38KDEL 在巨大芽孢杆菌中的表达及活性测定 |
| 1.1 材料与方法 |
| 1.2 结果 |
| 1.3 讨论 |
| 1.4 小结 |
| 第2章 MSH-PE38KDEL 在大肠杆菌中的表达及活性测定 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.2 结果 |
| 2.3 讨论 |
| 2.4 小结 |
| 第3章 MSH-PE38KDEL 的表达、纯化及鉴定 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.2 结果 |
| 3.3 讨论 |
| 3.4 小结 |
| 第4章 MSH-PE38KDEL 对黑色素瘤细胞生长的抑制作用 |
| 4.1 材料与方法 |
| 4.2 结果 |
| 4.3 讨论 |
| 4.4 小结 |
| 第5章 MSH-PE38KDEL 对鼠黑色素瘤模型的治疗试验 |
| 5.1 材料与方法 |
| 5.2 结果 |
| 5.3 讨论 |
| 5.4 小结 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 导师简介 |
| 作者简介 |
| 攻读学位期间发表的学术论文及取得的成果 |
| 致谢 |
（4）组织工程人角膜内皮的体外重建及其动物移植试验（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一章 组织工程人角膜内皮的研究综述 |
| 1 角膜内皮与角膜内皮异常 |
| 1.1 角膜内皮的形态特征及超微结构 |
| 1.2 角膜内皮的细胞密度 |
| 1.3 角膜内皮细胞的增殖能力 |
| 1.3.1 不同物种的角膜内皮细胞增殖力 |
| 1.3.2 不同年龄段的角膜内皮细胞增殖力 |
| 1.3.3 角膜中央和周边的内皮细胞增殖力 |
| 1.3.4 角膜内皮细胞增殖力的体内调控 |
| 1.4 角膜内皮的生理功能 |
| 1.4.1 角膜内皮的渗漏屏障功能 |
| 1.4.2 角膜内皮的主动液泵功能 |
| 1.5 角膜内皮异常 |
| 2 组织工程人角膜内皮的诞生 |
| 3 组织工程人角膜内皮种子细胞的研究概述 |
| 3.1 成体干细胞（前体细胞） |
| 3.2 永生化人角膜细胞系 |
| 3.3 非转染的人角膜内皮细胞 |
| 4 组织工程人角膜内皮载体支架的研究概述 |
| 4.1 天然生物膜 |
| 4.1.1 脱细胞角膜基质 |
| 4.1.2 后弹力层膜 |
| 4.1.3 晶状体前囊膜 |
| 4.1.4 羊膜 |
| 4.2 生物大分子 |
| 4.2.1 明胶 |
| 4.2.2 胶原 |
| 4.2.3 丝素蛋白 |
| 4.3 合成材料 |
| 4.4 生物大分子与合成材料共混膜 |
| 4.5 细胞片层 |
| 5 组织工程人角膜内皮结构和功能的评价方法 |
| 5.1 组织工程人角膜内皮结构的体外评价方法 |
| 5.2 组织工程人角膜内皮功能的体外评价方法 |
| 5.3 组织工程人角膜内皮功能的在体评价方法 |
| 5.3.1 移植动物模型的选择 |
| 5.3.2 移植后在体评价方法 |
| 5.3.3 移植后离体评价方法 |
| 6 组织工程角膜内皮体外重建中的问题与难点 |
| 7 本文的研究目的与意义 |
| 第二章 组织工程人角膜内皮种子细胞的培养及其鉴定 |
| 1 材料与用品 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.2 实验仪器 |
| 1.3 实验药品 |
| 1.5 常用溶液的配方 |
| 1.5.1 D-Hanks 平衡盐溶液 |
| 1.5.2 PBS 缓冲液 |
| 1.5.3 胰酶-EDTA 消化液 |
| 1.5.4 吉姆萨染液（母液） |
| 2 方法 |
| 2.1 单克隆人角膜内皮细胞的体外培养 |
| 2.1.1 单克隆人角膜内皮细胞的复苏 |
| 2.1.2 单克隆人角膜内皮细胞的体外扩增培养 |
| 2.2 单克隆人角膜内皮细胞的生长特性检测 |
| 2.3 单克隆人角膜内皮细胞的染色体标本制作与组型分析 |
| 2.4 单克隆人角膜内皮细胞的免疫化学检测 |
| 2.5 单克隆人角膜内皮细胞的致瘤性检测 |
| 3 结果 |
| 3.1 单克隆人角膜内皮细胞的形态特征 |
| 3.2 单克隆人角膜内皮细胞的生长特性 |
| 3.3 单克隆人角膜内皮细胞的染色体核型 |
| 3.4 单克隆人角膜内皮细胞标志蛋白的表达 |
| 3.5 单克隆人角膜内皮细胞功能蛋白的表达 |
| 3.5.1 单克隆人角膜内皮细胞连接蛋白的表达 |
| 3.5.2 单克隆人角膜内皮细胞膜运输蛋白的表达 |
| 3.6 单克隆人角膜内皮细胞的致瘤性 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 第三章 薄化去上皮层修饰羊膜载体支架的制备及其鉴定 |
| 1 材料与用品 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.2 实验仪器 |
| 1.3 实验药品 |
| 1.4 常用溶液的配方 |
| 1.4.1 PBS 缓冲液（见第二章） |
| 1.4.2 D-Hanks 平衡盐溶液（见第二章） |
| 1.4.3 胰酶-EDTA 消化液（见第二章） |
| 1.4.4 5 mg/mL MTT 溶液 |
| 1.4.5 浸提液Ⅰ |
| 1.4.6 浸提液Ⅱ |
| 1.4.7 0.2%茜素红液 |
| 1.4.8 石蜡切片及 HE 染色所需溶液配制 |
| 2 方法 |
| 2.1 新鲜羊膜的制备与保存 |
| 2.1.1 胎盘的取材 |
| 2.1.2 新鲜羊膜的剥离及清洗 |
| 2.1.3 新鲜羊膜的保存 |
| 2.2 去上皮层羊膜的制备 |
| 2.3 去上皮层羊膜的薄化处理 |
| 2.4 薄化去上皮层羊膜的修饰 |
| 2.5 薄化去上皮层修饰羊膜的理化性质检测 |
| 2.5.1 厚度检测 |
| 2.5.2 透明度检测 |
| 2.5.3 透光率检测 |
| 2.5.4 重金属检测 |
| 2.6 薄化去上皮层修饰羊膜的生物学性质检测 |
| 2.6.1 薄化去上皮层修饰羊膜的石蜡切片及 HE 染色 |
| 2.6.2 薄化去上皮层修饰羊膜的热源性检测 |
| 2.6.3 薄化去上皮层修饰羊膜的细菌内毒素检测 |
| 2.6.4 薄化去上皮层修饰羊膜的眼刺激试验 |
| 2.6.5 薄化去上皮层修饰羊膜的皮下植入实验 |
| 2.7 薄化去上皮层修饰羊膜与单克隆人角膜内皮细胞的生物相容性研究 |
| 2.7.1 薄化去上皮层修饰羊膜浸提液的细胞毒性检测 |
| 2.7.2 薄化去上皮层修饰羊膜与单克隆人角膜内皮细胞直接接触的实验 |
| 3 结果 |
| 3.1 薄化去上皮层修饰羊膜的制备与修饰 |
| 3.2 薄化去上皮层修饰羊膜的理化性质 |
| 3.2.1 薄化去上皮层修饰羊膜的厚度 |
| 3.2.2 薄化去上皮层修饰羊膜的透明度 |
| 3.2.3 薄化去上皮层修饰羊膜的透光率 |
| 3.2.4 薄化去上皮层修饰羊膜的重金属含量 |
| 3.3 薄化去上皮层修饰羊膜的生物学评价 |
| 3.3.1 薄化去上皮层修饰羊膜的组织结构 |
| 3.3.2 薄化去上皮层修饰羊膜的热源性 |
| 3.3.3 薄化去上皮层修饰羊膜的细菌内毒素含量 |
| 3.3.4 薄化去上皮层修饰羊膜的眼刺激实验 |
| 3.3.5 薄化去上皮层修饰羊膜的大鼠皮下植入实验 |
| 3.4 薄化去上皮层修饰羊膜与单克隆人角膜内皮细胞的生物相容性研究 |
| 3.4.1 薄化去上皮层修饰羊膜浸提液的细胞毒性 |
| 3.4.2 薄化去上皮层修饰羊膜与单克隆人角膜内皮细胞的直接接触实验 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 第四章 组织工程人角膜内皮的体外重建及其鉴定 |
| 1 材料与用品 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.2 实验仪器 |
| 1.3 实验药品 |
| 1.4 常用溶液的配方 |
| 1.4.1 PBS 缓冲液（见第二章） |
| 1.4.2 D-Hanks 平衡盐溶液（见第二章） |
| 1.4.3 胰酶-EDTA 消化液（见第二章） |
| 1.4.4 0.2%茜素红液（见第三章） |
| 2 方法 |
| 2.1 组织工程人角膜内皮种子细胞的扩增培养 |
| 2.2 薄化去上皮层修饰羊膜的制备与修饰 |
| 2.3 组织工程人角膜内皮的体外重建 |
| 2.4 组织工程人角膜内皮的鉴定 |
| 2.4.1 形态观察 |
| 2.4.2 茜素红染色和细胞密度计数 |
| 2.4.3 免疫荧光化学检测 |
| 2.4.4 石蜡切片及 HE 染色 |
| 2.4.5 扫描电镜检测 |
| 2.4.6 透射电镜检测 |
| 3 结果 |
| 3.1 形态特征 |
| 3.2 茜素红染色 |
| 3.3 细胞密度 |
| 3.4 石蜡切片及 HE 染色结果 |
| 3.5 免疫荧光检测 |
| 3.6 扫描电镜检测 |
| 3.7 透射电镜检测 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 第五章 组织工程人角膜内皮的家猫移植 |
| 1 材料与用品 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.2 实验仪器 |
| 1.3 实验药品 |
| 1.4 常用溶液的配方 |
| 1.4.1 DiI 工作液 |
| 2 方法 |
| 2.1 组织工程人角膜内皮的体外重建 |
| 2.2 组织工程人角膜内皮的家猫后板层角膜内皮移植 |
| 2.3 移植家猫的护理和观察 |
| 2.4 移植家猫术后的在体检测 |
| 2.5 移植家猫术后的离体检测 |
| 2.5.1 DiI 荧光标记检测 |
| 2.5.2 茜素红染色 |
| 2.5.3 石蜡切片切片及 HE 染色 |
| 2.5.4 扫描电镜检测 |
| 2.5.5 透射电镜检测 |
| 2.5.6 房水的二维电泳检测 |
| 3 结果 |
| 3.1 体外重建的组织工程人角膜内皮 |
| 3.2 移植家猫术后的在体检测 |
| 3.2.1 裂隙灯显微镜检测 |
| 3.2.2 角膜厚度检测 |
| 3.2.3 眼压检测 |
| 3.4 移植家猫术后的离体鉴定 |
| 3.4.1 DiI 荧光标记检测 |
| 3.4.2 茜素红染色 |
| 3.4.3 石蜡切片及 HE 染色 |
| 3.4.4 扫描电镜检测 |
| 3.4.5 透射电镜检测 |
| 3.4.6 房水二维电泳检测 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 第六章 组织工程人角膜内皮的猕猴移植 |
| 1 材料与用品 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.2 实验仪器 |
| 1.3 实验药品 |
| 1.4 常用溶液的配方 |
| 1.4.1 DiI 工作液 |
| 2 方法 |
| 2.1 组织工程人角膜内皮的体外重建 |
| 2.2 组织工程人角膜内皮的猕猴后板层角膜内皮移植 |
| 2.3 移植猕猴的护理和观察 |
| 2.4 移植猕猴术后的在体检测 |
| 2.5 移植猕猴术后的离体检测 |
| 2.5.1 DiI 荧光标记检测 |
| 2.5.2 茜素红染色 |
| 2.5.3 石蜡切片切片及 HE 染色 |
| 2.5.4 扫描电镜检测 |
| 2.5.5 透射电镜检测 |
| 3 结果 |
| 3.1 体外重建的组织工程人角膜内皮 |
| 3.2 移植猕猴术后的在体检测 |
| 3.2.1 裂隙灯显微镜检测 |
| 3.2.2 角膜厚度检测 |
| 3.2.3 眼压检测 |
| 3.3 移植猕猴术后的离体检测 |
| 3.3.1 DiI 荧光标记 |
| 3.3.2 茜素红染色 |
| 3.3.3 石蜡切片及 HE 染色 |
| 3.3.4 扫描电镜检测 |
| 3.3.5 透射电镜检测 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 全文总结 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
| 在学期间发表的学术论文及专利 |
（5）苦参碱葡萄糖注射液细菌内毒素检查方法研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 1 绪论 |
| 1.1 研究目的 |
| 1.2 苦参碱葡萄糖注射液简介 |
| 1.3 研究方法 |
| 2 细菌内毒素检查的基础理论 |
| 2.1 细菌内毒素 |
| 2.1.1 细菌内毒素化学结构及化学组份 |
| 2.1.2 内毒素的生物学活性 |
| 2.1.3 细菌内毒素与热原的关系 |
| 2.1.4 标准内毒素与环境内毒素 |
| 2.1.5 凝集反应机理 |
| 2.2 鲎试剂 |
| 2.2.1 鲎 |
| 2.2.2 鲎试剂 |
| 2.3 细菌内毒素检查用水 |
| 3 细菌内毒素检查方法学研究 |
| 3.1 细菌内毒素检查法 |
| 3.2 细菌内毒素检查法的建立 |
| 3.2.1 细菌内毒素检查方法建立的主要步骤 |
| 3.2.2 细菌内毒素检查方法建立时注意事项及常见问题 |
| 4 苦参碱葡萄糖注射液细菌内毒素检查法的建立 |
| 4.1 苦参碱葡萄糖注射液细菌内毒素检查法—凝胶法 |
| 4.1.1 试剂与药品 |
| 4.1.2 试验方法与结果 |
| 5 动态浊度法检测苦参碱葡萄糖注射液中细菌内毒素 |
| 5.1 苦参碱葡萄糖注射液细菌内毒素检查法—动态浊度法 |
| 5.2 材料 |
| 5.2.1 细菌内毒素工作标准品 |
| 5.2.2 动态浊度法鲎试剂 |
| 5.2.3 细菌内毒素检查用水 |
| 5.2.4 苦参碱葡萄糖注射液 |
| 5.2.5 32 孔动态试管仪 |
| 5.3 方法与结果 |
| 5.3.1 仪器条件 |
| 5.3.2 细菌内毒素限值（L）的确定 |
| 5.3.3 标准曲线的制备及可靠性 |
| 5.3.4 样品溶液配制及干扰试验 |
| 5.3.5 苦参碱葡萄糖注射液热原检查结果 |
| 6 细菌内毒素检查法的影响因素及预防对策 |
| 6.1 试剂、试药的影响 |
| 6.1.1 鲎试剂 |
| 6.1.2 标准物质质量的稳定性 |
| 6.1.3 细菌内毒素检查用水 |
| 6.1.4 干扰试验用供试品 |
| 6.1.5 贮藏 |
| 6.2 试验器具的影响 |
| 6.2.1 试验器具选择 |
| 6.2.2 试验器具的处理 |
| 6.3 试验操作的影响 |
| 6.3.1 操作熟练程度 |
| 6.3.2 细菌内毒素国家标准品或工作标准品的复溶 |
| 6.3.3 鲎试剂的复溶 |
| 6.3.4 时间及温度的控制 |
| 6.4 PH 值的影响 |
| 6.4.1 细菌内毒素检测 |
| 6.4.2 干扰试验 |
| 6.4.3 结果分析 |
| 6.5 内毒素累加的影响 |
| 6.6 干扰凝集反应物质的影响 |
| 6.6.1 多糖 |
| 6.6.2 蛋白质 |
| 6.6.3 离子 |
| 6.7 试验环境的影响 |
| 6.8 小结 |
| 7 结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附录 |
（6）可吸收壳聚糖复合膜的制备及预防肌腱粘连功能的实验研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 缩略语 |
| 第一章 文献综述 |
| 第一节 肌腱结构和粘连机制的研究 |
| 第二节 肌腱粘连防治的研究进展 |
| 第三节 甲壳素及其衍生物的性质和在医用材料方面的应用 |
| 第四节 壳聚糖膜预防术后粘连的研究进展 |
| 第二章 医用级壳聚糖、羧甲基壳聚糖、羟丙基壳聚糖的制备纯化和性质分析 |
| 第一节 医用级甲壳素及其衍生物的制备及性质研究 |
| 1. 实验材料和试剂 |
| 2. 主要仪器 |
| 3. 实验方法 |
| 4. 实验结果 |
| 5. 讨论 |
| 第二节 不同脱乙酰度壳聚糖膜的制备及性质研究 |
| 1. 实验材料和试剂 |
| 2. 主要仪器 |
| 3. 实验方法 |
| 4. 实验结果 |
| 5. 讨论 |
| 第三节 羧甲基甲壳素和羧甲基壳聚糖的制备和性质研究 |
| 1. 实验材料和试剂 |
| 2. 主要仪器 |
| 3. 实验方法 |
| 4. 实验结果 |
| 5. 讨论 |
| 第四节 羟丙基壳聚糖的制备和性质研究 |
| 1. 实验材料和试剂 |
| 2. 主要仪器 |
| 3. 实验方法 |
| 4. 实验结果 |
| 5. 讨论 |
| 第三章 可吸收壳聚糖复合膜的制备和性质研究 |
| 1. 实验材料和试剂 |
| 2. 主要仪器 |
| 3. 实验方法 |
| 4. 实验结果 |
| 5. 讨论 |
| 第四章 复合膜对术后肌腱粘连的预防作用研究 |
| 1. 实验材料和试剂 |
| 2. 主要仪器 |
| 3. 实验方法 |
| 4. 实验结果 |
| 5. 讨论 |
| 第五章 复合膜预防粘连机理的研究与探讨 |
| 1. 实验材料和试剂 |
| 2. 主要仪器 |
| 3. 实验方法 |
| 4. 实验结果 |
| 5. 讨论 |
| 总结 |
| 本文创新点 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历及所获奖励 |
| 发表的学术论文 |
（7）乳炎康粉针剂的制备及药效学研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 第一章 文献综述 |
| 1 奶牛乳房炎研究进展 |
| 2 阿米卡星研究进展 |
| 3 替米考星在兽医临床应用研究进展 |
| 第二章 乳炎康粉针剂的制备 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.1.1 仪器 |
| 1.1.2 药品与试剂 |
| 1.1.3 菌种 |
| 1.1.4 培养基 |
| 1.2 试验方法 |
| 1.2.1 阿米卡星和替米考星配伍理化性状的考察 |
| 1.2.2 单价药物的最小抑菌浓度和最小杀菌浓度测定 |
| 1.2.3 阿米卡星与替米考星联合药敏试验 |
| 1.2.4 阿米卡星和替米考星配伍最佳配比的确定 |
| 1.2.5 乳炎康粉针剂处方的筛选 |
| 1.2.6 乳炎康粉针剂的制备 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 阿米卡星和替米考星配伍理化性状考察结果 |
| 2.1.1 阿米卡星和替米考星配伍物理性状的考察结果 |
| 2.1.2 阿米卡星和替米考星配伍化学性状考察结果 |
| 2.2 单价药物最小抑菌浓度和最小杀菌浓度的测定结果 |
| 2.2.1 单价药物MBC 测定结果 |
| 2.2.2 单价药物MIC 测定结果 |
| 2.3 阿米卡星与替米考星联合药敏试验结果 |
| 2.3.1 联合药敏试验结果 |
| 2.3.2 结果判定 |
| 2.4 阿米卡星和替米考星配伍最佳配比结果 |
| 2.5 乳炎康粉针剂处方的筛选结果 |
| 2.5.1 辅料筛选结果 |
| 2.5.2 辅料中柠檬酸和柠檬酸钠最佳配比 |
| 3 讨论 |
| 3.1 阿米卡星与替米考星联合用药 |
| 3.2 阿米卡星和替米考星配伍最佳配比的分析 |
| 4 小结 |
| 第三章 乳炎康粉针剂的质量检查 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.1.1 仪器 |
| 1.1.2 菌种 |
| 1.1.3 实验动物 |
| 1.1.4 药品 |
| 1.2 试验方法 |
| 1.2.1 无菌检查 |
| 1.2.2 热原检查 |
| 1.2.3 澄明度检查 |
| 1.2.4 酸碱度检查 |
| 2 结果 |
| 2.1 无菌检查结果 |
| 2.2 热原检查结果 |
| 2.3 澄明度检查结果 |
| 2.4 酸碱度检查结果 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 第四章 乳炎康粉针剂稳定性试验 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.1.1 仪器 |
| 1.1.2 试剂 |
| 1.2 试验方法 |
| 1.2.1 含量测定 |
| 1.2.2 稳定性试验 |
| 2 结果 |
| 2.1 含量测定 |
| 2.1.1 阿米卡星和替米考星含量测定方法的建立 |
| 2.1.2 样品含量测定 |
| 2.2 稳定性试验结果 |
| 2.2.1 高温试验结果 |
| 2.2.2 高湿度试验结果 |
| 2.2.3 强光照射试验结果 |
| 2.2.4 加速试验结果 |
| 2.2.5 经典恒温试验 |
| 2.2.6 有效期的计算 |
| 2.2.7 临界相对湿度的测定结果 |
| 3 讨论 |
| 3.1 含量检测方法的可靠性 |
| 3.2 有效期的确定 |
| 4 小结 |
| 第五章 乳炎康粉针剂安全性试验 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.1.1 器材 |
| 1.1.2 实验动物 |
| 1.1.3 药品 |
| 1.2 试验方法 |
| 1.2.1 乳炎康粉针剂对雏鸡的急性毒性试验 |
| 1.2.2 乳炎康粉针剂对局部刺激试验 |
| 1.2.3 溶血试验 |
| 2 结果 |
| 2.1 乳炎康粉针剂对雏鸡的急性毒性试验结果 |
| 2.2 乳炎康粉针剂对局部刺激试验 |
| 2.2.1 家兔股四头肌试验结果 |
| 2.2.2 黏膜试验结果 |
| 2.3 溶血试验结果 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 第六章 乳炎康粉针药效学试验 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（8）中药组方治疗奶牛子宫内膜炎的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 1 前言 |
| 1.1 奶牛子宫内膜炎研究进展 |
| 1.1.1 奶牛子宫内膜炎的分类和临床症状 |
| 1.1.2 奶牛子宫内膜炎的病因 |
| 1.1.3 奶牛子宫内膜炎的发病机理 |
| 1.1.4 奶牛子宫内膜炎的诊断 |
| 1.1.5 奶牛子宫内膜炎的治疗 |
| 1.1.6 奶牛子宫内膜炎的预防 |
| 1.2 大肠杆菌脂多糖研究进展 |
| 1.2.1 脂多糖概述 |
| 1.2.2 脂多糖与子宫内膜炎的关系 |
| 1.3 中药治疗奶牛子宫内膜炎研究进展 |
| 1.4 炎性细胞因子与奶牛子宫内膜炎的关系 |
| 1.4.1 IL-2、IL-6、IL-8 及TNF-α简介 |
| 1.4.2 IL-2、IL-6、IL-8 及TNF-α与子宫机能的关系 |
| 1.4.3 细胞因子与母畜流产 |
| 1.5 氧自由基与奶牛子宫内膜炎的关系 |
| 1.5.1 氧自由基和抗氧化酶简介、主要生物学作用 |
| 1.5.1.1 SOD、GSH-Px 与MDA |
| 1.6 试验研究的目的和意义 |
| 2 试验研究 |
| 2.1 治疗奶牛子宫内膜炎中药组方的筛选研究 |
| 2.1.1 试验材料 |
| 2.1.1.1 试验动物 |
| 2.1.1.2 主要仪器设备 |
| 2.1.1.3 培养基及主要试剂 |
| 2.1.2 试验方法 |
| 2.1.2.1 奶牛子宫内膜炎病原菌的分离鉴定 |
| 2.1.2.2 药敏试验 |
| 2.1.2.3 治疗奶牛子宫内膜炎的中药组方筛选研究 |
| 2.2 治疗奶牛子宫内膜炎中药组方的药效学研究 |
| 2.2.1 试验材料 |
| 2.2.2 试验方法 |
| 2.2.2.1 中药组方体外抑菌试验 |
| 2.2.2.2 中药组方体外抗炎试验 |
| 2.3 中药组方的安全性评价 |
| 2.3.1 中药组方的刺激性试验 |
| 2.3.2 中药组方的过敏性试验 |
| 2.4 中药组方和脂多糖治疗子宫内膜炎的临床药理学研究 |
| 3.4.1 试验材料 |
| 3.4.1.1 试验仪器 |
| 2.4.1.2 主要试剂 |
| 2.4.1.3 试验动物的选择和分组 |
| 2.4.2 试验方法 |
| 2.4.2.1 样品的采集和处理 |
| 2.4.2.2 中药组方和LPS 对子宫冲洗液粒细胞的数量和活力的影响 |
| 2.4.2.3 中药组方和LPS 对奶牛外周血中细胞因子的影响 |
| 2.4.2.4 中药组方和LPS 对奶牛抗氧化作用的影响 |
| 2.4.2.5 奶牛妊娠率的统计 |
| 2.5 数据处理 |
| 3 试验结果 |
| 3.1 治疗奶牛子宫内膜炎中药组方的筛选研究结果 |
| 3.1.1 细菌分离鉴定结果 |
| 3.1.1.1 产后正常复旧的奶牛子宫内细菌分离结果 |
| 3.1.1.2 子宫内膜炎奶牛细菌分离鉴定结果 |
| 3.1.2 奶牛子宫内容物细菌生化鉴定结果 |
| 3.1.2.1 需氧菌生化鉴定结果 |
| 3.1.2.2 厌氧菌生化鉴定结果 |
| 3.1.3 药敏试验结果 |
| 3.1.3.1 需氧菌西药药敏试验结果 |
| 3.1.3.2 厌氧菌西药药敏试验结果 |
| 3.1.3.3 中药药敏试验结果 |
| 3.1.4 正交法体外抑菌作用中药组方筛选试验结果 |
| 3.2 治疗奶牛子宫内膜炎中药组方的药效学研究 |
| 3.2.1 中药组方抑菌作用试验结果 |
| 3.2.2 中药组方抗炎试验结果 |
| 3.2.2.1 二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响 |
| 3.2.2.2 甲醛致小鼠足跖肿胀的影响 |
| 3.2.2.3 甲醛致炎后足跖中PGE2含量的影响 |
| 3.3 中药组方的安全性评价 |
| 3.3.1 中药组方对家兔眼刺激性试验 |
| 3.3.2 中药组方对豚鼠的皮肤过敏性试验 |
| 3.4 脂多糖及中药组方治疗子宫内膜炎的临床药理学研究结果 |
| 3.4.1 子宫冲洗液粒细胞的数量和活力的测定结果 |
| 3.4.2 外周血中细胞因子含量测定结果 |
| 3.4.2.1 IL-2、IL-6、IL-8 和TNF-α标准曲线的绘制 |
| 3.4.2.2 IL-2、IL-6、IL-8 和TNF-α含量的测定结果 |
| 3.4.3 外周血中GSH-Px、SOD、MDA 和T-AOC 测定结果 |
| 3.4.3.1 GSH-Px 测定结果 |
| 3.4.3.2 SOD 测定结果 |
| 3.4.3.3 MDA 含量测定结果 |
| 3.4.3.4 T-AOC 含量测定结果 |
| 3.4.4 妊娠率和受胎率统计结果 |
| 4 讨论 |
| 4.1 治疗奶牛子宫内膜炎中药组方的筛选研究 |
| 4.1.1 病原菌分离、鉴定情况 |
| 4.1.1.1 产后正常奶牛子宫内细菌区系 |
| 4.1.1.2 患子宫内膜炎奶牛子宫内细菌区系 |
| 4.1.2 致病菌对药物的敏感性试验 |
| 4.2 中药组方的筛选研究 |
| 4.3 治疗奶牛子宫内膜炎中药组方的药效学研究 |
| 4.4 中药组方的安全性评价 |
| 4.5 中药组方和脂多糖治疗子宫内膜炎的临床药理学研究 |
| 4.5.1 给药后动物的临床表现 |
| 4.5.2 中药组方和LPS 对子宫冲洗液粒细胞的数量和活力的影响 |
| 4.5.2.1 LPS 治疗奶牛子宫内膜炎子宫内细胞的影响 |
| 4.5.2.2 中药组方治疗奶牛子宫内膜炎子宫内细胞的影响 |
| 4.5.2.3 中药组方+LPS 治疗奶牛子宫内膜炎子宫内细胞的影响 |
| 4.5.3 中药组方和LPS 对奶牛外周血中细胞因子的影响 |
| 4.5.3.1 LPS 治疗奶牛子宫内膜炎细胞因子含量的影响 |
| 4.5.3.2 中药组方治疗奶牛子宫内膜炎对细胞因子含量的影响 |
| 4.5.3.3 中药组方+LPS 治疗奶牛子宫内膜炎对细胞因子含量的影响 |
| 4.5.4 中药组方和LPS 治疗奶牛子宫内膜炎对奶牛抗氧化作用的影响 |
| 4.5.4.1 LPS 治疗奶牛子宫内膜炎抗氧化作用的影响 |
| 4.5.4.2 中药组方治疗奶牛子宫内膜炎抗氧化作用的影响 |
| 4.5.4.3 中药组方+LPS 治疗奶牛子宫内膜炎对抗氧化作用的影响 |
| 4.6 中药组方和LPS 对奶牛妊娠率的影响 |
| 5 结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 作者简介 |
（9）《中华人民共和国兽药典》二○○○年版一部收载化学药品修订情况介绍（论文提纲范文）
| 1 二甲氧苄啶 |
| 2 二巯丙磺钠 |
| 3 三氮脒 |
| 4 注射用三氮脒 |
| 5 土霉素 |
| 6 盐酸土霉素 |
| 7 注射用盐酸土霉素 |
| 8 山梨醇注射液 |
| 9 马来酸麦角新碱 |
| 10 马来酸氯苯那敏片 |
| 11 乌洛托品 |
| 12 乌洛托品注射液 |
| 13 双羟萘酸噻嘧啶 |
| 14 甘油 |
| 15 甘露醇 |
| 16 甘露醇注射液 |
| 17 丙酸睾酮 |
| 18 丙酸睾酮注射液 |
| 19 右旋糖酐70 |
| 20 右旋糖酐70葡萄糖注射液 |
（10）细菌内毒素检查法测定注射用硫酸链霉素热原的观察（论文提纲范文）
| 1 材 料 |
| 2 方法与结果 |
| 2.1 细菌内毒素限值L的计算[1] |
| 2.2 最大有效稀释倍数确定 |
| 2.3 干扰试验预试验 |
| 2.4 干扰试验[1]取3批合格的供试品, 用BET水5ml配制成20万单位·ml-1的溶液, 再稀释200倍。 |
| 2.5 供试品的细菌内菌内毒素检查试验 |
| 3 讨 论 |
四、细菌内毒素检查法测定注射用硫酸链霉素热原的观察（论文参考文献）
- [1]抗H株小鹅瘟病毒卵黄抗体的研制与质量评估[D]. 胡瑞鸿. 东北农业大学, 2020(07)
- [2]清火片标准中检测方法的提高与修订研究[J]. 袁航,谢寒冰,陈安珍,王海英. 中国药品标准, 2019(01)
- [3]靶向黑色素瘤重组免疫毒素MSH-PE38KDEL的表达、纯化及其靶向抗肿瘤生物学效应[D]. 惠琦. 吉林大学, 2014(09)
- [4]组织工程人角膜内皮的体外重建及其动物移植试验[D]. 马西亚. 中国海洋大学, 2014(01)
- [5]苦参碱葡萄糖注射液细菌内毒素检查方法研究[D]. 彭越. 重庆大学, 2008(06)
- [6]可吸收壳聚糖复合膜的制备及预防肌腱粘连功能的实验研究[D]. 常菁. 中国海洋大学, 2008(03)
- [7]乳炎康粉针剂的制备及药效学研究[D]. 孙雪峰. 西北农林科技大学, 2007(06)
- [8]中药组方治疗奶牛子宫内膜炎的研究[D]. 赵树臣. 内蒙古农业大学, 2007(03)
- [9]《中华人民共和国兽药典》二○○○年版一部收载化学药品修订情况介绍[J]. 聂严,赵晖,王国忠. 中国兽药杂志, 2002(03)
- [10]细菌内毒素检查法测定注射用硫酸链霉素热原的观察[J]. 雷宇. 医学文选, 2001(06)